人间隙连接蛋白 31 相互作用蛋白Annexin Ⅱ的筛选与证实

间隙连接蛋白 31 (connexin31 , Cx31) 是间隙连接蛋白 (connexin) 家族的一员,目前对于 Cx31 的功能及其调节方式知之甚少 . 采用固相多肽合成的方法合成 Cx31 羧基端一个多肽片段 (250~266) ,经 HPLC 纯化后偶联到匙孔血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化、经蛋白质印迹、细胞免疫荧光染色、免疫沉淀证实得到的抗体为特异性抗 Cx31 的抗体 . 运用制备的抗 Cx31 多克隆抗体免疫沉淀, SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解, Q-TOF 质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,运用抗体 pull-down 实验,筛选到可能相互作用蛋白 annexin Ⅱ,经过免疫共沉淀、细胞免疫共定位等实验证实 annexin Ⅱ与 Cx31 相互作用 .     

生物技术在中国

一、前言 生物技术,随着基因重组、细胞融合、酶和细胞的固定化等一系列新技术的问世,一举改变了它传统而古老的面貌跃居为重要的新技术行列。由于生物技术的异军突起,把人类从当今面临能源、食品、资源与环境等重大问题而一筹莫展中解放出来,给人类带来了希望。     

甘薯块根特异蛋白——Sporamin的研究进展

Sporamin是在甘薯块根中特异表达的一类特殊贮藏蛋白,它不仅具有一般贮藏蛋白的特性,而且还具有胰蛋白酶抑制剂的活性,并与甘薯块根的形成过程密切相关。本文就近年来对该块根特异蛋白的特性和功能,以及在分子生物学水平上的研究进展进行了综述。     

在蔗糖预培养诱导耐脱水性过程中黄皮胚轴的水分状态和可溶性蛋白含量的变化

逐步增加培养基的蔗糖浓度可提高黄皮胚轴的耐脱水性。用差示扫描量热仪（DSC）和SDS—PAGE方法探讨了黄皮胚轴在耐脱水性获得过程中的水分状态和可溶性蛋白的变化。DSC图谱显示,蔗糖预培养胚轴的升温图谱与对照不同,有比较明显的台阶式变化,有玻璃化形成的倾向;应用线性回归方程法或冰熔化热法计算黄皮胚轴的不可冻结水,发现蔗糖预培养胚轴的不可冻结水含量与对照胚轴无显著差异。蛋白分析表明,蔗糖预培养诱导黄皮胚轴中可溶性蛋白增加68％,其中尤以20kD蛋白的增幅最大。     

凝胶电泳分析蛋白酶活性的技术改进

蛋白酶在植物生长代谢过程中具有重要的生理作用。本文探讨了利用“凝胶电泳技术”分析蛋白酶活性的改进方法,通过改变电泳分离胶中底物蛋白浓度估算了“目标蛋白酶”分子量;通过改变电泳前的样品处理条件了解蛋白酶的部分特性;采用分离胶切割法了解“目标蛋白酶”的最适反应温度范围、最适反应pH范围及蛋白酶的类型等。并对影响凝胶电泳蛋白酶活性检测结果的各种因素作了分析。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在乳腺癌细胞移动及粘附中的作用

探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 2在乳腺癌细胞MCF 7的移动及粘附中的作用 .利用基因重组技术分别将野生型SHP 2与突变型SHP 2与绿色荧光蛋白GFP的基因片段构成重组质粒 (SHP 2 GFP、SHP 2C >S GFP) .脂质体转染法分别转入MCF 7中 ,表达成功后筛选并建立SHP 2 GFP和SHP 2C >S GFP细胞株 .荧光显微镜观察细胞移动情况 ,免疫印迹法检测粘附分子E 钙粘蛋白和金属蛋白酶MMP 1及MMP 9的表达 .实验后建立SHP 2 GFP及SHP 2C >S GFP细胞株 ,同时观察到SHP 2C >S GFP细胞的形态发生明显改变 :从梭形状态变成圆形状态 .荧光显微镜发现 ,MCF 7细胞和SHP 2 GFP、SHP 2C >S GFP转染的细胞在 3h、6h、9h的移动情况分别是MCF 7为 10 %、2 3%、5 4% ,SHP 2 GFP为 15 %、4 9%、98% ,SHP 2C >S GFP为 4 %、11%、30 % .免疫印迹结果表明 ,SHP 2C >S GFP细胞的E 钙粘蛋白表达比SHP 2 GFP细胞明显升高 (P <0 0 5 ) .MMP 1及MMP 9的表达量在SHP 2 GFP细胞中有所增强 (P <0 0 5 ) .实验表明 ,SHP 2可能通过调节粘附分子和基质金属磷酸酶而在细胞移动、粘附中发挥重要作用     

Those amazing dinoflagellate chromosomes

Dinoflagellates are a very large and diverse group of eukaryotic algae that play a major role in aquaticfood webs of both fresh water and marine habitats. Moreover, the toxic members of this group posea health threat in the form of red tides. Finally, dinoflagellates are of great evolutionary importance,because of their taxonomic position, and their unusual chromosome structure and composition. While the cytoplasm of dinoflagellates is typically eukaryotic, the nucleus is unique when compared to the nucleusof other eukaryotes. More specifically, while the chromosomes of all other eukaryotes contain histones,dinoflagellate chromosomes lack histones completely. There are no known exceptions to this observation: all dinoflagellates lack histones, and all other eukaryotes contain histones. Nevertheless, dinoflagellates remain a relatively unstudied group of eukaryotes.     

跟骨骨折手术治疗并发症原因分析及预防

目的:探讨手术内固定治疗跟骨骨折发生并发症的原因及预防.方法:2007年5月～2010年9月应用切开复位跟骨钛板和闭合橇拔复位斯氏针内固定术治疗的64例跟骨骨折患者中,对出现并发症的患者进行回顾性分析,探讨其发生并发症的可能原因.结果:其中2例切口感染浅表坏死,1例腓肠神经损伤,腓骨长短肌腱断裂1例,腓骨肌腱炎4例,创伤性关节炎5例,复位丢失3例.结论:应根据骨折类型选择恰当的治疗方案,正确把握手术时机、规范操作,可有效减少并发症,获得满意的疗效.     

Dendrin在初级感觉神经元内的表达

Dendrin作为一类新的树突蛋白,在脑内的表达随着行为活动的改变而变化。最近本课题组采用免疫组织化学方法对dendrin在小鼠初级感觉神经元内的表达进行了研究,并进一步研究外周神经损伤后dendrin在背根神经节和脊髓背角内的表达变化。本文还就dendrin的生物学特征以及在神经系统内表达情况对其近期研究成果和未来发展趋势进行综述。     

泛醌结合蛋白（QPs） 重组活性必需羧基的定量研究

用Ｃ＾１４参入法确定了在泛醌结合蛋白ＱＰｓ中有四个对重组活性必需羧基,它们全部定位在２４０００亚基上。