NO和HIF-1α在大鼠低氧性肺动脉高压中的作用及相互关系

目的：探讨低氧诱导因子1α（HIF-1α）在慢性低氧高二氧化碳性大鼠肺动脉高压中的变化及其与一氧化氮（NO）的关系。方法：SD大鼠40只随机分为正常对照组（NC）、低氧高二氧化碳组（HH）、低氧高二氧化碳加L-精氨酸（L-Arg）脂质体组（HP）、低氧高二氧化碳加L-硝基-精氨酸甲酯（L-NAME）组（HM）。测定平均肺动脉压（mPAP）、右室／（左室＋室间隔）重量比[RV／（LV＋S）]、血浆和肺组织匀浆一氧化氮（NO）含量。免疫组织化学和原位杂交法检测肺细小动脉HIF-1α及HIF-1αmRNA、内皮结构型一氧化氮合酶（ecNCS）蛋白及其mRNA的表达。结果：①HH组mPAP、RV／（LV＋S）高于NC组（P〈0．05）,HP组低于HH组（P〈0．01）;HM组mPAP高于HH组（P〈0．05）,RV／（LV＋S）与HH组差异无显著性。②HH组血浆及肺组织匀浆NO含量低于NC组（P〈0．01）,HP组高于HH组（P〈0．01）;HM组血浆、肺组织匀浆NO含量与HH组差异无显著性。③HH组肺细小动脉HIF-1α蛋白及HIF-1αmRNA表达高于NC组（P〈0．01）,ecNOSmRNA的表达低于NC组（P〈0．01）;HP组肺细小动脉HIF-1α蛋白及HIF-1αmRNA表达低于HH（P〈0．01）,ecNOS蛋白和ecNOSmRNA的表达高于HH组（P〈0．01）;HM组肺细小动脉HIR-1α蛋白及mRNA表达高于HH组（P〈0．05）,ecNOS蛋白和mRNA的表达低于HH组（P〈0．05）。结论：HIF-1α参与了慢性低氧高二氧化碳性大鼠肺动脉高压的形成,NO可能部分通过影响HIF-1α的表达和／或活性而实现其肺血管保护效应。     

急性肺栓塞常用检查方法及效果评价

肺动脉栓塞的诊断虽在临床工作中较少见到,但却是一种常见的致死性急症,却易被广大临床医务工作者所忽视。本文综述几种简单有效的检查方法,以提高急性PE的诊断率及便于及早治疗并降该病的病死率,并为进一步防治肺动脉栓塞提供参考依据。     

钙激活性氯离子通道的电生理研究

目的:研究大鼠肺动脉平滑肌细胞上钙激活性氯离子通道的电流、电压电流关系等电生理特性.方法:采用急性酶分离法(胶原酶Ⅰ型和木瓜蛋白酶)分离出单个肺动脉平滑肌细胞,应用膜片钳技术,测定各组大鼠肺动脉平滑肌细胞上钙激活性氯离子通道电流和电压电流.结果:急性酶分离法能成功分离出适用于膜片钳记录的单个大鼠肺动脉平滑肌细胞,并测到稳定的钙激活性氯离子通道电流,该电流表现出时间、电压及钙离子依赖性,并呈外向整流特征.结论:大鼠肺动脉平滑肌细胞的钙激活氯离子通道具有时间依赖性、钙离子依赖性和电压依赖性,并具有外向整流特征.     

周期蛋白D1参与香烟烟雾提取物促进人肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移

本文旨在探讨周期蛋白D1(cyclin D1)在香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)所致人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)增殖和迁移中的作用。构建反义cyclin D1基因真核表达载体(pIRES2-EGFP-ascyclin D1),采用脂质体介导基因转染法将空载体(pIRES2-EGFP)和pIRES2-EGFP-ascyclin D1导入正常HPASMCs后,分别进行CSE干预。细胞随机分为6组:对照组、空载体组、反义cyclin D1组、5%CSE组、空载体+5%CSE组、反义cyclin D1+5%CSE组。用实时荧光RT-PCR和Western blot法分别检测cyclin D1mRNA和蛋白的表达,采用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、增殖细胞核抗原(PCNA)染色法测定细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移能力。结果显示,反义cyclin D1基因真核表达载体pIRES2-EGFP-ascyclin D1成功构建,并成功转染入HPASMCs,转染后HPASMCs中cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平较对照组均显著下降(P0.05)。与对照组比较,5%CSE组cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.05),细胞增殖和迁移能力显著增强(P0.05)。与5%CSE组比较,反义cyclinD1+5%CSE组cyclin D1mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P0.05),细胞增殖和迁移能力显著降低(P0.05)。上述结果提示,CSE可通过上调cyclin D1表达促进HPASMCs增殖和迁移,反义cyclin D1基因真核表达载体可抑制CSE介导的HPASMCs增殖和迁移,提示cyclin D1在CSE所致HPASMCs增殖和迁移中发挥重要调控作用。     

食管胃底静脉曲张出血药物治疗进展

在慢性肝病晚期患者中,门静脉高压属于普遍存在的并发痘之一。临床上门静脉高压往往会引发食管胃底静脉曲张,最终出现破裂出血。随着研究的进一步深入,目前研究证实肝脏结构出现改变、肌纤维母细胞发生收缩以及缩血管活性物质分泌的增加是引发门脉阻力上升最主要的三个方面。研究表明,门脉阻力上升能够被一些药物所阻断,这为临床使用一些缩血管药物降低门静脉高压,预防食管胃底静脉曲张出血（EVB）提供了理论基础。     

埃他卡林对间歇性低氧暴露肺微动脉的选择性扩张作用

目的:研究新型ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林(Ipt)对间歇性低氧暴露肺微动脉扩张作用特征。方法:将雄性SD大鼠随机分为3组,对照组(Control),低氧暴露组,置于常压低氧舱内(O210%±0.5%)8 h/d,每周6d,和低氧暴露+醋氮酰胺(Acz)干预组(灌胃给予Acz 80 mg/(kg.d))。12周后分离大鼠管径为(197±4)μm的肺微动脉组织,利用DMT微血管张力测定仪在6 nmol/L内皮素-1(ET-1)致血管预收缩条件下,考察不同浓度Ipt对间歇性低氧暴露肺微动脉张力变化并利用ACh考察肺微动脉内皮活性。结果:与常压常氧组对比,10-5mol/LACh对间歇性低氧暴露肺微动脉舒张率显著降低(P<0.01),而与80 mg/kg Acz干预组肺微动脉舒张率无显著性差异(P>0.05);Ipt在(10-11~10-4)mol/L对间歇性低氧暴露肺微动脉呈剂量依赖性舒张作用,与80 mg/kg Acz干预组间无显著性差异(P>0.05),而对常压常氧组肺微动脉无明显的舒张作用。结论:间歇性低氧暴露肺微动脉内皮细胞功能受损,Ipt可选择性扩张低氧暴露肺微动脉;Acz可改善低氧所致内皮细胞功能异常,但并不影响Ipt对低氧暴露肺微动脉的选择性扩张作用。     

从盾叶薯蓣组培苗中高压酸解制备薯蓣皂苷元

采用正交试验法对盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis)组培苗中薯蓣皂苷元的高压酸解制备工艺进行了研究。以薯蓣皂苷元的含量作为评价指标,选用正交表L16(45),以样品用量、硫酸浓度、提取时间为因素,设计了3因素4水平的正交试验。结果表明:高压酸解提取薯蓣皂苷元的最佳工艺条件为:样品用量25 mg、硫酸浓度0.5 mol/L、提取时间2 h,在此条件下提取物中薯蓣皂苷元的平均含量为9.12 mg/g。     

PVT1促进PAH大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移的作用机制研究

摘要 目的：研究浆细胞瘤多样异位基因1（PVT1）在肺动脉高压（PAH）大鼠中对于肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖和迁移的作用及其可能的机制。方法：将16只成年雄性SD大鼠随机分为肺动脉高压组（PAH组）和对照组,每组8只大鼠。PAH组大鼠通过单次项背部皮下注射MCT溶液造模,对照组大鼠给予单次项背部皮下注射等量生理盐水。通过胸右心室穿刺法测量右心室压力。取各组大鼠肺组织,并进行原代肺动脉平滑肌细胞分离培养。通过RT-qPCR和Western blot检测PVT1及Fxr1在PAH组织及PASMCs中的表达水平;通过HE染色评估PAH组织的血管壁形态;免疫荧光法检测HPASMC的纯度;CCK-8法和伤口愈合迁移实验检测PASMCs增殖和迁移情况。结果：与对照组相比,PAH组大鼠肺组织血管壁厚度偏厚、肺动脉压显著升高（P<0.05）。PVT1在PAH组大鼠的PAH组织和PASMCs中的表达水平显著上调（P<0.05）,且其表达与肺动脉压呈正相关。与对照组相比,转染sh-PVT1的PASMCs显示出较低的细胞活力,同时转染sh-PVT1有效敲低了PASMCs中PVT1的表达水平（P<0.01）。与对照组相比,PVT1的敲低抑制了PASMCs迁移能力（P<0.01）。在转染pcDNA-PVT1的PASMCs中发现较高的增殖能力,PVT1的过表达促进了PASMCs迁移能力（P<0.01）。与对照组相比,Fxr1在PAH模型组的PAH组织和PASMCs中的表达水平显著上调（P<0.01）。结论：PVT1通过调节Fxr1的表达促进PASMCs的增殖和迁移,PVT1可能是PAH诊断和预测指标。     

车前草提取物对缺氧性肺动脉高压SD大鼠模型肺动脉压力、肺功能及炎症因子的影响

摘要 目的：探讨车前草提取物对缺氧性肺动脉高压(HPH)SD大鼠模型肺动脉压力、肺功能及炎症改变的效果。方法：随机选取18只SD雄性大鼠分为3组,正常对照组（Control组）、缺氧性肺动脉高压（HPH组）、车前草干预组（PW组）,每组各6只。观察并记录各组大鼠日常状况,于第21天测定大鼠肺动脉压力、肺功能后处死各组6只大鼠,获取大鼠肺组织标本,左肺泡灌洗液予Elisa试剂盒检测各组ICAM-1、TGF-β、MMP-9因子含量,右肺上中下叶各取一块组织行苏木精-伊红染色,其余肺组织研磨匀浆后予Elisa试剂盒检测HIF-1α含量。结果：用PW干预HPH大鼠,可降低SD大鼠的平均肺动脉压力,提高0.4 sFEV、FVC、0.4sFEV/FVC、MMEF等肺功能指标,降低肺泡灌洗液中ICAM-1、TGF-β、MMP-9炎症因子水平及肺组织中HIF-1a水平,气道及肺动脉管腔扩大,管壁变薄,炎性细胞浸润减少。结论：车前草提取物能降低HIF-1a水平,减轻HPH SD大鼠的炎症反应,降低肺动脉压力,提升肺功能,改善肺动脉及气道重塑。     

南京市场葡萄干卫生状况调查及清洗方法初探

通过泥沙类杂质和菌落总数的分析测定对南京市场收集的15种(其中散称的6种、袋装的9种)葡萄干进行了卫生状况调查,结果葡萄干泥沙类杂质含量约0.19%,葡萄干原样菌落总数平均约3.9×103CFU/g,表明市场上的葡萄干直接食用是不卫生。经自来水20 s短时间高压冲洗或继而再淋无菌水后测定,结果表明自来水高压冲洗后最高除菌率为92.0%,无菌水冲洗后最高除菌率为98.3%,样品葡萄干的菌落总数都能降到1 000以下。这方法生产上简单可行,对提高市场葡萄干质量具有重要意义。