Na+和Cl- 在小麦叶肉细胞超微结构中的分布

小麦经200mmol NaCl溶液培养3天后,采用改进的焦锑酸钾方法对叶肉细胞中Na~+及Cl~-进行超微结构定位。电镜观察及电子探针X-射线显微分析表明,Cl~-主要分布在细胞间隙、细胞壁及细胞质膜中。用电子探针X~-射线能谱仪在这些部位中未探测出Na~+,提示Cl~-比Na~+更多地进入小麦的叶肉细胞。此外,在叶肉细胞的细胞核、线粒体及叶绿体中也可见到离子沉淀颗粒。经氯化钠溶液培养的小麦幼苗,其叶肉细胞的叶绿体、线粒体的超微结构受损,植株生长受到抑制。     

膜钠钙交换蛋白和过氧化氢交互作用对细胞内钙稳态调控

本研究旨在阐明过氧化氢（H2O2）和膜钠钙交换蛋白相互作用对胞浆钙[Ca^2 ],的调控。在稳定表达钠钙交换蛋白CK1．4细胞上,用^45Ca同位素液闪计数法测定钠钙交换蛋白的活性;用fura-2荧光探针和340／380nm双兴奋波长荧光影像技术测定钙释放和[Ca^2 ]i。两因素两水平和三因素两水平正交分析表明10mmol/L H2O2与150mmol/L细胞外钠（[Na^ ]o,1mmol/L细胞外钙[Ca^2 ],相互作用或10mmol/L H2O2分别与150mmol/L[Na ]。或1[Na^ ]。激活钠钙交换蛋白,排出细胞内钙离子,降低[Ca2 ]i。当[Na^ ]。递减至0mmol/L时,10mmol/L H2O2直接抑制钠钙交换蛋白的活性,增加钙释放和升高[Ca2 ]i.在不同[Na^=},梯度中,10mmol/LH2O2对膜的钠钙交换活动和[Ca2 ],起双重调节作用,即抑制或增加钙内流和[Ca^2=]i.10mmol/L H2O2与膜钠钙交换蛋白和[Ca2 ]。相互作用对钠钙交换活动方向,钙释放和[Ca^2_]起负反馈谳节作用。     

人钠/二羧酸协同转运蛋白1基因融合表达及其抗体制备

利用DNA重组技术 ,将编码人钠 羧酸协同转运蛋白 1(hNaDC1)抗原表位区 (W138 Q2 19)的cDNA克隆至融合表达载体pGEX 5X 1,构建重组质粒pGEX hNaDCL6 .在大肠杆菌BL2 1中 ,经IPTG诱导 ,获得谷胱甘肽巯基转移酶 (GST) hNaDC1重组融合蛋白的表达 .以谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析 ,获得纯化的GST hNaDC1.以此为免疫原制备的抗hNaDC1抗体可特异性识别人类和大鼠肾组织以及小肠组织中天然的钠 二羧酸协同转运蛋白 1.利用该抗体 ,首次证实了hNaDC1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘 ,与大鼠钠 二羧酸协同转运蛋白 1(SDCT1)分布一致 .     

盐胁迫条件下杨树盐分与甜菜碱及糖类物质变化

以抗旱耐盐性强的胡杨（Populus euphratica) 和非抗盐的群众杨（P.popularis 35-44'）为实验材料,研究了盐胁迫条件下盐分与甜菜碱,还原糖,蔗糖以及水溶性糖等细胞相容溶质的动态变化,两种杨树在盐处理期间表现出明显差异;群众杨下部叶片首先表现出盐害症状,处理后两周苗木上部叶片也出现盐害并脱落,而胡杨在试验期间仅下部叶片发黄脱落,盐处理15天后落叶量仅为16％,群众杨盐害症状的出现主要是由叶片中盐离子的大量累积所致。与之比较,胡杨拒吸Na^ 的能力及控制Cl^-转运的能力均优于群众杨。另外,胡杨的耐盐性强于群众杨也与其有机溶质的变化有关,受到盐胁迫后胡杨根叶中甜菜碱浓度显著提高,在处理后15天达到最高值,特别是叶片中甜菜碱的浓度提高了243倍,达到1899．8umol/L,根中甜菜碱含量也增加了9倍,此外,盐处理后胡杨叶和根中的还原糖,水溶性糖和蔗糖含量均呈明显上升趋势,分别在第4天和第15天达到峰值,与胡杨相反,耐盐性弱的群众杨在盐胁迫期间,叶中甜菜碱和糖含量并无显著提高,根中糖分水平还明显降低,由此可以得出结论,胡杨渗透调节能力高于群众杨,是其耐盐性强的重要生理基础之一。     

2型糖尿病治疗新靶点SGLT2抑制剂的研究进展

钠-葡萄糖协同转运蛋白（SGLT）是一类在小肠粘膜（SGLT1）和肾近曲小管（SGLT2和SGLT1）中发现的葡萄糖转运基因家族。它们用于肾脏血糖的重吸收。SGLT2是一种低亲和力的转运系统,其在肾脏中特异性的表达并且在近曲小管的肾脏血糖重吸收中发挥非常重要的作用。选择性地抑制SGLT2,是一种创造性的治疗策略,即通过增加尿糖的排出来治疗2型糖尿病患者。本文介绍了SGLT2抑制剂在2型糖尿病治疗研究方面的最新进展,重点综述了SGLT2抑制剂的作用机理、部分在研SGLT2抑制剂的生物活性数据以及临床试验结果。     

培养的大脑皮层、海马及交感神经细胞钠、钾和钙离子通道的全细胞记录技术

目的: 建立新生大鼠大脑皮层、海马细胞及交感神经元细胞的培养方法及其钠、钾和钙通道的膜片钳全细胞记录技术.方法: 取出生1～3 d的大鼠大脑皮层、海马及交感神经节,用胰蛋白酶(0.125%)消化组织并分离出神经细胞,种植在涂有多聚赖氨酸的35 mm培养皿中,用高糖的DMEM培养液培养,一周后,镜下可见神经细胞壁光滑、完整,周围有明亮的光润,在高倍倒置显微镜下可见到完整的细胞核及均匀的胞浆,细胞间形成良好的突触连接,可用于细胞膜片钳记录.结果: 用胰蛋白酶消化分离培养的神经细胞,功能状态良好,在膜片钳全细胞记录中,易形成细胞与记录电极间的高阻抗封接,可分别记录到INa、IA、IK和ICa.结论:在神经系统电生理学研究中,此方法可应用于中枢神经系统不同脑区培养以及钠、钾和钙通道电流的记录.     

HPLC法测定病毒性疫苗中EDTA二钠残余量

实验中用高效液相色谱法测定病毒性疫苗中乙二胺四乙酸二钠残余量。EDTA二钠与FeCl3反应生成的络合物NaFeEDTA在257nm波长处有明显吸收,以C18柱将它与其余组分分开后,用外标法建立五级校正曲线可测定制品中EDTA-2Na含量。该方法准确,快速,可用于检测病毒性疫苗中残余乙二胺四乙酸二钠。     

超声造影联合微血管成像技术与钆塞酸二钠增强MRI评价原发性肝癌TACE术后复发的诊断效能对照分析

摘要 目的：探讨超声造影（CEUS）联合微血管成像（SMI）技术与钆塞酸二钠磁共振增强（Gd-EOB-DTPA MR增强）扫描对于原发性肝癌（HCC）经导管肝动脉化疗栓塞（TACE）术后复发的诊断效能。方法：收集2014年1月-2019年6月间我院HCC-TACE术后定期随访期间复发且存在完整CEUS、SMI、Gd-EOB-DTPA MR增强、DSA检查影像资料的患者74例,以最终DSA检查为金标准,分别比较CEUS联合SMI、Gd-EOB-DTPA MR增强及CEUS联合SMI+Gd-EOB-DTPA MR增强对于术后复发诊断的准确度、特异度、敏感度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数,应用Kappa检验几种检查方式与DSA检查结果的一致性,并对不同诊断方式的诊断效力行组间两两比较。结果：74例HCC-TACE术后DSA证实复发者病灶共99个,CEUS+SMI+Gd-EOB-DTPG MR增强联合检查方法具有最高的诊断价值,其准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数及Kappa值分别为94.66%,95.96%,90.63%,96.94%,87.88%,0.87,0.90。组间比较CEUS联合SMI与Gd-EOB-DTPA MR增强诊断HCC-TACE术后复发具有统计学差异（P＜0.05）,但Gd-EOB-DTPA MR增强对于≤2 cm的病灶诊断率明显高于CEUS联合SMI（P＜0.05）,CEUS联合SMI+Gd-EOB-DTPA MR增强较CEUS联合SMI或Gd-EOB-DTPA MR增强诊断率比较均具有统计学差异（P＜0.05）。结论：CEUS联合SMI、Gd-EOB-DTPA MR增强检查均能发现HCC-TACE术后复发病灶,其中Gd-EOB-DTPA MR增强对于≤2 cm病灶诊断效果佳,但CEUS联合SMI+Gd-EOB-DTPA MR增强更有助于HCC-TACE术后复发的早期诊断,可进一步指导临床治疗。     

细胞外pH值降低可增强豚鼠心室肌细胞持续性钠电流

应用全细胞和单通道(贴附式)膜片钳技术观察胞外pH值降低对心室肌细胞持续性钠电流(persistent sodium current,ⅠNa.P)的影响,探讨其作用机制。结果显示:全细胞记录模式下,细胞外pH值降低可明显增大ⅠNa.P,且呈H+浓度依赖性增强。当细胞外pH值从对照值的7．4降低为6．5时,ⅠNa.P的电流密度从(0．347±0．067)pAJpF增加到(0．817±0．137)pA/pF(P< 0．01,n=6),而加入还原剂1,4-二硫甙苏糖醇(dithiothreitiol,DTT,1 mmol／L)后可使,ⅠNa.P的电流密度回落到(0．233±0．078)pA／pF (P<0．01 vs pH 6．5,n=6)。单通道记录模式中,当细胞外pH值从对照值的7．4降低为6．5时,持续性钠通道的开放概率和开放时间分别从0．021±0．007和(0．899±0．074)ms增加到0．205±0．023和(1．593±0．158)ms(P<0．叭,n=6),再加入还原剂DTT(1 mmol／L)使开放概率和开放时间分别回落到0．019±0．005和(0．868±0．190)ms(P<0．01 vs pH 6．5,n=6);加入蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂bisindolylmaleimide(BIM,5μmol/L)可使pH 6．5时增大的,ⅠNa.P明显减小,开放概率和开放时间分别从0．214±0．024和(1．634±0．137)ms回落到0．025±0．006和(0．914±0．070)ms(P<0．01 vs pH 6．5,n=6)。结果表明,细胞外pH值降低可诱发心室肌细胞ⅠNa.P增大,其机制可能与PKC的激活有关。     

未成熟钠通道调控大鼠胚胎神经干细胞分化

钠通道在各类神经元上高表达,参与细胞多种生理功能的调节,是神经元实现功能活动的基本单位．未成熟神经元上钠/钙通道所诱发和自发的电位活动对后期的发育成熟至关重要．然而,发育中的钠通道是否参与神经干细胞(neural stem cells, NSCs)分化的调控尚不清楚．本研究证明,未成熟的钠通道参与NSCs分化调控．Western印迹结果显示,在分化第1,3,5,7 d的NSCs上钠通道和胞外信号调节激酶（ERK）的蛋白表达与分化时间正相关.免疫组化结果发现,与对照组比较,加入电压门控钠通道阻断剂TTX可明显下调NeuN、GFAP和Gal-c在NSCs中的表达（P＜0.05）,提示钠通道参与NSCs分化的调控.当采用veratridine激动钠通道后,激光共聚焦检测到细胞内Ca2+浓度明显升高,免疫组化和Western印迹结果显示细胞内Ca2+浓度明显升高,p-ERK表达量明显上调;相反,TTX可明显阻断Veratridine所引起的细胞内Ca2+浓度上调,并使p-ERK峰值明显降低和延后（P＜0.05）．研究结果表明,未成熟钠通道可通过激活ERK信号途径促进NSCs的分化．钠通道的这种作用可能是由钙离子介导的,其详尽机制有待进一步研究．