靶向增殖细胞核抗原shRNA的构建及其对HepG2细胞增殖与凋亡的影响

为了探讨抑制增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,将前期筛选出的最佳siRNA序列转化为能表达其小发夹结构RNA(smallhairpinRNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencer2.0-U6质粒定向连接,构建靶向PCNA基因的siRNA真核表达载体pShPCNA,经DNA测序证实与设计完全一致.随后采用WST法及克隆形成抑制观察细胞增殖抑制情况、划痕实验来观察细胞迁移能力,流式细胞术、Hoechest33258染色、细胞线粒体膜电位改变检测细胞凋亡.在转染HepG2细胞48h后,pShPCNA组细胞PCNAmRNA表达明显下调,并出现明显的增殖抑制作用,明显抑制细胞克隆的形成和细胞的迁移力,且呈剂量-效应关系.流式细胞术检测发现:pShPCNA组细胞明显阻滞于G0/G1期,并出现明显的亚二倍体凋亡峰,出现明显的早期凋亡细胞群.荧光显微镜检测表明,细胞线粒体膜电位降低,并且细胞出现核固缩、凋亡小体等凋亡形态学变化.上述结果表明,成功构建了靶向PCNA基因的siRNA真核表达载体pShPCNA,pShPCNA转染HepG2细胞48h后,能够显著抑制细胞的生长增...     

中药单体防治原发性肝癌研究进展

原发惶肝癌（以下简称肝癌）是我国常见的恶性肿瘤之一,县有恶性程度高、进展快的特点,占恶性肿瘤死亡患者的第三位。中医药在肝癌的治疗中发挥了重要作用,中西医结合治疗已经成为重要的治疗手段。近年来由于分子生物学理论和技术的飞速发展,人们对肝癌的认识和理解发生了很多改变,极大丰富了肝癌研究内容,包括肝癌的病因学、     

高龄患者腹腔镜直肠癌根治术不同麻醉方法的比较

目的观察比较3种麻醉方法对高龄腹腔镜直肠癌根治术患者的呼吸循环功能和麻醉效果的影响。方法将45例高龄腹腔镜直肠癌根治术患者随机分成3组,每组15例。EA组,连续硬膜外阻滞麻醉组;GA组,静吸复合全身麻醉组;EGA组,小剂量硬膜外阻滞复合静吸全身麻醉组。观察3组麻醉开始前(T0)、麻醉诱导期(T1)、气管插管时(T2)、拔除气管导管时(T3)的HR、SBP、DBP、MAP、PETCO2、ECG,GA组与EGA组同时监测异氟醚MAC、气道压、手术结束自主呼吸恢复时间、自主呼吸潮气量达标、拔管时间、肌松情况及患者麻醉苏醒时间。结果 EA组有13例麻醉效果优良,SpO295%,PETCO2维持在正常范围;EGA组术毕自主呼吸恢复时间、潮气量达标、拔管时间均明显短于GA组(P0.01)。EA组在麻醉10～15 min后血压下降程度与GA组、EGA组麻醉诱导期血压下降相似(P0.05),EGA组在气管插管/拔管期血压波动不明显,而GA组血压显著升高(P0.01);EA组与GA组麻醉效果相似,EGA组麻醉效果优于GA组(P0.05)。结论 EGA组椎管内局麻药用量、全麻维持药用量、肌松药用量等均相应减少,呼吸循环功能较为稳定,术毕麻醉苏醒快,自主呼吸恢复和潮气量达标迅速,多数患者术毕即可拔除气管导管,是高龄腹腔镜直肠癌根治术患者理想的麻醉方法。     

TACE联合抗病毒治疗HBV相关性肝癌的预后观察及相关因素分析

摘要 目的：分析影响肝动脉化疗栓塞（TACE）联合抗病毒治疗乙型肝炎病毒（HBV）相关性肝癌预后的相关因素。方法：纳入的130例HBV相关性肝癌选自于本院2018年2月至2020年3月期间所收治，所有患者均行TACE联合抗病毒治疗，记录其生存情况，并对影响患者预后的相关因素进行分析与探讨。结果：130例患者随访截止时，死亡58例，存活72例，中位生存期为24个月，1年生存率为82.31%，2年生存率为55.38%；单因素及多因素Cox回归分析结果显示，肿瘤最大直径、血清AFP、Child-Pugh分级、腹腔转移、门静脉癌栓是患者预后不良的的危险因素。结论：肿瘤最大直径、血清AFP、Child-Pugh分级、腹腔转移、门静脉癌栓是影响TACE联合抗病毒治疗HBV相关性肝癌病患预后的影响因素。     

注射法制作ICR小鼠肝癌模型及其改进

应用直接注射法制作ICR小鼠原发肝癌模型并成功地进行方法改进。对模型小鼠进行了体重监测、原位移植成功率统计和病理检查,结果表明改进后的直接注射法制作小鼠原发肝癌模型的成功率显著提高,并成功模拟出肿瘤的多器官转移及人类肝癌常见的临床症状、体征。模型可以很好的满足抗肿瘤药物开发、肝癌发生发展机制研究的需要。同时,直接注射法改进方案和理念解决了直接注入细胞产生返漏的技术难题,为进一步建立其他脏器的原发或继发性癌症移植模型打下了基础。     

癌症”自愈”之谜

所谓癌症“自愈”（自动康复）,对癌症患来说,自然是最大的安慰和鼓舞了,也打破了“癌症”的绝症之称,“自愈”现象其实是一个复杂的生物学问题。所谓“自愈”,即指通过患机体的“卫士们”同癌细胞及其诱因进行一番激烈的斗争而获得胜利。它们不仅存在于免疫系统细胞内,而且在非免疫系统中的肿瘤细胞和部分正常上皮细胞内也有它们的存在,它们的联合激活更有利于战胜癌症。美国癌症协会曾发布一项调研结果,称在美国约有10％癌症患的病症会自然消退,尔后极少复发。美国一家医院的临床统计称,已有1000例以上的癌症患自行康复,这确实令人称奇。     

采用sPD-1协同4-1BBL进行肿瘤免疫基因治疗的研究

目的 探讨采用sPD-1协同4-1 BBL进行肿瘤免疫基因治疗的效果及相关的免疫学机制.方法 以不同剂量的H22肝癌细胞接种于BALB/c小鼠右后腿肌肉内,建立小鼠肿瘤模型;采用可溶性PD-1 （sPD-1）和4-1 BBL真核表达质粒体内转染进行基因治疗;观察接种不同剂量肿瘤细胞、不同治疗时间小鼠的成瘤率及肿瘤治疗效果;RT-PCR检测肿瘤微环境中免疫调控相关基因的表达;组织切片检测肿瘤细胞浸润肌肉组织的组织学变化;流式细胞仪检测脾脏细胞毒性T细胞（CTLs）的杀瘤效率.结果 转染4-1 BBL/sPD-1基因治疗后,接种低剂量（1 × 104个/ml） H22肿瘤细胞的小鼠肿瘤生长完全受到抑制;接种高剂量（1×105个/ml） H22肿瘤细胞的小鼠肿瘤也受到显著抑制.通过延长基因治疗,荷瘤小鼠的成瘤率随着治疗时间的延长逐渐递减,至8周时成瘤率为0;基因治疗不仅促进IFN-γ和IL-2基因表达上调,而且也使TGF-p、IL-10的表达下调;瘤组织中CD8＋ T淋巴细胞数量增多和脾淋巴细胞的杀瘤效率显著增加.结论 利用体内存在的少量肿瘤可作为抗原刺激淋巴细胞的激活;基因治疗适用于对手术、化疗、放疗后体内残存的少量肿瘤细胞的清除;当体内存在大量肿瘤细胞时,适当延长基因治疗时间可获得较好的治疗效果.     

肿瘤患者铜绿假单胞菌感染及耐药性分析

目的探讨近年来浙江省肿瘤医院肿瘤患者铜绿假单胞菌感染情况及耐药性,指导临床合理用药。方法采用法国生物梅里埃公司的全自动细菌鉴定系统VITEK-32及其配套的细菌鉴定卡和药敏卡。结果铜绿假单胞菌近年来分离率保持在2%~3%,居医院感染的第四位。铜绿假单胞菌对泰能、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、左旋氧氟沙星等呈现出较高的敏感性,敏感率都在80%以上,而对头孢噻肟和头孢三嗪具有很高的耐药性。结论要严格控制和合理选择抗生素的使用,特别是头孢类抗生素。对喹诺酮类抗生素的耐药性要密切关注。     

乳果糖对肝癌TACE后肠黏膜损伤的保护作用研究

目的了解乳果糖对肝癌TACE后患者肠黏膜损伤的保护作用。方法将54例患者随机分为2组,治疗组按常规治疗加服乳果糖,对照组按常规治疗,服药后观察全身和肠道情况并检测二胺氧化酶(DAO)的内毒素水平。结果治疗组血二胺氧化酶水平与术前相比差异无显著性(P>0.05),未应用乳果糖组血内毒素水平比术前降低(P<0.05);治疗组血内毒素水平与术前相比差异无显著性(P>0.05),而未应用乳果糖组血内毒素水平比术前升高(P<0.05)。结论乳果糖增强了肠道黏膜的屏障作用,在避免肝癌TACE后的肠道细菌易位,内毒素血症起到积极作用。