两种方式接种肝癌模型的比较

目的观察直接注入法和瘤块种植法制作Wistar大鼠肝癌模型的差异。方法采用大鼠含有Walker-256肿瘤细胞的腹水离心洗涤后接种于另一组大鼠的后腿后外侧皮下,待肿瘤长到直径约为1．0em,取下肿瘤并切成1．0-2．0mm^3大小。然后将瘤块接种于15只大鼠的肝叶上;另一组（15只）按上述方式将癌性腹水接种于正常大鼠的肝叶上;两组均在第7天后采用CT和开腹后游标卡尺分别测量种植性肝癌的直径。结果腹水直接注射法与瘤块种植法的肿瘤成瘤率分别为：86．7％和80％,两者并不具有统计学意义（P〉0．05）。第7天时,直接注射法所形成肿瘤的直径大于瘤块种植法的肿瘤（P〈0．05）。但瘤块法所引起的腹腔转移的可能性要少于腹水直接种法。结论直接注射法和瘤块种植法制作大鼠肝癌模型均可以满足临床实验研究的需要,但直接注射法的成瘤时间短,腹腔转移可能性也大;瘤块种植法成瘤时间略长,但腹腔转移可能性少于直接法。     

槲皮素下调hTERT表达对肝癌HepG2细胞生长影响研究

目的观察槲皮素对肝癌HepG2细胞生长及对hTERT基因表达的影响。方法以台盼蓝拒染法计数肝癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,western-blot、RT-PCR检测hTERT基因表达改变,PCR-TRAP法检测端粒酶活性。结果台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48h后的Ic50为25.5μm。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经10～20μm/L的槲皮素处理,肝癌HepG2细胞周期阻滞于G0/G1期,且HepG2细胞hTERT蛋白和mRNA表达降低,端粒酶活性受抑制。结论槲皮素能抑制肝癌细胞的生长,呈时间、剂量依赖性,能诱导HepG2细胞发生凋亡,其抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。     

大型重组新药EPO将在日本生产、销售

用基因操怍制造的造血激素EPO,用作肾脏透析患者的贫血治疗药物将获准生产、销售。 问世的这种用生物技术制造的EPO在日本的市场将超过干扰索,保持250-500亿日元,而潜在市场还要大几倍。美国Amgen公司生产的EPO已于1989年6月出售,这一个月销售额为1600万美元,预计到1990年3月止可达7500-8500万美元。     

干扰素和干扰素基因工程研究动向

当代人类所面临最严重的疾病--癌症和某些病毒病特别是潜伏性病毒病。据报导美国每年有40万人死于癌症,每四人当中有一人患不明病因之症,死于癌症牺牲者占这种病的2/3,有谓人类“头号敌人”之称。潜伏性慢病毒病也是一种最辣手的难题,因为这种病一旦发生,生命是无法挽救的,为制服这类病症所需药物之供应是一项最紧     

GP73及其相关miRNA在肝癌中的研究进展

高尔基体蛋白73 (Golgi protein 73, GP73)是位于顺式高尔基体膜上的糖基化跨膜蛋白,其在肿瘤的发展进程中具有重要作用,是肿瘤治疗的潜在靶标。目前研究表明, GP73可作为辅助诊断肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的血清学标志物。随着GP73的深入研究,与GP73有关的微RNA (microRNA, mi RNA)也逐渐被挖掘出来。GP73相关mi RNA与多种肿瘤的发生、发展密切相关,其中mi R-212、mi R-27a等mi RNA能抑制HCC的侵袭及转移, GP73与mi R-27b、mi R-493-5p等能作为HCC患者预后的生物标志物。因此, GP73相关mi RNA用于肝癌的诊治是有前景的。本文总结了GP73及其相关mi RNA在肝癌发展中的作用以及机制,希望为肝癌的机制研究和诊疗提供思路。     

大黄素介导铁死亡途径抑制MHCC-97H人肝癌细胞的迁移和侵袭

目的 探讨大黄素对肝癌细胞生长的影响及其作用机制。方法 体外培养人肝癌细胞MHCC-97H,使用不同浓度的大黄素处理细胞,使用CCK-8实验检测细胞存活率筛选后续大黄素实验剂量。并将MHCC-97H细胞随机分为Blank组、Dose 1组（8μmo/L的大黄素）、Dose 2组（16μmo/L的大黄素）和Positive组（60μg/mL的顺铂）,药物处理24 h后采用平板克隆法检测细胞菌落形成,Western blot检测细胞GPX4、ACSL4、FTH1蛋白表达水平,Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力,并评估细胞铁离子含量和GSH水平。结果 大黄素可呈剂量依赖性降低细胞存活率;大黄素可降低MHCC-97H细胞克隆形成率、迁移和侵袭细胞数、GPX4蛋白水平、GSH水平,提高细胞凋亡率、铁离子含量、及ACSL4和FTH1蛋白水平。结论 大黄素可能通过诱导铁死亡途径,抑制细胞迁移和侵袭,诱导凋亡。     

肝脏注射醋酸引起局部坏死的实验研究

本实验的目的是证实醋酸可引起肝局部坏死,并且作用强于无水乙醇。对鼠肝局部注射醋酸后,从大体及组织学改变观察局部坏死情况并寻找最适浓度。结果发现醋酸可引起注射局部坏死完全,与周围分界非常清晰,其中５０％醋酸引起的坏死区平均直径最大,且明显优于无水乙醇。提示醋酸可以作为一种制剂,用于局部注射治疗肝癌。     

过表达TIMP3对肝癌细胞生物功能的影响

组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)在肝癌中的具体作用机制尚不明确。该文探讨了TIMP3在肝癌细胞中的表达及其对细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期的影响。通过q RT-PCR和Western blot检测肝癌细胞株(97H、97L和HUH7)和人正常肝细胞(LO2)中TIMP3的表达情况。将过表达TIMP3的质粒转染进97H和HUH7细胞,利用q RT-PCR和Western blot检测转染后细胞的TIMP3表达情况。通过MTT实验和活细胞工作站检测过表达TIMP3对肝癌细胞增殖的影响。此外,通过流式细胞术检测过表达TIMP3对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响,通过划痕实验检测表达TIMP3对肝癌细胞迁移的影响。最后,利用GESA软件进行基因富集分析以及Int Act数据库构建相互作用蛋白网络图对TIMP3相关生物学功能进行探索。研究结果表明, 97H、97L和HUH7细胞中TIMP3的表达比LO2细胞中低。97H和HUH7细胞转染TIMP3质粒后RNA及蛋白水平明显升高,且过表达TIMP3可以促进细胞增殖,促进G1期向S期转化,抑制细胞凋亡,下调Bax的表达,上调Bcl-2、Bcl-xl的...     

迁移体相关基因在人肝癌发展过程中的作用机制研究

迁移体(migrasome)是由迁移细胞产生的细胞器,在胚胎发育、机体免疫反应和肿瘤转移等细胞生物学行为过程中发挥信号转导作用,然而其在人(Homo sapiens)肝癌中的作用尚不清楚。为了探究迁移体相关基因对肝癌患者恶性进展及临床预后的影响,利用TCGA数据库分析迁移体相关标志基因TSPAN4、TSPAN7、KIF5B、MYO19、DNM1L mRNA表达水平;绘制Kaplan-Meier曲线分析上述基因对肝癌患者临床预后的影响;利用临床生信之家(assistant for clinical bioinformatics,ACLBI)网站进行GO和KEGG富集分析;运用STRING数据库平台及Cytoscape软件开展蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析。在人肝癌细胞SMMC7721、 Huh7中转染合成siRNA,用CCK8法评估转染TSPAN4后细胞增殖能力的改变;利用免疫荧光染色法检测细胞中TSPAN4蛋白的表达分布;利用碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染法检测细胞周期分布;利用划痕伤口愈合实验和Tran...     

组蛋白乙酰基转移酶1在肝癌细胞中介导的蛋白质乙酰化修饰谱分析

赖氨酸乙酰化是重要的蛋白质翻译后修饰之一,广泛存在于细胞的生理和病理过程.组蛋白乙酰基转移酶1(HAT1)作为第一个被鉴定的蛋白ε-氨基赖氨酸乙酰基转移酶,具有介导组蛋白和非组蛋白乙酰化的作用.然而,在肝癌细胞中HAT1介导的乙酰化蛋白质及其修饰位点目前仍不清楚.本研究首先揭示了 HAT1在肝癌组织中呈高表达,并且与预...