顺铂诱导人宫颈癌细胞系P27表达及其超微弱发光测定的意义

目的:探讨化疗药物对肿瘤增殖活性的影响.方法:选择人宫颈癌细胞系Hela分为两组,分别采用MTT比色法分析测定顺铂处理Hela细胞的浓度;免疫组化SP法分别检测Hela细胞中P27蛋白表达;流式细胞仪分析加药前后细胞周期变化及凋亡情况;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测细胞的超弱发光强度.结果:顺铂处理Hela细胞48h的IC50值为3mg/L,当DDP浓度,在3mg/L以下时,对Hela细胞无明显毒性作用,超过此浓度时,其毒性呈剂量效应关系(P<0.001);流式细胞仪分析细胞周期可见与Hela细胞相比较,Hela+DDP细胞的G2期细胞数增多,而G1,S期的细胞数明显减少(P<0.01);从细胞调亡检测显示Hela与Hela+DDP相比,细胞凋亡率在不同时间点明显升高,在24h,48h,72h结果分别为(11.4±5.8、21.8±7.9、32.5±11.6)%.免疫组化结果显示Hela+DDP与Hela细胞相比细胞膜上P27蛋白高表达;在10-4mol/L鲁米诺及0.3%的双氧水(H2O2)条件下Hela细胞超弱发光强度高于用Hela+DDP细胞9P<0.001).结论:超弱发光能够快速、准确、有效地反映肿瘤细胞氧化代谢特点和增殖活动,也可用于筛选敏感的化疗药物.     

肺原发性交界性平滑肌瘤1例临床病理分析

肺平滑肌瘤病的命名及生物学行为评价仍存在争议.本文采用病理切片H.E.染色和免疫组织化学染色方法,报告1例病理诊断为肺原发性交界性平滑肌瘤病例,肺转移性平滑肌瘤多见于有子宫肌瘤切除病史的女性,而该患者子宫及双附件区放射性分布未见明显异常,病理检查细胞异型轻,见个别多核巨细胞,无出血坏死,核分裂象2个/50HPF,Actin阳性,Vim 阳性,HHF35阳性,CD68阴性,CK阴性,故诊断为肺原发性交界性平滑肌瘤,并对其生物学行为进行评价.     

生物医药产业——向安全、高效、稳定、可控的目标进发——TEM8-Fc：一种新的抗肿瘤血管形成的人源抗体样分子

近20年来,以基因工程、细胞工程、酶工程为代表的现代生物技术迅猛发展,人类基因组计划等重大技术相继取得突破,现代生物技术在医学治疗方面的应用日益广泛,生物医药产业化进程明显加快。20世纪90年代以来,全球生物药品销售额以年均30％以上的速度增长．大大高于全球医药行业年均不到10％的增长速度。     

An overview of plant centromeres

The centromere is a defining region that mediates chromosome attachment to kinetochore microtubules and proper segregation of the sister chromatids. Intriguingly, satellite DNA and centromeric retrotransposon as major DNA constituents of centromere showed baffling diversification and species-specific. However, the key kinetochore proteins are conserved in both plants and animals, particularly the centromere-specific histone H3-1ike protein （CENH3） in all functional centromeres. Recent studies have highlighted the importance of epigenetic mechanisms in the establishment and maintenance of centromere identity. Here, we review the progress and compendium of research on plant centromere in the light of recent data.     

Notch途径与宫颈癌细胞系的增殖调控

近年来在许多肿瘤细胞系中发现Notch基因的表达失常,失控的Notch信号对维持肿瘤细胞表型性起着重要作用。在宫颈癌细胞中,异常上调的Notch信号通路由人乳头瘤病毒(HPV)相关蛋白“E6/7”介导,并能与之发生协同作用维持肿瘤的生长及异型性,另一方面,激活的Notch1又能通过抑制Fos蛋白家族进而抑制“E6/7”的表达,并能通过抑制E47蛋白引起细胞增殖抑制。结合对不同时期宫颈癌细胞的研究结果,目前认为低水平的Notch1表达对维持发生癌变的角质细胞的生存相当重要,过多或过少的Notch1信号都会对细胞增殖造成负面影响。     

组织因子与肿瘤靶向治疗

组织因子(tissue factor,TF)是一种分子量为47kD的跨膜糖蛋白,作为凝血因子Ⅶ的受体启动外源性凝血过程。近年来,人们发现组织因子在肿瘤血管生成和肿瘤细胞转移过程中也发挥重要作用,并且在针对组织因子的肿瘤靶向的治疗方面取得了一些重要进展。     

P120链蛋白与肿瘤

研究参与肿瘤发生的重要信号分子,对揭示肿瘤发生发展有重要意义。链蛋白(catenin)家族成员与肿瘤的发生密切相关,在保持细胞黏附中起着重要作用,其表达缺失或下降将导致细胞分化丧失和具有侵袭性,容易发生浸润和转移。链蛋白家族最早被分为α、β、γ三类,它们都能与E-钙黏着蛋白(E-cadherin)形成复合体。P120cat作为新发现的链蛋白家族成员之一,位于细胞连接处和细胞核内,与肿瘤的发生有着更密切和特殊的关系,在不同的条件下,它既可以作为肿瘤的促进物,又可成为肿瘤的抑制物。     

DLK1在干细胞和肿瘤中的作用

DLK1是EGF家族成员之一,是一个父源表达母源沉默的印记基因产物,其表达受等位基因差异性甲基化区(DMR)的调控。Dlk1是细胞分化的重要调节基因,可抑制脂肪前体细胞向脂肪细胞分化。DLK1通过和Notch1相互作用,在Notch通路中起负调控作用。DLK1在肝干细胞中表达,提示可以作为肝干细胞分离的标记物。此外,DLK1在多种分泌性肿瘤细胞中高表达,提示DLK1可能与这些肿瘤的形成密切相关。     

抗欧亚活血丹凝集素特异性多克隆抗体的制备

欧亚活血丹外源凝集素(Gleheda)是分离自欧亚活血丹 (Glechoma hederacea) 叶片中的一种糖基化植物新蛋白. 如同其他糖基化蛋白,通过免疫学方法探测 Gleheda 的过程中通常受到一些不相干糖蛋白的妨碍,为此制定了抗 Gleheda 特异性多克隆抗体的纯化方案. 免疫血清蛋白经硫酸铵选择性沉淀后,分别以 Gleheda 和刺槐外源凝集蛋白 (RPA) 结合在 Sepharose 4B作为亲和配体,采用亲和层析法连续纯化 2 次,然后进一步采用离子交换层析 Q Fast Flow 提纯. 经每一步骤提纯得到的抗体组分对 Gleheda 的特异性,均同时采用双向免疫扩散检验和 Western blot 分析. 结果表明,以 Gleheda 为配体,亲和纯化制备得到的抗体组分对叶片粗提物中的许多植物 (糖) 蛋白仍然表现交叉反应. 为除去由植物糖蛋白中的聚糖所引起这些非特异性交叉反应抗体,接着以 RPA 为配体再次进行亲和纯化,Western blot 分析显示,抗体的特异性得到提高但并非除去了所有非特异性交叉反应的抗体. 最后进一步采用离子交换层析制备得到仅抗 Gleheda 蛋白的特异性抗体组分,此抗体组分适用于免疫探测研究. 该抗体纯化制备程序简易而高效,而且不需要昂贵的设备.     

Combinational adenovirus-mediated gene therapy and dendritic cell vaccine in combating well-established tumors

Recent developments in tumor immunology and biotechnology have made cancer gene therapy and immunotherapy feasible. The current efforts for cancer gene therapy mainly focus on using immunogenes, chemogenes and tumor suppressor genes. Central to all these therapies is the development of efficient vectors for gene therapy. By far, adenovirus （AdV）-mediated gene therapy is one of the most promising approaches, as has confirmed by studies relating to animal tumor models and clinical trials. Dendritic cells （DCs） are highly efficient, specialized antigen-presenting cells, and DC- based tumor vaccines are regarded as having much potential in cancer immunotherapy. Vaccination with DCs pulsed with tumor peptides, lysates, or RNA, or loaded with apoptotic/necrotic tumor cells, or engineered to express certain cytokines or chemokines could induce significant antitumor cytotoxic T lymphocyte （CTL） responses and antitumor immunity. Although both AdV-mediated gene therapy and DC vaccine can both stimulate antitumor immune responses, their therapeutic efficiency has been limited to generation of prophylactic antitumor immunity against re-challenge with the parental tumor cells or to growth inhibition of small tumors. However, this approach has been unsuccessful in combating well-established tumors in animal models. Therefore, a major strategic goal of current cancer immunotherapy has become the development of novel therapeutic strategies that can combat well-established tumors, thus resembling real clinical practice since a good proportion of cancer patients generally present with significant disease. In this paper, we review the recent progress in AdV-mediated cancer gene therapy and DC-based cancer vaccines, and discuss combined immunotherapy including gene therapy and DC vaccines. We underscore the fact that combined therapy may have some advantages in combating well-established tumors vis-a-vis either modality administered as a monotherapy.