His-tag对胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响

为考察组氨酸标签(His-tag)对Brevibacterium sp.DGCDC-82中胆固醇氧化酶基因(ChoAb)在大肠杆菌中表达的影响,将PCR扩增后得到的结构基因与pET28a(+)连接,构建重组质粒pETChoAb(不带His-tag),pETChoAbn(His-tag位于N端)和pETChoAbc(His-tag位于C端)并在大肠杆菌中进行表达.对重组酶进行酶活检测,结果表明His-tag位于ChoAb的C端和N端,COD单位体积酶活由未带标签时的1.72 U/mL分别提高到4.03 U/mL和11.36 U/mL.利用软件Quantity One对SDS-PAGE电泳条带进行灰度分析,结果显示与不带His-tag的COD相比,His-tag位于ChoAb的C端和N端,COD表达量由8.8％增加到16.4％与72.3％.同时菌体浓度分别提高了1.2倍和3.2倍.作为纯化标签,该研究结果对His-tag用于诊断用酶COD的分离纯化可以提供一定的理论指导.     

林檎叶水提物及其不同极性组分的抑菌和清除自由基作用的研究

采用管碟法及体外抗氧化活性测试方法,以抑菌圈大小及对DPPH的半清除率浓度(IC50)为指标,评价林檎叶水提物及其不同极性组分(包括乙酸乙醑、正丁醇萃取物、及乙醇沉淀物和剩余组分)的抑菌及清除DP-PH自由基的能力.结果显示林檎叶乙酸乙酯组分对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉、毛霉、红酵母及啤酒酵母均有抑制作用;且对DPPH自由基的清除能力最强,且清除率和质量浓度之间存在剂量依赖的关系,IC50值为0.33 mg/mL.有望成为新型的天然防腐保鲜剂的原料.     

一期前路病灶清除植骨融合内固定术治疗短节段腰椎结核

目的:对比观察一期前路病灶清除减压植骨融合内固定术与分期前后路联合手术针对短节段腰椎结核的疗效.方法:抽取兰州军区兰州总医院骨科中心脊柱外科30例住院治疗短节段腰椎结核的患者,随机化分为两组,每组15例,分别施行一期前路病灶清除减压植骨融合内固定术和分期前后联合手术,观察比较两组术前、术后6个月、12个月、18个月Frankle神经功能分级,术后12个月及18个月Birdwell植骨融合分级.结果:试验组及对照组术前、术后6个月Frankle分级差异有统计学意义(P＜0.05).两组间术后6个月,术后12个月Frankle分级差异无统计学意义(P＞0.05).两组间术后18个月Frankle分级差异有统计学意义(P＜0.05).两组间术后12个月Birdwell分级差异无统计学意义(P＞0.05),而两组间术后18个月Birdwell分级差异有统计学意义(P＜0.05).随访期间,对照组有两例发生断钉.结论:一期前路病灶清除、植骨融合内固定术治疗脊柱结核,病灶清除彻底、融合率高,远期效果良好,复发率低并能够最大限度恢复脊柱生物力学稳定性.具有重要的临床应用价值.     

苦苣菜提取液对亚硝基及·OH清除活性的研究

利用分光光度法研究了苦苣菜水提液对亚硝基和羟基自由基的清除活性以及影响清除亚硝基的因素。结果表明:浸提液对NO2-和由Fenton反应产生的·OH均有很强的清除作用,且在一定浓度范围内随浓度的增大而增强。在一定条件下,提取液对亚硝基和·OH的最大清除率分别可达75.68%和100%。     

甾短杆菌胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中的表达

为了实现胆固醇氧化酶在大肠杆菌中的表达,将甾短杆菌Brevibacterium sp．DGCDC-82胆固醇氧化酶基因用PCR的方法去掉信号肽序列,连接到质粒pTrc99a,遗过筛选得到了表达胆固醇氧化酶的重组菌JMl09／pTrc99a—COD。经IPTG诱导后表达出相对分子质量约为5．5×10^4的蛋白质。分别考察了诱导温度、时间、IPTG浓度等因素对重组菌表达的胆固醇氧化酶的影响。在优化条件下,该胆固醇氧化酶的酶活可以达到700U／L。酶学特性分析表明其反应的最适pH为7．5,最适温度为40℃。     

黄芪甲苷及其生物学活性

黄芪甲苷为中药黄芪中提取皂苷的主要成分.数十年来,已对它的药代动力学、药理作用和机制进行了广泛研究,取得了很大进展.目前已知它具有与血浆蛋白结合率高,肝肺中分布较高,脑中含量较低等特点,并且具有正性肌力,舒张血管,保护血管内皮细胞,抗炎,抗病毒等多方面作用,这些作用是通过阻止钙离子的释放、转运和积聚,依赖内皮的NO-CGMP途径,清除氧自由基等途径来实现的,已有效应用于心、脑、血管疾病和其他疾病的治疗.它的作用与机制仍有待于进一步的研究.     

抗氧化剂在糖尿病中的应用研究进展

氧化应激是自由基的促氧化与机体的抗氧化失衡造成的.自由基的高反应活性可以使细胞组分发生化学变化,并导致脂质过氧化.越来越多的证据表明:糖尿病患者体内活性氧物质明显增多,并且抗氧化防御系统功能紊乱.抗氧化剂可以降低糖尿病患者体内的氧化应激水平,清除自由基并改善抗氧化防御体系,所以将抗氧化剂应用于糖尿病是可行的.许多抗氧化剂已经用于糖尿病的研究与治疗,本文主要将作用于糖尿病的各种抗氧化剂做一综述.     

利用荧光蛋白窥测基因调控

较早的研究提示,ezetimibe作用于肠道和肝脏的一种蛋白质,而该蛋白质最近被发现在胆固醇吸收方面扮演着重要的角色。如今,研究人员揭示,一种被称为Niemann．Pick C1-1ike 1（NPCIL1）的蛋白质将胆固醇运送到细胞内。他们还显示,ezetimibe阻挡了NPCIL1进入细胞,因此它也使胆固醇无法进入细胞。     

苏铁蕨的化学成分

从蕨类植物苏铁蕨( Brainea insignis) 中分离得到1 个新的苯乙烯基吡喃酮苷, 利用波谱技术鉴定了其结构。此外, 还得到了1 个已知的苯乙烯基吡喃酮苷和4 个其它已知化合物。同时, 还测定了分离得到的两个苯乙烯基吡喃酮苷化合物的DPPH 自由基清除活性。     

柑桔生物类黄酮柚皮苷生物活性的研究进展

主要论述了柑桔生物类黄酮柚皮苷的生物活性,包括抗氧化性,抗辐射性,抑制肿瘤坏死因子释放,影响胆固醇的生物合成及保护肝细胞等,作为药物原料具有一定的前景,还可用于食品添加剂,为黄酮类化合物在食品医药行业的深入研究开发奠定基础。