一种原代肺上皮细胞体外培养方法

目的:建立一种操作简便、重复性好的体外培养BALB/c小鼠原代肺上皮细胞(AEC)的方法,探究不同发育阶段小鼠AEC中柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)表达量的变化,及其对小鼠原代AEC贴壁的作用。方法:手术获取小鼠肺组织,机械法剪碎肺组织,PBS缓冲液清洗肺组织块数次去血,联合使用链霉蛋白酶和胶原酶Ⅰ消化、分离肺组织块获得单细胞悬液,差速离心逐步清除其他种类的细胞,达到纯化AEC的作用。细胞在Ⅰ型鼠尾胶原蛋白包被过的细胞板中培养,光学显微镜下观察不同发育阶段AEC贴壁、生长状态;免疫荧光法鉴定AEC,检测AEC中CAR的表达量。结果:体外获得不同发育阶段BALB/c小鼠的原代AEC;胎鼠、幼鼠AEC贴壁并开始增殖所需时间较成体鼠短;胎鼠及幼鼠AEC中CAR的表达量明显较成体鼠高。结论:建立了稳定可重复的分离、纯化、体外培养小鼠原代AEC的方法,证明了AEC中的CAR可以促进原代AEC贴壁,为完善原代细胞培养方法提供了科学依据。     

慢性阻塞性肺疾病患者白介素-6基因的提取及668C/G位点基因分型的实验研究

目的:慢性阻塞性肺疾病患者白介素-6基因的提取及668C/G位点基因分型。慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一个复杂的全身性疾病,其发病是多基因遗传、环境等因素共同作用的结果。它的特点是既有肺的局部炎症也有全身性炎症。许多研究提示COPD患者出现血循环中的炎症细胞活化和炎症细胞因子水平增高。方法:从COPD患者外周血提取基因组DNA,微量核酸测定仪检测核酸浓度,通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)扩增目的基因白介素-6基因片断,用胶回收的方法回收和纯化白介素-6基因,并用限制性内切酶剪切白介素-6基因,检测IL-6基因668C/G位点的基因型。结果:COPD患者668C/G位点基因分型可分为CC,CG,GG基因型。结论:成功进行了IL-6基因668C/G位点的基因型分析,为之后进一步进行多态性分析研究奠定基础。     

IL-17在COPD稳定期、急性加重期患者中的表达及其意义

目的:分析慢性阻塞性肺疾病稳定期、急性加重期(COPD、AECOPD)患者血清白细胞介素17(IL-17)表达水平的差异,探讨血清IL-17在评价COPD患者病情严重程度及预后中的价值。方法:收集符合纳入标准的COPD、AECOPD患者、正常对照组(健康体检者)各50例。取各组血清标本测表达浓度,比较各组血清IL-17水平,并进行相关性分析。结论:COPD、AECOPD患者血清中IL-17明显高于正常对照组,差异有统计学意义。检测血清IL-17表达水平有助于评估COPD患者的病情严重程度和预后。     

引起AECOPD精神神经异常的原因及治疗对策

目的：探讨引起慢性阻塞性肺疾病合并精神神经异常的原因,以制订有针对性的治疗对策。方法：回顾性分析我院自2010年1月到2013年1月期间收治的250例慢性阻塞性肺疾病急性发作期患者的临床资料。结果：32例患者出现精神神经异常症状,占12.80%。其中17例为肺性脑病,占53.13%（17/32）,8例为低渗性脑病,占25.00%（8/32）,5例为药物的不良反应,占15.63%（5/32）,2例为脑梗死,占6.25%（2/32）。所有患者均给予慢性阻塞性肺疾病急性发作的常规治疗方案进行治疗,同时肺性脑病患者给予积极纠正二氧化碳潴留;低渗性脑病患者给予积极纠正电解质紊乱;脑梗死的患者根据情况给予溶栓、脱水、营养脑神经、抗凝、抗血小板聚集等治疗;药物不良反应的患者则给予停止应用相应的药物。经过治疗后,29例症状恢复,占90.63%,3例最终死亡,死亡率为9.38%,其中2例为肺性脑病患者,1例为低渗性脑病患者。结论：对于慢性阻塞性肺疾病急性发作合并精神神经异常的治疗,应根据患者的症状、体征以及辅助检查结果,尽早明确诊断,及时干预,尽快控制病情,防止病情恶化。     

血必净干预对慢性阻塞性肺疾病大鼠体内炎症因子的影响

目的：通过观察血必净干预对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠体内炎症因子的影响,探讨血必净治疗COPD的机制。方法：36只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、COPD模型组（简称模型组）、血必净干预组（简称干预组）,每组12只。采用香烟烟雾暴露加气管内滴注脂多糖法建立COPD大鼠模型。造模时间共30天,其中干预组在后15天给予血必净4ml／Kg体重尾静脉注射。分别测定各组肺功能,肺组织病理学变化,血清及肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）浓度。结果：模型组大鼠FEV0．3／FVC[（57．8±5．6）％]和动态肺顺应性（Cydn）[（0．098＋0．006）cmH20·mL^-1·s^-1,lcmH20=0．098kPa]均明显低于对照组[（81．4±3．1）％和（0．195±0．012）cmH20·mL^-1·S^-1],而干预组大鼠[（67．2±3．2）％和（0．142±0．024）cmH20·mL‘S‘。]则较模型组有显著提高,差异均具有统计学意义（t值分别为-13．940、-15．165、-5．552、-6．927,均P〈0．01）;模型组大鼠平均气道阻力（RI）[（0．802±0．070）mL／cmH20]明显高于对照组[（0．224±0．069）mL／cmH20],而干预组[（0．475±0．050）mL／cmH20]则较模型组有明显下降,差异均具有统计学意义（t值分别为-22．389、-12．658,均P〈0．01）;模型组大鼠血清和肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-8浓度[（27．8±7．4）pg／mL和（340．0±79．6）pg／mL、（209．9±82．1）pg／mL和（337．3±96．4）pg／mL、（37．7±11．4）pg／mL和（69．6±18．9）pg／mL]均显著高于对照组,差异均具有统计学意义（t值分别为-12．466、-19．648、-11．749、-16．364、12．550、14．834,均P〈0．01）,而干预组大鼠[（9．6±5．6）pg／mL和（45．6±22．9）pg／mL、（36．3±17．9）pg／mL和（42．9±20．5）pg／mL、（10．3±5．6）pg／mL和（15．7±8．0）pg／mN．~4较模型组有显著降低,差异均具有统计学意义（t值分别为-9．367、-17．390、-10．106、-14．631、10．475、12．772,均P〈0．01）。结论：COPD大鼠血清及肺泡灌洗液中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的浓度均显著增高,血必净干预能显著下调上述关键致炎因子的表达,并与其临床症状、肺功能、病理学改变相印证。因此,我们推测：血必净可能通过下调COPD炎症时TNF-α、IL-6、IL-8等关键致炎因子的表达,进一步抑制气道炎症的级联效应来发挥其强大的抗炎作用。     

Everolimus and zoledronic acid——a potential synergistic treatment for lung adenocarcinoma bone metastasis

Non-small-cell lung cancer （NSCLC） frequently metasta- sizes to bone. It is known that zoledronic acid is cytostatic to tumors, and everolimus, the inhibitor for mammalian target of the rapamycin, could inhibit many types of cancer. Herein, we evaluated the effect of zoledronic acid alone and in combination with everolimus on treating lung adenocarcinoma bone metastasis in vitro and in vivo. Mice treated with zoledronic acid in combination with everoli- mus had more apoptotic lung cancer cells and more cells were arrested in the G1/G0 phase. The phosphorylation of p70S6K was inhibited in the combination treatment group. Lung cancer cell invasion was also significantly inhibited in the group with combination treatment in vitro. Bone nuclear scans revealed more metastatic lesions in controls compared with those in the combination treatment group. Bone scans and radiographic images indicated that com- bination therapy significantly reduced bone metastasis. The moderate survival rate suggested that the drug com- bination was synergistic, which can delay NSCLC bone metastasis and prolong survival in vivo.     

呼吸道病毒感染与慢性阻塞性肺疾病急性加重的关系

目的:探讨呼吸道病毒与慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的相关性,以期能为AECOPD的诊治提供参考。方法:选取200例AECOPD患者为研究对象,检测患者肺功能,用Luminex xMAP多重分析技术平台,采集患者咽试子建立多重PCR检测技术,对鼻病毒(RHV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A(INF-A)、流感病毒B(INF-B)、副流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)进行检测。结果:200例患者肺功能分级I级25例,II级62例,III级96例,IV级17例,其构成比分别为17.50%、31.00%、48.00%、8.50%;咽试子共检出呼吸道病毒116株,检出率为58.00%,其中RHV11株、RSV36株、INF-A37株、INF-B19株、PIV10株、ADV3株,检出率分别为5.5%、18.00%、18.50%、9.50%、5.00%、1.50%;肺功能分级I级患者病毒检出率为20.00%,II级为48.39%,III级为69.79%,IV级为82.35%,病毒检出率在不同肺功能AECOPD患者中比较差异具有统计学意义(P0.05);肺功能分级与病毒检出率直线相关分析结果显示随着肺功能分级的严重程度增加患者咽试子呼吸道病毒检出率明显呈现增高趋势,两者直接具有正相关(r=0.67,P0.05)。结论:COPD患者病情加重与病毒关系密切相关,病毒感染可能参与了COPD患者的病程进展。     

不同麻醉方式对老年肺肿瘤患者术后早期认知功能的影响

目的:探讨不同麻醉选择对老年肺肿瘤术后患者早期认知功能的影响。方法:分析我院2011年3月至2013年3月老年肺肿瘤患者,分别有62例用全凭静脉麻醉和61例用静吸复合麻醉的麻醉方法,记录手术时间和麻醉时间,用MMSE量表进行认知功能评分,分别评定手术前1天和手术后出麻醉室时及1、3、5天患者的认知功能,并判断患者的POCD。结果:两组患者在手术时间和麻醉时间方面无统计学差异。与术前1天比较,全凭静脉麻醉组、静吸复合麻醉组出麻醉恢复室时、术后1 d时MMSE评分降低(P0.05);与术前1 d比较,两组在术后3天和7天时MMSE评分恢复正常(P0.05),两组患者之间的MMSE认知功能评分在术前、术后均无统计学差异(P0.05),出麻醉恢复室时,全凭静脉麻醉组发生POCD24例(39.34%),全凭静脉麻醉组发生25例(40.32%),两组发生率比较无统计学差异(P0.05);术后1天、3天、7天两组分别POCD的发生率比较均无统计学意义(P0.05)。结论:老年患者用全凭静脉麻醉、静吸复合麻醉不同麻醉方法对老年患者术后早期发生认知功能障碍的影响无统计学差异。     

不同剂量沐舒坦对老年中重度AECOPD患者肺功能的影响

目的:探讨不同剂量沐舒坦对老年中重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者肺功能的影响。方法:将200例诊断为老年中重度AECOPD的患者采用随机数字表法分为4组,分别给予沐舒坦每次30mg、90mg、330mg、溴己新4mg静脉滴注,3次/d,观察第一天,第四天,第七天肺功能的变化。结果:330 mg组在老年AECOPD治疗中对肺功能的改善程度明显优于其他三组,差异均有显著性,330 mg组第四天与第七天,无明显差异。而30 mg组和90 mg与溴己新组该三组用药前与治疗后第四天比较无明显差异,用药后第七天优于用药前和用药后第四天,差异有显著性。结论:大剂量沐舒坦治疗老年中重度AECOPD,安全性高,能明显快速改善患者肺功能,缩短住院时间,减轻患者经济负担。     

急诊慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者预后相关因素分析

目的:探讨急诊收治的慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的预后相关因素。方法:选取我院2008年12月-2013年12月急诊收治的慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者94例,根据预后结果分为死亡组17例及存活组77例,回顾分析两组患者的相关资料。结果:存活组较死亡组BMI、血肌酐值、清蛋白、pH值、PaCO2、FT3差异具有统计学意义。死亡组较存活组在APACHEⅡ,CCS,有创通气率及合并肺心病率上差异均具有统计学意义。结果显示合并肺心病率、APACHEⅡ评分、肌酐、清蛋白为影响慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者预后的独立因素。结论:急诊收治的慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者如合并肺心病率,APACHEⅡ评分较高,血肌酐较高,清蛋白较低,这些因素提示我们患者预后较差,需及早进行相关治疗。