一种新融合抗菌肽Hex-Mag基因的克隆、表达及其抗菌活性的研究

通过在Magainin1-12(GIGKFLHSAKKF)的N端添加碱性氨基酸片段Hexapeptide(RRWQWR)以增强其对细胞膜的吸附能力来提高Magainin1-12的抗菌活性。利用Hexapeptide和Magainin1-12的基因序列,结合酵母偏爱密码子设计出新的融合基因Hex-Mag,通过重叠区扩增基因拼接法(Gene splicing by overlap extension,gene SOEing)利用PCR扩增出基因片段,再将融合基因进行酶切并纯化后导入穿梭质粒pPIC9中,构建受乙醇氧化酶1基因(AOX1)的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化GS115毕赤酵母宿主菌,经表型筛选,阳性克隆用甲醇诱导表达。表达出的融合肽Hex-Mag分子量约2.3kDa,其耐热性强,在100℃条件下,其活性可维持3h以上。琼脂糖孔穴扩散法检测显示Hex-Mag对多种革兰氏阴性菌和阳性菌具有抑制活性,与Magainin1-12相比,其活性有明显增强,N端正电荷增加的预期效应得到初步体现。     

2002年诺贝尔化学奖"对生物大分子仪器分析方法的重大贡献"简介

20 0 2年诺贝尔化学奖授予了三位在生物大分子研究领域作出突出贡献的科学家 :美国科学家约翰·芬恩 ,日本科学家田中耕一以及瑞士科学家库尔特·维特里希 ,以表彰他们创造性地应用物理化学分析法对生物大分子进行结构分析测定的研究。其中芬恩和田中发明了“对生物大分子进行确认和结构分析方法”和“对生物大分子的质谱法” ,维特里希则是开创了“利用核磁共振测定溶液中生物大分子三维结构的方法”。     

Dendrin在初级感觉神经元内的表达

Dendrin作为一类新的树突蛋白,在脑内的表达随着行为活动的改变而变化。最近本课题组采用免疫组织化学方法对dendrin在小鼠初级感觉神经元内的表达进行了研究,并进一步研究外周神经损伤后dendrin在背根神经节和脊髓背角内的表达变化。本文还就dendrin的生物学特征以及在神经系统内表达情况对其近期研究成果和未来发展趋势进行综述。     

多肽融合标签的移除策略

多肽融合标签能够赋予目标蛋白新的特性,便于目标蛋白的定位、追踪、纯化以及结构和相互作用研究．但在很多情况下,尤其是研究蛋白质结构或分离纯化药用蛋白时,需要将多肽融合标签从融合蛋白上切除,以降低和消除多肽融合标签对目标蛋白结构和功能的影响．可用来切除多肽融合标签的方法主要有4种,即化学法、内切蛋白酶法、外切蛋白酶法以及自我剪切法．介绍和比较了每种方法的基本原理、应用以及研究进展．     

降钙素基因相关肽参与运动诱导的心脏保护作用

目的：探讨降钙素基因相关肽（CGRP）在运动诱导的心脏保护中的作用和机制。方法：64只健康雄性SD大鼠随机分为4组（n=16）,经耐力训练和力竭运动后,观察心肌CGRP的分布与表达、血清心肌肌钙蛋白I（cTnI）、心肌缺血低氧改变、心肌NO、SOD、MDA的变化。结果：TG心肌CGRP免疫反应和SOD总活性较CG显著增强,TEG和EG组CGRP免疫反应减弱,SOD总活性降低,MDA增加,且EG组血清心肌肌钙蛋白I显著升高,心肌出现明显的缺血低氧改变,NO含量下降。结论：CGRP参与耐力训练诱导的心脏保护作用,与上调SOD活性、促进NO合成有关。     

Application of proteomics in the study of tumor metastasis

Tumor metastasis is the dominant cause of death in cancer patients. However, the molecular and cellular mechanisms underlying tumor metastasis are still elusive.The identification of protein molecules with their expressions correlated to the metastatic process would help to understand the metastatic mechanisms and thus facilitate the development of strategies for the therapeutic interventions and clinical management of cancer. Proteomics is a systematic research approach aiming to provide the global characterization of protein expression and function under given conditions. Proteomic technology has been widely used in biomarker discovery and pathogenetic studies including tumor metastasis. This article provides a brief review of the application of proteomics in identifying molecular factors in tumor metastasis process. The combination of proteomics with other experimental approaches in biochemistry, cell biology, molecular genetics and chemistry, together with the development of new technologies and improvements in existing methodologies will continue to extend its application in studying cancer metastasis.     

巴戟天挥发性成分研究

目的：研究巴戟天中的挥发性成分。方法：利用水蒸气蒸馏法提取巴戟天（Radix morindae offtcinalis）挥发油,用GC—MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果：鉴定出34个化学成分,其中相对百分含量大于2％的分别确定为L-龙脑（Bomeol L）29．28％,α-姜烯（Alpha—Zingiberene）4．88％,2-甲基-6-对甲基苯基-2-庚烯（Ar-Cureumene）4．49％,1-己醇（1-Hexanol）3．40％,β-倍半水芹烯（beta—sesquiphellandrene）3．34％,2-戊基呋喃（2-Amylfuran）3．32％,正壬醛（n—nonanal）2．17％,樟脑（L—camphor）2．07％,β-没药烯（bete—Bisabolene）2．06％。结论：34个挥发性成分均为首次从该植物中得到。     

3种碱蓬属植物种子含油量及其脂肪酸组成研究

应用重量法和气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对吉林省西部盐碱地生长的碱蓬、角碱蓬和翅碱蓬3种野生植物的种子含油量及脂肪酸成分进行了测定和分析。结果表明：碱蓬、角碱蓬和翅碱蓬种子含油量分别为24．39％、15．67％和15．80％。不饱和脂肪酸含量分别为88．65％、88．30％、88．50％。尤其是亚油酸含量较高,分别达56．94％、59．35％和60．86％。利用盐碱荒地种植碱蓬属植物。充分开发其在食用、医疗保健方面的应用价值。具有巨大潜力和广阔前景。     

缩胆囊素和促胰液素对豚鼠离体胃平滑肌运动的影响

用８个肌槽同时记录豚鼠胃不同部位肌条的收缩活动,以观察八肽缩胆囊素（ＣＣＫ－８）和促胰液素的影响。结果表明：ＣＣＫ－８能（１）增高各部位纵行肌和环行肌的张力;（２）加快胃体纵行肌,胃窦纵行肌、环行肌和幽门环行肌的收缩频率;（３）增大胃窦环行肌收缩波平均振幅和（４）增加幽门环行肌收缩波运动指数,但减少胃体和胃窦纵行肌收缩波平均振幅。上述作用均不能被阿托品和消炎病所阻断。而促胰液素对各部位肌条的收缩活动没有明显的影响。     

肽自动合成中有关问题探讨

讨论了肽自动合成中的方法选择、偶联技术、故障排除、肽－树脂裂解及肽的纯化等主要问题及策略。