类植物乳杆菌的耐酸、耐胆盐及降胆固醇特性

摘要：【目的】研究了类植物乳杆菌Ⅱ32的酸、胆盐耐受性和胆固醇去除能力,并通过菌株生长和胆固醇去除的关系探讨可能的机理。【方法】菌株Ⅱ32生长在高胆固醇MRS培养基中,胆固醇的检测通过气相色谱法。检测菌株在不同生长阶段对胆固醇的去除情况。【结果】菌株Ⅱ32具有酸耐受性、胆盐耐受性和一定的胆固醇清除能力。菌株在pH2.0培养2 h后仍能达到104 cfu/mL;加胆盐（0.3%～0.4%）对菌株生长量达到OD值0.6的时间延迟在0.5 h以内;热杀死的和休眠的细胞能去除很少的胆固醇,分别是5.64、5.90 mg/g细胞干重,而生长的细胞去除的胆固醇达到16.98 mg/g细胞干重。另外,研究表明胆固醇去除与菌体的生长有一定的相关性。【结论】菌株Ⅱ32去除胆固醇可能的机理是菌体对胆固醇的吸附及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用,为此该菌株具有添加到食品中来降低血液胆固醇的潜能。     

副格氏乳杆菌IMAU FB017的遗传背景和益生相关基因分析

【目的】副格氏乳杆菌(Lactobacillus paragasseri)作为格式乳杆菌(Lactobacillus gasseri)的近源物种,是肠道、生殖道重要菌种之一。本研究团队前期发现L. paragasseri IMAU FB017具有良好的胃酸和胆盐耐受性,拟从基因组水平解析IMAU FB017的遗传背景和功能基因特征,并挖掘潜在益生特性基因,为其开发利用奠定遗传学基础。【方法】采用Nanopore和Illumina两种测序技术完成了IMAUFB017全基因组测序及完成图组装,并结合NCBI已公开的18株L.paragasseri基因组序列进行比较基因组学分析。利用Roary软件识别核心基因集与泛基因集;采用Rapid Annotation using Subsystem Technology (RAST)网站对基因组进行功能注释,以探究IMAU FB017基因组特征。【结果】结果显示IMAU FB017基因组包含1条环状染色体和1个质粒,其中环状染色体大小为1 880 023 bp,GC含量为34.90%,包含1 851个蛋白质编码区(protein-coding seq...     

影响多粘菌素B对绿脓杆菌杀菌效力的主要环境因素的研究

本文通过改变温度,水活度,气体条件和营养含量等影响绿脓杆菌生长的主要环境因素,测定多粘菌素B对绿脓杆菌的最小杀菌浓度(MBC)。结果表明环境因素导致或显著影响绿脓杆菌对抗生素的生态耐受性。实验表明多粘菌素B对绿脓杆菌的杀菌效力,除药物对细菌特有的药理学作用外,还取决于细菌的生长环境。结合冷休克率试验表明,环境影响细菌群体处于分裂状态的菌数。若分裂状态菌数下降表明生长速度减慢。提示了多粘菌素B对绿脓杆菌的效力指数,定量分析可以作为其综合效力作用的表现。以同步培养法确定在单个细胞周期中的抗生素敏感阶段。同时以冷休克率试验资料证明细菌处于分裂状态和幼龄期是其敏感阶段。初步阐述了生长速度缓慢与药物的生态耐受性密切相关。     

关于四个酵母菌种对乙醇耐受性的研究

本文报道了从存活,生长,发酵能力和氢离子渗漏等角度研究和比较四种酵母菌(Zygosaccharomyces bailii NCYC 1427,Saccharomyces cerevisiae NCYC 431,Harisenula anomala NCYC 711和 Kloeckera apiculata NCYC 468)对乙醇的耐受性。乙醇对酵母在上述特性的抑制程度,取决于乙醇的浓度。Z．Bailii NCYC 1427是四个酵母中乙醇耐受性最强的。在2M的乙醇溶液中,其存活率与无乙醇的对照组一样高。在低于1.5M的乙醇中,其生长率高于 S．Cerevisiae NCYC 431,氢离子渗入细胞的速率增长则低于 S．Cerevisiae 和 H．Anomala。S．Cerevisiae NCYC 431对于乙醇抑制生长的效应耐受性很强,在低于IM的乙醇溶液中,其发酵能力下降得较为缓慢,存活率几乎没有变化。H．Anomala NCYC 711在生长、发酵能力和氢离子渗漏方面对乙醇的抑制作用均表现敏感,但其存活率变化却与S．Cerevisiae NCYC 431很相似。K．Apiculata NCYC 468在存活、生长和发酵能力方面对乙醇的效应是四个菌种中最敏感的。研究结果还表明,乙醇对生长、发酵能力和氢离子渗漏的作用比它对存活的影响大得多。环境条件也影响酵母对乙醇的耐受性。     

嗜热革节孢GH1 BGL1进口端位点对酶活性及葡萄糖耐受性的影响

糖苷水解酶第一家族(GH1)β-葡萄糖苷酶(BGL1)有葡萄糖耐受性,进口端位点对酶活性及葡萄糖耐受性有很大影响,但具体作用机制尚不清楚。对嗜热革节孢GH1 BGL1进口端的W168、L173、F348、W349、C169、F180、D237、Y179、A260、H307、N335和E437这12个氨基酸残基进行定点突变,将突变酶与野生酶(WT)在毕赤酵母中表达,表达产物纯化后进行酶活性和葡萄糖耐受性测定。与WT相比,所有突变酶活性均有所降低,其中W168H、N335F和W349G几乎丧失活性。突变F180H、D237S、A260N和H307Y的Km低于WT,所有突变的kcat都降低。除L173Q外,其余突变都保持葡萄糖耐受性,在高浓度(400 mmol/L)葡萄糖时,Y179F和D237S酶活受到显著抑制。本研究表明,进口端位点对酶活性及葡萄糖耐受性均具有一定影响,催化活性通道的结构特异性可能是葡萄糖耐受机制。     

一氧化氮在缺氧耐受形成中的作用

分别给小鼠腹腔注射Ｌ－精氨酸（５０ｍｇ／ｋｇ）、Ｌ－精氨酸类似物Ｎω－ＮＩＴＲＯ－Ｌ－ＡＲＧＩＮＩＮＥ（５０ｍｇ／ｋｇ）,３０ｍｉｎ后进行急性缺氧重复实验。结果发现,Ｌ－精氨酸、Ｌ－精氨酸类似物组第一次缺氧耐受性时间平均为１１ｍｉｎ、１６ｍｉｎ,分别近似于、高于盐水对照组小鼠的第一次平均耐受时间（１２ｍｉｎ）。Ｌ－精氨酸组、Ｌ－精氨酸类似物组第二、三、四次重复缺氧的耐受时间分别为其各自第一次缺氧耐受时间的２．０、２．７、３．１;２．６、３．７、４．９倍,分别略低于、明显高于对照组（对照组第二、三、四次重复缺氧的耐受时间分别为其第一次缺氧耐受时间的２．２、３．１、３．６倍）。用荧光方法测定正常对照组第一、二、三、四次缺氧组脑内一氧化氮的含量,结果发现,一次缺氧组一氧化氮含量明显高于正常对照组,二、三、四次缺氧组,一氧化氮含量比一次缺氧组明显回降,结果提示,脑内一氧化氮减少可能有助于缺氧耐受性的形成。     

一株高耐镉硫酸盐还原菌的分离及脱硫性能研究

本研究从镉污染稻田水稻根际土壤中分离、纯化出一株硫酸盐还原菌SRB1-1,并对该菌株的生理生态特征、镉和盐耐受性、16S rDNA、脱硫性能及影响因子进行了系列分析。结果表明,该菌为革兰氏阴性菌,菌体弧状,对镉离子的耐受浓度可达200 mg/L,在2%的氯化钠浓度下仍可生长。对其16S rDNA的序列分析表明该菌株属于脱硫弧菌属(Desulfovibrio)。单因子实验考察温度、pH及SO_4~(2-)浓度对该菌脱硫效率的影响,正交实验确定了该菌最佳脱硫工艺条件及影响因子顺序。结果表明最佳脱硫工艺条件为pH 7.5、温度40℃、SO_4~(2-)浓度为1 000 mg/L、培养时间56 h。     

黄瓜核心种质芽期低温耐受性鉴定评价

以15℃为胁迫温度,以相对发芽率、相对发芽势、相对发芽指数、相对胚根长度、相对鲜重、相对干重为评价指标,对65份黄瓜核心种质进行芽期低温耐受性鉴定评价,结果显示,参试材料的6项指标差异显著,变化范围分别为1.00%~123.00%、0~112.00%、0~70%、13.00%~109.00%、0~100.00%、0~101.00%。表明大部分参试材料在不同程度上受到低温条件的影响,发芽时间推迟、种子活力降低、种芽生长量减少,而少部分材料的种子活力在15℃低温条件下与对照相比差异不明显。利用6项指标的平均隶属度、聚类分析进行综合评价,共筛选出7份芽期强耐冷的黄瓜材料,来源于印度、日本、匈牙利、土耳其及我国的吉林省、河北省、重庆市。     

华丽肖蛸和锥腹肖蛸不同龄期饥饿耐受性研究

【目的】测定华丽肖蛸Tetragnatha nitens和锥腹肖蛸Tetragnatha maxillosa在实验条件下的耐饥力,确定其龄期与耐饥力之间的关系,为稻田害虫综合防治提供理论依据。【方法】实验条件:不供食物、实验温度为25℃,在人工气候箱内饲养并饥饿华丽肖蛸和锥腹肖蛸的幼蛛及成蛛。华丽肖蛸和锥腹肖蛸根据龄期分别设置3个处理组以及与每个处理组对应的对照组,每3 d统计死亡率。【结果】饥饿状态下华丽肖蛸和锥腹肖蛸的存活时间与体重之间相关性是极显著的;华丽肖蛸和锥腹肖蛸各自3个不同龄期组的存活时间具有极显著差异;华丽肖蛸和锥腹肖蛸对应的3个相同龄期组的存活时间无显著差异;不同龄期组幼蛛的阶段成活率与存活时间之间符合二次抛物线关系。用拟合曲线得出华丽肖蛸的饥饿半致死时间(t50)和致死时间(t95)分别为22 d和32 d;锥腹肖蛸的饥饿半致死时间(t50)和致死时间(t95)分别为20 d和28 d。【结论】华丽肖蛸和锥腹肖蛸的幼蛛在没有食物的实验条件下,具有一定的耐饥饿能力,仍可存活一定的时间。     

胆盐水解酶产生菌的筛选及其益生潜力研究

目的从健康仔猪肠道及粪便中筛选具有胆盐水解酶活性的优良益生乳杆菌菌株,并对筛选菌株的体外、体内益生潜力进行初步探讨。方法用MRS培养基分别从仔猪新鲜粪便和小肠黏膜分离培养乳酸菌,用筛选鉴别培养基筛选阳性菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性。结果从粪便和小肠黏膜共得到乳酸菌388株和97株,其中胆盐水解酶阳性菌株分别为291株(75%)和86株(89%)。选择5株胆盐水解酶活性最强、能水解游离胆酸的菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性,并对最终选育得到的菌株进行生理生化及16S rRNA分子鉴定,发现菌株罗伊乳杆菌G22-2能耐受pH 3.0的酸度、1.0%的胆盐浓度,在小肠上皮细胞上的黏附效率超过15个以上;通过大鼠体内实验,筛选出的菌株G22-2对大鼠无毒无害,并能显著改善血脂水平。结论罗伊乳杆菌G22-2符合益生菌的要求,可以作为产胆盐水解酶的益生乳杆菌优良的候选菌株。