孕酮对缺氧缺血新生鼠脑皮质HIF-1α表达的影响

目的:探讨孕酮(PROG)对缺氧缺血性新生鼠脑组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法:7日龄SD大鼠80只随机分成4组(n=10):正常对照组,假手术组,缺氧缺血组和孕酮组,动物造模成功24 h后处死动物,应用RT-PCR和免疫组织化学方法观察各组新生鼠大脑皮质中HIF-1α表达的变化。结果:孕酮组HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白表达均明显高于其他三组(P<0.01)。结论:孕酮对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用可能与其上调HIF-1α的表达有关。     

玉米转录因子zmCBF1的凝胶阻滞分析

凝胶阻滞试验是分析核酸与蛋白质相互作用的有效方法,在转录因子的功能分析中得到了广泛应用。以玉米转录因子zmCBF1与顺式元件CRT的结合为例,建立了用于转录因子分析的GRA/EMSA实验体系,并对其在应用中可能出现的问题进行了分析。     

P63和TTF-1在肺癌组织中的表达及意义

目的研究P63和TTF-1在肺癌各种类型组织中的表达及其意义。方法随机收集原发性肺癌组织标本53例（其中鳞癌16例,腺癌16例,小细胞癌14例,大细胞癌7例,均为中低分化程度癌组织）,采用免疫组织化学S-P法分别检测P63蛋白和TTF-1蛋白在各种类型肺癌组织中的表达并结合二者表达的结果进行分析。结果二者的表达在肺癌细胞中定位于细胞核,呈棕黄色。在肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌和肺大细胞癌中,P63的阳性表达率分别为93.8%（15/16）、37.5%（6/16）、21.4%（3/14）、28.6%（2/7）;TTF-1的阳性表达率分别为18.8%（3/16）、75%（12/16）、78.6%（11/14）、0%（0/7）。结论①P63在肺鳞癌中的表达水平较高,可以作为鉴别低分化鳞癌与低分化腺癌,小细胞癌的指标;②TTF-1在低分化腺癌和小细胞癌中的表达水平较高,对于肺癌组织类型和非癌组织的鉴别具有一定意义;③根据P63和TTF-1在肺癌组织的特异性表达,将二者联合起来有助于对低分化鳞癌和低分化腺癌以及低分化鳞癌和小细胞癌的鉴别诊断。     

外源基因表达造成的群体感应细菌生存压力的建模分析

外源基因的表达及其对细菌种群的影响对于群体感应系统和合成生物学产业的研究具有重要意义。然而,人们对于表达外源蛋白的细菌本身的行为模式仍然知之甚少。为了研究菌落生长和外源基因表达的过程究竟受到哪些因素的影响,文中测量了受Lux类受体调控的外源基因在N-酰基高丝氨酸内酯 (N-acyl homoserine lactone,N-AHL) 信号分子诱导下的表达,并模拟了其对细菌种群动态的影响。文中建立了一个假设性的数学模型,对信号分子诱导表达下细菌种群生长受影响的现象进行了分析。先前的研究通常将细菌种群生长受群体感应系统影响的现象归咎于合成群体感应信号分子的消耗与N-AHL信号分子的毒性,文中提供了对于这种生存压力的另一种可能的解释。     

缺氧诱导因子1研究进展

缺氧诱导因子１（ＨＩＦ－１）在缺氧诱导的哺乳动物细胞中广泛表达,为缺氧应答的全局性调控因子。ＨＩＦ－１由ＨＩＦ－１α和ＨＩＦ－１β两亚基组成,为异源二聚体转录因子。ＨＩＦ－１α的ｂＨＬＨ和ＰＡＳ结构域与二聚化及ＤＮＡ结合活性有关,ＴＡＤ结构域则主要参与转录激 活。ＨＩＦ－１α的全长基因已克隆并在人和小鼠中定位。通过作用于靶基因的缺氧反应元件（ＨＲＥ０,ＨＩＦ－１参与缺氧诱导的一系列基因的表达调控。     

转化生长因子-β对基质金属蛋白酶及其组织抑制因子调控的研究进展

基质金属蛋白酶 (MMPs) 及其组织抑制因子 (TIMPs) 参与调控胞外基质 (ECM) 的降解与重建,二者的协同作用以及表达的动态平衡保证组织的生理/病理形态结构建成,并完成生长、分化、维持、降解的往复周期. 转化生长因子-β(TGF-β)通过对MMPs和TIMPs家族成员因细胞类型而异的基因表达调控作用,表现出调节ECM重建的生物学效应. TGF-β可通过激活Smad通路、促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 通路,以及刺激激活蛋白-1(AP-1)复合体的形成,完成对MMPs和TIMPs基因表达的调控功能.     

利用两种不相容质粒在大肠杆菌中共表达DFF45和DFF40

DNA断裂因子（DNA fragmentation factor,DFF）是细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白质之一,它由分子量为45kD和40kD的两个亚基构成,分别称为DFF45和DFF40。利用RT－PCR技术从人宫颈癌细胞系HeLa的总RNA中扩增了DFF45和DFF40的cDNA,分别克隆到到卡那霉素抗性表达载体pET-28a( )中,构建了pET28a-DFF45和pET28a-DFF40。用它们单独转化大肠杆菌BL21（DE3）后,经IPTG诱导都可获得高效表达。表达的重组蛋白质各自约占菌体总蛋白质的56％和22％。再将DFF45的cDNA克隆到氨苄青霉素抗性表达载体pET-21a( )中,得到了pET21a-DFF45。利用二者的不同抗性,将pET28a-DFF40和pET21a-DFF45共同转化大肠杆菌BL21（DE3）,工程菌经IPTG诱导后实现了DFF45和DFF40的共表达,表达产物各约占菌体总蛋白质的30％和17％。为了研究这两种不相容质粒在细菌中共存的稳定性,我们将共转化子在同时含有卡那霉素和氨苄青霉素的液体培养基中连续培养14h,发现此时仍有75％以上的细菌可同时耐受两种抗生素,即同时含有pET28a-DFF45和pET28a-DFF40,说明利用两个具有不同抗性的不相容载体进行蛋白质共表达的方法是可行的。     

一种转录受病原物接种和机械创伤诱导的水稻WRKY基因的鉴定

WRKY基因编码一类植物特异性转录因子,该类基因目前在双子叶植物中得到了较好的研究.为了研究WRKY基因在单子叶植物中的生物学功能,从水稻(Oryza sativa L.)中分离了OsiWRKY基因的cDNA.该cDNA可编码一个含482个氨基酸残基的蛋白质,该蛋白质预测的一级结构中含有一个WRKY结构域,在该结构域中发现了一个典型的C2-H2锌指结构模块.OsiWRKY预测的一级结构中还可能含有一个细胞核定位因子;利用瞬时表达体系,发现OsiWRKY与GFP绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白的确定位在水稻细胞核中.在凝胶阻滞实验中,体外表达的OsiWRKY蛋白可特异地结合W-box顺式因子.在水稻白叶枯病原细菌接种实验中,OsiWRKy基因的转录本在抗病品种(IR-26)中的诱导增加强度明显高于感病品种(Jingang 30).在模拟接种的水稻中,OsiWRKy基因的转录本也表现诱导增加,但其诱导增加的起始时间和幅度要显著低于水稻白叶枯病原细菌接种的水稻植株.这些结果表明,OsiWRKY基因可能编码了一个含有WRKY结构域的转录因子,该转录因子可能参与了水稻对病原物接种和机械创伤的反应,但OsiWRKY蛋白调节两种反应的机制可能有所不同.     

肿瘤坏死因子与病毒感染

肿瘤坏死因子是一种具有广泛生物学活性的细胞因子,在病毒感染中具重要作用,许多病毒能诱导机体细胞产生ＴＮＦ,研究表明ＴＮＦ能选择性地破坏病毒感染细胞,具有抗病毒作用。近几年研究发现ＴＮＦ能增加某些病毒复制,加速机体损害,与病毒感染疾病的严重程度有关。     

健脾益肾活血方联合达格列净对糖尿病肾病患者炎症因子、氧化应激和血清AGEs、NGAL、MCP-1的影响

摘要 目的：观察健脾益肾活血方联合达格列净对糖尿病肾病（DN）患者炎症因子、氧化应激和血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、晚期糖基化终末产物（AGEs）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的影响。方法：根据随机数字表法将如皋市中医院2021年6月~2023年3月期间收治的120例DN患者分为对照组（60例,常规治疗基础上接受达格列净治疗）和研究组（60例,对照组基础上接受健脾益肾活血方治疗）。对比两组疗效、炎症因子[白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）]、肾功能[血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、尿微量白蛋白/肌酐比值（UACR）]、氧化应激[丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）]和血清AGEs、NGAL、MCP-1水平,同时观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果：研究组的临床总有效率高于对照组（P<0.05）。两组治疗2个疗程后Scr、BUN、UACR下降,且研究组低于对照组（P<0.05）。两组治疗2个疗程后CRP、TNF-α、IL-1β下降,且研究组低于对照组（P<0.05）。两组治疗2个疗程后MDA下降,且研究组低于对照组;SOD升高,且研究组高于对照组（P<0.05）。两组治疗2个疗程后NGAL、AGEs、MCP-1下降,且研究组低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率对比未见差异（P>0.05）。结论：健脾益肾活血方联合达格列净可有效减轻DN患者氧化应激和炎症反应,调节血清AGEs、NGAL、MCP-1水平。