中国对虾中肠的超微结构与细胞化学研究

(1)在透射电镜下观察中国对虾 (PenaeuschinensisOsbeck)中肠肠壁的超微结构。结果显示 :中国对虾中肠肠壁由内向外依次为上皮细胞层、结缔组织层、肌层和结缔组织层四层结构。中肠上皮有明、暗两种细胞 ,以暗细胞占多数 ,两种上皮细胞都具有从肠腔吸收营养物质和向结缔组织中转运营养物质的功能。 (2 )运用酶细胞化学技术 ,显示中肠组织细胞中的酸性磷酸酶 (ACP)和酚氧化酶 (PO)活性 ,电镜观察显示 :ACP阳性反应出现在明细胞顶部的圆形小泡和明、暗两种细胞的溶酶体中 ,暗细胞顶部聚集着大量ACP阴性反应的酶原颗粒 ,酶原颗粒主要由暗细胞合成并分泌。PO颗粒出现在患病虾肠壁结缔组织内解体的颗粒细胞上和游离于结缔组织中。结缔组织除具有维持上皮细胞的形态、贮存营养物质的功能 ,还在对虾免疫反应中发挥作用     

cDNA微阵列结合抑制性差减杂交研究对虾白斑综合征病毒部分表达基因

通过抑制性差减杂交技术建立了包含对虾白斑综合征病毒表达性基因的差减文库,并用cDNA微阵列技术进行了鉴定,得到255个正向克隆.对其中的184个正向阳性克隆进行了测序,测序结果通过BLAST与GenBank中序列进行比对,共得到WSSV(white spot syndrome virus,WSSV)基因30个.此次首次鉴定了5个,其中WSV184具有调控蛋白的结构特征(Cys2/Cys2型锌指),WSV321和WSV322含跨膜结构,且存在可能的糖基化位点.有3个被其它研究推断无polyA结构的阅读框所处的mRNA应有polyA结构.进一步用Dot Northern blot对克隆号PCI118(含WSSV阅读框WSV321和WSV322)进行鉴定,表明确实存在该基因的转录.进而根据已报道的WSSV基因序列设计两条引物,用快速扩增cDNA末端技术,扩增WSV321和WSV322两个阅读框所处的cD-NA的5′端片段和3′端片段,分析得到其全长共1 109bp,与已报道的WSSV全基因序列(AF332093)的相关序列完全相同.该mRNA存在polyA,并有加尾信号AATAAA;两个阅读框都没有自己的TATA盒,但都有病毒RNA聚合酶Ⅱ的结合位点-CCAAT盒;它们编码的蛋白质分别有117和227个氨基酸,都存在可能的糖基化位点,其中WSV321一个,WSV322两个.     

检测人血清中SARS冠状病毒IgG抗体的ELISA方法建立及其应用

为了建立方便、敏感和特异的SARS病毒血清学诊断方法,利用PQE30表达系统在大肠杆菌M15中分段高效表达了SARS病毒N蛋白.通过金属鏊合亲和层析纯化了目的蛋白N-1和N-2,Western blot结果显示,两个表达蛋白均具有较好的抗原性.然后将N-1和N-2蛋白共同包被,建立了检测人血清中SARS病毒IgG抗体的间接ELISA法.用此方法检测120例临床诊断为SARS的病人和244个不同年龄组正常人血清IgG抗体,结果120例SARS病人的第一份血清IgG抗体总阳性率为60.0%,发病第0～7、8～10、11～14、15～27和28天后的血清中,SARS病毒IgG抗体阳性率分别为0、11.1%、60.0%、60.5%和70.3%;而244份正常人血清检测结果均为阴性,包括100份14岁以下儿童血清也未发现假阳性.结果表明,利用大肠杆菌表达的N蛋白完全能够替代全病毒灭活抗原,所建立的间接ELISA方法简单,价格低廉,能保证生物安全,对SARS可疑病例的确诊和排除具有重要的实际应用价值,可用于SARS高危人群的血清流行病学监测,SARS疫情的控制和预防,以及SARS病毒蛋白功能的研究.     

蛇咬伤后股脉管阻留和腔隙综合征

一位 1 5岁因被蛇咬伤踝部的病人出现了肿胀 ,肿胀扩展到胸壁 ,并出现明显的止血异常 ,腔隙综合征和股脉管阻留综合征都出现了。腔隙综合征易酷似于没有腔隙综合征的蛇咬伤。由测定腔隙内压力、舒张压或平均动脉血压力的趋向所导出的方程用来决定进行筋膜切开术时的所需 ,可不考虑区域性的静脉压或动脉压。一旦低血容量症和凝血病已经控制 ,那么 ,由蛇咬伤所致的合并脉管内阻留和腔隙综合征就有充分理由进行紧急的外科手术蛇咬伤后股脉管阻留和腔隙综合征@宾萍     

糖尿病患者的院外健康教育与自我护理

糖尿病是以血糖增高为主要特征的临床综合征,是一种慢性代谢性疾病,是目前尚不能根治、需终身治疗的疾病.因糖尿病是慢性终身疾病,大多数患者要院外治疗.     

肠粘膜上皮细胞在天然免疫中的作用

粘膜免疫是机体防御系统的主要成分。致病性细菌侵入机体后,首先遭遇到天然免疫的抵抗,随后产生获得性免疫,两共同执行机体的防御功能,消灭入侵细菌。最近的研究表明上皮细胞对细菌感染有重要的免疫调节作用,在天然免疫与获得性免疫防御机制中起重要作用。本重点介绍肠上皮细胞在天然免疫中的作用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达研究

采用RT—PCR方法自猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组分离出核衣壳蛋白基因(ofr7),克隆到pMDl8—T载体构建成重组质粒pMDl8N并进行测序比较,结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与PRRSV美洲型ATCCVR—2332株的同源性为100％,表明ofr7是PRRSV基因组内很保守的序列;将ofr7亚克隆到原核表达载体pGEX—KG,构建成重组质粒pGEX—KGN,用pGEX—KGN转化表达菌株BL21,经SDS—PAGE和Western-blot分析表明：克隆在谷胱苷肽转移酶(Glutathione S-transferase(GST)下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST—N分子量约为41kDa,并且有免疫学反应活性;这为猪繁殖与呼吸综合征的血清学诊断方法的建立打下了基础。     

肠道非何杰金淋巴瘤与EB病毒感染的相关性研究

目的：研究肠道非何杰金淋巴瘤(NHL)与EB病毒(EBV)感染相关性。方法：利用EBV寡核探针(EBER)原位杂交法检测EB病毒。结果：16例肠道NHL好发部位于小肠下端和结肠,以单发瘤结节多见,常伴有溃疡形成。经免疫组化证实3例为T细胞淋巴瘤(18．75％),13例为B细胞淋巴瘤(81．25％)。：EBV—EBER原位杂交3例有阳性表达,均为T细胞淋巴瘤,阳性细胞占肿瘤细胞的25％～75％。B细胞淋巴瘤未见阳性表达。结论：肠道非何杰金淋巴瘤以B细胞淋巴瘤多发,并以惰性淋巴瘤为多见;而T细胞淋巴瘤多为侵袭性,且与EBV感染的相关性较高,与B细胞淋巴瘤无相关性。     

全身炎性反应综合征-急性肺损伤大鼠模型的研究

目的　研究大鼠经“一次打击”和“二次打击”后导致全身炎性反应综合征 肺损伤 (systemicinflammato ryresponsesyndrome acutelunginjury ,SIRS ALI)的动物模型 ,并探讨其意义。方法　用梯级剂量的大肠埃希菌脂多糖(lipopolysaccharide ,LPS)致伤大鼠 ,复制“一次打击”模型 ;用小剂量油酸致伤大鼠后 ,再予小剂量LPS ,复制“二次打击”模型。结合动脉血气分析、外周血白细胞计数、肺湿重 干重比值 (W D)及肺组织病理观察 ,评估两种SIRS ALI动物模型。结果　在“一次打击”模型中 ,当LPS≥ 8mg kg时 ,动物出现顽固的低氧血症和明显的病理组织学改变 ,类似SIRS失控 ;小剂量油酸加LPS两次打击 ,亦可导致SIRS失控。结论　较大剂量LPS一次性致伤 ,类似临床严重感染导致单相速发型SIRS ALI的发生过程 ;而油酸加LPS两次致伤 ,可模拟创伤后继发感染导致双相迟发型SIRS ALI的发生过程     

金双歧治疗老年慢性肠功能紊乱临床观察

慢性肠功能紊乱是老年人常见多发病。临床主要表现为腹胀、腹痛、腹泻与便秘交替出现 ,另外 ,常伴有食欲不振、呃逆。且病程长 ,治疗困难。传统的治疗方法多采用抗生素、胃动力药物治疗 ,不但疗效甚微 ,而且会致体内微生态失调 ,重者至霉菌滋生。我们应用金双歧治疗老年慢性肠功能紊乱86例 ,取得较好效果 ,现报道如下。1　资料与方法1 1　一般资料　选取门诊和住院患者 86例 ,其中男 31例 ,女 5 5例 ,年龄 6 3～ 81岁 ,平均 6 7岁 ,病程 3～ 18年 ,平均 8年。1 2　临床表现　 86例患者均有不同程度呃逆厌食 ,其中腹泻伴腹痛 (排便 3～ 5次 /…