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131.
林锋刘莉郝贵杰曹铮盛鹏程吴颖蕾沈锦玉 《病毒学报》2014,(5):502-507
罗氏沼虾白尾病(White tail disease,WTD)是流行于罗氏沼虾苗种阶段的重要疾病,该病病原被确定为罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV),为了建立罗氏沼虾野田村病毒中国分离株(MrNV-chin)的便捷、灵敏、特异的分子诊断方法,本研究根据罗氏沼虾野田村病毒RNA2基因保守序列的6个区域设计了4条特异性引物和1条检测探针,将环介导等温扩增技术与侧向流层析试纸(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立了MrNV的RT-LAMP-LFD检测方法。结果表明,该方法的灵敏度是常规琼脂糖凝胶电泳的10倍;从核酸提取到检测结果判定仅需45min;反应特异性强,对其他虾类病毒WSSV、IHHNV、IMNV、TSV和YHV扩增结果均为阴性;操作简单,不需要复杂的仪器,在61℃水浴反应即可;利用LFD试纸显示结果,肉眼可直接观察判定。作为一种快速灵敏实用的分子诊断技术,该方法有利于罗氏沼虾白尾病的诊断与预防。 相似文献
132.
133.
非盐依赖层析的研究与应用 总被引:3,自引:0,他引:3
在非盐依赖层析操作中,吸附介质的成分、结构、密度等性质得到改进,所以料液离子强度的变化不会明显影响吸附 . 与常用的离子交换层析、疏水层析、亲硫层析等方法相比,该类技术能够降低对料液预处理的要求,提高蛋白质的稳定性,同时简化层析操作、降低纯化成本,具有大规模分离纯化蛋白质的潜力 . 近年来开发的多种非盐依赖层析介质与方法,都已在蛋白质纯化中得到应用 . 相似文献
134.
135.
黄花败酱黄酮类化合物的提取与分析 总被引:6,自引:0,他引:6
用70%乙醇提取黄花败酱黄酮类化合物,得到粗黄酮,经聚酰胺纯化,得到精制黄酮。结果表明:黄花败酱干粉中总黄酮含量为2.35%,粗黄酮、精制黄酮中黄酮含量分别为8.81%和21.39%。黄花败黄酮类化合物主要是黄酮和黄酮醇两类,其中含有芦丁成分。 相似文献
136.
高亲和力克伦特罗单克隆抗体的研制及免疫试纸检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
重氮化法将克伦特罗(CL)偶联于BSA合成免疫抗原BSA-CL,戊二醛法(GA)合成包被抗原OVA-CL,用BSA-CL免疫Balb/C小鼠。细胞融合技术建立高亲和力CL单克隆抗体(CL mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CL mAb,并测定其亲和性。依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,应用CL mAb研制CL残留快速检测免疫试纸(CL-Srip),并测定其性能。结果表明,筛选出16株杂交瘤细胞,其中亲和力最高的为3C12—6H6,亲和常数(Ka)为1.76×10^10L/mol。CL-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒和GC/MS相当,符合率为100%。CL-Strip具有具有敏感、特异、快速、简便的特点,可推广应用于CL残留的快速检测。 相似文献
137.
为建立从Cohn's组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)的技术路线,以Cohn's组分IV为原料,利用还原剂1,4-二硫苏糖醇(DTT)、气相二氧化硅等处理,再经压滤、离子交换层析和疏水层析提取α1-AT.用SDS-PAGE及合成基质法检测α1-AT的纯度以及生物活性.结果可见,Cohn组分IV沉淀中α1-AT占蛋白总量的11%~13%,经该工艺提取的α1-抗胰蛋白酶纯度为97.6%,疏水层析后α1-AT的收获率为21%,比活为每毫克总蛋白中含 0.54 mg功能活性α1-AT.可见用此方法从Cohn组分IV沉淀中可制备高纯度的α1-AT. 相似文献
138.
139.
实验研究了用薄膜包衣预混剂(Dry Suspension for Film Coating)新菲尔(THIN FILM)用于苦胆草片的包衣方法,并用正交试验确定最佳工艺条件,结果表明:最佳条件为:包衣液浓度20%,流量0.15-0.18kg/min,颗粒水分3%-5%,硬度4-5kg/mm^2最主要的影响因素为包衣液的浓度,且新菲尔包制的薄膜衣片经过与糖衣片相比,其抗湿性优于糖衣片,且增重小,缩短了工作时间。 相似文献
140.