用加酶洗衣粉提取野生动物基因组DNA的新方法

介绍一种新的动物基因组 DNA 提取方法.该方法用加酶洗衣粉、洗洁精替代含有蛋白酶K、SDS、EDTA等成分的裂解液裂解动物肌肉样品,具有经济、简便、快速的特点,以所获得的 DNA作为模板能扩增出高纯度的PCR产物,有助于快速、准确地鉴定野生动物的种属.     

pH值对FOXO1、GDF-8基因反义RNA寡核苷酸吸收的影响

研究不同pH值下,口服靶向FOXO1与GDF-8基因反义RNA寡核苷酸药物对药效的影响.化学合成靶向FOXO1与GDF-8基因的有效反义RNA寡核苷酸片段,调节药物PH值,通过灌胃方式给药,给药20 d后处死小鼠,进行体重,腿部肌肉增长情况分析.提取腿部肌肉组织总RNA,用real time PCR检测FOXO1与GDF-8基因的表达.结果表明,服用RNA oligos的试验组小鼠腿部肌肉重量均比对照组肌肉重量增长快.其中pH为7.0的RNA oligos的效果比pH为5.0的效果好, pH9.0的RNA oligos的作用效果最弱.与小鼠体重变化结果一致,real time PCR检测实验组FOXO1与GDF-8基因转录水平较对照组均有明显下降,其中服用pH为7.0的RNA oligos的下降最多.因此,口服靶向FOXO1与GDF-8基因的反义RNA寡核苷酸药物的最适pH值应为中性偏酸.     

Sec-10 影响神经肌肉接头突触后敏感性的研究

exocyst复合物在分泌过程中起重要作用．可是分子机理尚未研究透彻．通过TMP/UV的基因敲除方法,得到了exocyst复合物中一种组分sec-10的缺陷型线虫．药学结果显示这种线虫神经信号传递存在缺陷,可是电生理的方法证明在神经肌肉接头处的已报道离子型受体和野生型相比并未发生改变．因此猜测,sec-10并未直接影响神经肌肉接头处的离子型受体,而是通过其他途径来行使功能．     

山溪鲵头部肌肉大体解剖

通过染色、解剖、观察和绘图对山溪鲵头部肌肉做了详细描述.山溪鲵头部肌肉包括头侧肌肉、头腹肌肉、眼部肌肉及喉部肌肉.其肌肉组成与有尾类头部肌肉的一般构成基本一致.从第二鳃弓游离端内侧发出一细条状肌纤维,附着在三角骨外侧末端,此种情况在以前其他有尾类肌肉系统研究中未见报道.     

名刊封面

《分子细胞》2009.5细胞结构如同螺母;《自然》2009.5“弗洛勒斯人”到底是什么“人”？《神经元》2009.5听力也需校准《科学》2009.5海平面上升的新预测;《发育细胞》2009.5肌肉收缩决定关节分化;《农业与食品化学杂志》2009.5利用激光检测婴儿奶粉三聚氰胺;     

用Cre/LoxP和CRISPR基因工程技术构建猪肌肉生长抑制素双等位基因敲除细胞系

肌肉生长抑制素 (myostatin,Mstn)基因失活可引起哺乳动物的肌肉增生,但其调控机制尚不清楚,且缺乏可靠的试验材料验证Mstn相关分子通路的变化。本研究所用PK3108细胞系是在野生型PK15细胞系的基础上成功靶向敲除一条等位基因,在其靶位点敲入标记基因,敲除了204 bp的外显子3序列, LoxP锚定在其标记基因两侧。利用Cre/LoxP重组酶删除系统删除插入PK3108Mstn靶位点的标记,借助流式细胞仪和荧光蛋白甄别得到无标记的过渡型细胞系PK3108-2。将Cas9/sgRNA表达载体和供体DNA共转染PK3108-2,借助G418抗性筛选和倒置荧光显微镜挑选出仅带阳性标记的克隆L18,对其基因组进行PCR产物凝胶电泳与PCR产物测序,证明克隆L18在预设位点发生同源重组;对其蛋白质进行Western 印迹实验表明,Mstn被成功地敲除失活。综上结果证明,本研究实现了双等位基因的精准敲除,构建了Mstn双敲除梯度回复表达细胞系。本研究为揭示Mstn的作用机制提供理想的实验材料,也为双等位基因的敲除提供了可借鉴的技术路线。     

大黄鱼肌肉生长抑制素-1前肽原核表达、多克隆抗体制备和功能验证

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)在动物肌肉的生长和发育过程中起着重要作用。该研究通过RT-PCR从大黄鱼(Larimichthys crocea)肌肉组织中克隆肌肉生长抑制素-1前肽基因(MSTN-1pros),构建了表达大黄鱼生长抑制素前肽的重组质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,获得了大黄鱼MSTN-1pros融合蛋白。用分离的重组蛋白免疫大白兔,制备了抗大黄鱼MSTN-1pros的多克隆抗体。经蛋白免疫印迹法检测,确定获得的抗体具有较高的特异性。通过对大黄鱼幼鱼的注射实验,发现注射过MSTN-1pros抗体的大黄鱼增重率比对照组降低了20.71%(P0.05),证明MSTN前肽抗体对大黄鱼的生长具有抑制作用。实验结果表明,MSTN前肽蛋白可以用于养殖鱼类的生长调控。     

优秀赛艇运动员不同部位肌肉微循环血流灌注量的变化特点

目的：探讨优秀赛艇运动员不同部位肌肉微循环血流灌注量（MB）的变化特点,为无创微循环相关指标更好的应用于运动员机能监控提供参考和借鉴。方法：运用PeriFlux System5000系列激光多普勒血流仪对12名优秀男子赛艇运动员不同部位肌肉微循环血流灌注量进行无创测试,测试环境为室内,温度（25±3）℃,湿度45．O％～65．O％。结果：①基础值：肱二头肌〉肱桡肌〉股四头肌〉腓肠肌,且肱二头肌显著高于肱桡肌（P〈0．05）,极显著高于股四头肌和腓肠肌（P〈0．01）;②加热后值及加热前后差值：肱桡肌〉肱二头肌〉股四头肌〉腓肠肌,且肱二头肌、肱桡肌显著高于腓肠肌（P〈0．05）。结论：优秀男子赛艇运动员上肢肌肉值MBF值要明显高于下肢肌肉,尤其加热后值上肢肌肉明显高于下肢肌,而上肢肌肉或下肢肌肉之间则不存在明显差异,因此为了使监测结果更具有代表性,赛艇运动员进行微循环血流灌注量及其相关指标监测时应选取上肢相同肌肉上同一空间的解剖位点。     

军队院校毕业班学员的人体成分检测

目的：通过测量军校毕业学员的人体成分,探讨军校毕业学员与普通居民的区别,并为建立相关标准提供依据。方法：按飞行院校、分流院校、合训院校、技术院校和士官学校分层抽取5968名毕业学员,分别进行人体成分检测,根据结果划定5%-95%分布上下限。并就军校毕业学员的体脂百分比、体质指数（BMI）、肌肉百分比、骨质百分比指标与同年龄、同性别城乡居民进行比较。结果：1军队院校毕业学员体脂百分比的参考值范围为10.3%-20.7%（男）和19.2%-30.1%（女）;BMI参考值范围为19.30-25.70（男）和18.00-23.99（女）;瘦体重百分比参考值范围为79.3%-86.7%（男）和69.9%-80.7%（女）;肌肉百分比参考值范围为74.2%-84.0%（男）和65.2%-75.3%（女）;骨质百分比参考值范围为5.0%-5.8%（男）和4.7%-5.5%（女）。2与同年龄、同性别城乡居民比较,军队院校毕业学员的体脂百分比明显较少,肌肉百分比、骨质百分比明显较高。结论：1军队院校毕业学员的身体成分数据明显优于同年龄、同性别城乡居民,总体表现为体脂较少,肌肉和骨质较多。2军队院校毕业学员的体质状况不能简单采用民用标准,需建立一套符合军校毕业学员的标准。     

大蹼铃蟾与昭觉林蛙的肌肉系统比较

本文从肌肉系统对大蹼铃蟾和昭觉林蛙进行了观察比较,结果表明这两种无尾两栖类的从存在一定差异。大蹼铃蟾的肌肉结合紧密程度不如昭觉林蛙,且肌肉分节现象较昭觉林蛙了后,以形态－功能－适应三位一体的分析原理为依据,就２个种存在的形态差异,从功能与适应的意义和生物进化地角度两个方面进行了分析和探讨。