杨桃提取物体外清除氧自由基作用

从杨桃果中提取得到三种提取物为匀浆提取物、蛋白提取物和多糖提取物。采用化学发光法测定这三种提取物清除氧自由基的活性,实验结果:匀浆提取物清除羟自由基(·OH)和H2O2的活性大小相近,而清除超氧阴离子自由基(O2–·)的活性较小,其IC50约为前两者的4倍。蛋白提取物清除O2–·和·OH的活性大小相近,而清除H2O2的活性明显小于前两者,IC50约为前两者的9倍。多糖提取物清除.OH的活性明显大于清除O2–·和H2O2的活性,其IC50约为O2–·的1/22,约为H2O2的1/65。结果表明,杨桃果具有清除O2–·、·OH和H2O2的作用,不同提取物对这些活性氧自由基的清除能力有所不同。     

EMS诱导红阳猕猴桃耐寒突变体的筛选及转录组分析

红阳猕猴桃(Actinidia chinensis var. chinensis ‘Hongyang'')具有较高的经济价值和营养价值,以及较好的市场开发前景。但近年红阳猕猴桃产区如云南、四川等多地多次遭遇倒春寒等极端天气,其抗寒性差的缺点限制了发展空间。该研究通过在组培的过程中使用甲基磺酸乙酯(EMS)诱导红阳猕猴桃突变体,进而筛选出耐寒突变体,并通过转录组分析探究其胁迫响应机制。该研究以红阳猕猴桃叶片为实验材料,在组培时(4.4 g·L^-1 MS+4.5 g·L^-1 琼脂+1.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA+15 g·L^-1 蔗糖+0.01～0.10 g·L^-1 EMS)利用EMS诱导技术诱导突变体,并在低温环境下筛选出耐寒突变体。选出的耐寒突变体和正常红阳猕猴桃组培苗先进行4 ℃ 12 h寒胁迫处理,再进行转录组测序分析。结果表明:(1)通过初步的表型鉴定,当EMS处理浓度为0.06 g·L^-1时诱导的部分突变体具有一定的耐寒性;(2)在转录组测序数据GO功能富集分析中,富集条目最多的是生物学过程;(3)利用KEGG数据库分析时,共筛选到21个差异表达基因在15条通路中得到注释且均为上调表达,其中内质网中的蛋白质加工通路(ath04141)中富集的差异表达基因最多,并且该通路内的sHSF、Hsp70和NEF可能与耐寒机制调控有关。综上研究结果为红阳猕猴桃耐寒种质资源的研究与利用提供了材料基础及理论依据。     

BNP、NT-proBNP与心衰进程的诊断价值和相关性研究

目的:检测心力衰竭患者血清脑钠肽(BNP)及N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平,分析其与心功能的相关性以及对心力衰竭的诊断价值。方法:选取我科治疗的慢性心衰患者58例并按照NYHA心功能分级,比较不同心功能分级的患者血清BNP、NT-proBNP的水平及其与射血分数等指标的相关性,并分析BNP与NT-proBNP的诊断价值。结果:①各心功能分级间采用单因素方差分析发现,BNP、NT-proBNP随心功能分级增加而增加(P<0.05),不同心功能分级的组间比较发现,除III级与IV级BNP、NT-proBNP、LVEF、6min步行距离差异不明显(P>0.05),其余组间比较均具有显著性差异(P<0.05)。②经比较发现,BNP、NT-proBNP均与LVEF、6min步行距离呈负相关,而与左室舒张末期内径、左室收缩末期内径呈正相关。③NT-proBNP诊断效力高于BNP。结论:血清BNP和NT-proBNP可作为评估左心室功能不全和左心室结构改变的临床指标。     

双氯芬酸钠与塞来昔布治疗类风湿关节炎的疗效及对心血管的影响研究

目的：探讨双氯芬酸钠和塞来昔布治疗类风湿关节炎的临床疗效及用药安全性。方法：将我院2011 年1 月-2012 年1 月门诊收治的98 例类风湿性关节炎患者随机分为对照组和观察组,每组49 例。对照组给予双氯芬酸钠治疗,观察组给予塞来昔布治疗,观察两组临床治疗效果及心血管不良事件的发生情况。结果：观察组总有效率为91.84%显著高于对照组的75.51%,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;观察组ESR及CRP 分别为（110.65± 7.28）mm/h 和（10.42± 0.98）mg/L显著低于治疗前和对照组,比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;观察组心血管不良事件发生率为8.16%显著低于对照组的20.41%,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：塞来昔布治疗类风湿关节炎具有较好的临床疗效,可有效改善患者疼痛、僵硬或功能受限等症状,且心血管不良事件发生率低,值得临床进一步推广和应用。     

青霉素和苯巴比妥钠对小鼠全脑切片积聚~3H-GABA的影响

本文应用同位素示踪、脑片离体培育和侧脑室注射的方法,在体外和体内研究了惊厥剂青霉素和抗惊厥剂苯巴比妥钠对小白鼠全脑切片积聚~3H-GABA的影响。结果表明:(1)在含6.70—13.40×10~(-4)mol/L的苄青霉素钾(PG)100μl或19.60—39.20×10~(-4)mol/L的苯巴比妥钠(PhB)50μl的培育液(2ml)中,小鼠全脑切片对~3H-GABA的积聚作用明显降低(P<0.05)。6.70×10~(-4)mol/L的PG100μl和39.20×10~(-4)mol/L的PhB50μl同时注入培育液(2ml)时,脑片对~3H-GABA的积聚比PG单独试验时稍有升高。(2 )小鼠侧脑室注射20μl的 3.35×10~(-2)mol/L的PG可引起强烈的惊厥,脑片上的~3H-GABA积聚减少(P>0.05);脑室内注射10μl的3.88×10~(-2)mol/L的PhB能抗惊厥,也使~3H-GABA在脑片上的积聚减少(P>0.05);脑室内同时注射PG和PhB,使~3H-GABA在脑片上的积聚恢复正常。以上结果提示:青霉素可通过竞争突触后膜和神经末梢上的GABA受体,阻断GA-BA的突触后抑制效应及抑制GABA释放,显示惊厥作用;苯巴比妥钠也可和突触后膜上的GABA受体结合,产生GABA样作用或激活GABA受体,起抗惊厥作用。     

应用SDS—PAGE显示小分子多肽技术的探讨

为探讨显示小分子多肽技术,应用SDS－PAGE寻找更简单,快捷的分析小分子多肽的方法。采用8％,T,3％C的丙烯酰胺浓缩胶和含6mol/L脲（或含24％的甘油）的16％T,6％C的丙烯酰胺分离胶 的双层不连续SDS－PAGE和三羟基甘氨酸电泳缓冲液显示蛋白分子量标准（2．512－16．949KD）和待测样品,并对蛋白分子量标准在这两种分离胶中进行了回归分析。结果表明在这两种条件下均能显示分子量小至2．512KD的多肽;多肽样品在含脲和在含甘油的2L－T－SDS－PAGE中均有较好的显带,蛋白分子量标准的直线回归系数分别为r=-0.966和r=-0.964,它们是显示小分子多肽和估测其相对分 子质量及对多肽分子进行进一步分析和更为简便易行的方法。     

影响豌豆Rubisco组装的因子及其作用机制

将新鲜制备的不含Rubisco的豌豆叶片低分子量（LMW）蛋白组分在离体条件下室温保温48h后,经ND－PAGE分析发现,ATP和Mg^2 是组装的必需条件。随着Mg^2 浓度的增加,组装成的Rubisco量逐渐增加,直至其浓度到2．5mmol/L后达到平衡。K^ 对组装有抑制作用,抑制程度随着K^ 浓度增加逐渐增强,当K^ 浓度为5mmol/L时组装被抑制56％,当K^ 浓度达到40mmol/L时,组装被抑制高达90％以上;但同样浓度的Na^ 则没有抑制作用。另外,以羟自由基对豌豆LMW蛋白组分中的大亚基进行降解处理,对大亚基专一性降解肽谱与对全酶中和相同,也能产生37kD的降解肽段,而且,预先经ATP和Mg^2 处理的样品,LMW组分中37kD的大亚基降解条带会消失,而在20－30kD位置附近产生新的降解条带;而K^ 预处理同样能够产生20－30kD大亚基的降解条带,但其37kD的大亚基降解条带没有消失,这说明K^ 对组装的抑制作用可能是通过与组装中间体结构后产生不利于组装的构象变化实现的。     

羟自由基、γ射线和重离子束致死效应的比较

以集落法测存活率、用双链断裂模型分析实验数据,比较研究了羟自由基、γ射线和125．5keV/μm碳离子束对B16细胞和V79细胞的致死效应。结果表明：三种处理对细胞都有明显的致死作用,剂量越大,效果越明显;重离子束的致效效应比γ射线强,而且对抗常规辐射的黑色素瘤也有效,证明了重离子治癌的优势;羟自由基与DNA的作用没有一次击中的成分,碳离子束则以一次击中为主,γ射线介于两者之间,两种细胞对羧自由基的敏感性与对电脑辐射的敏感不同,揭示电离辐射的间接作用不是简单的自由基行为。     

锌_7-金属硫蛋白与镉_7-金属硫蛋白抗羟自由基保护线粒体效应

制备了Ｚｎ７－与Ｃｄ７－金属硫蛋白。分离出大鼠心肌线粒体。用电子自旋共振自旋标记方法测定线粒体膜脂流动性及膜蛋白构象、运动性。分析了线粒体Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性及４５Ｃａ摄入。羟自由基损伤使线粒体膜脂流动性下降,膜蛋白构象改变及运动性降低,线粒体Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性降低及４５Ｃａ摄入活性下降。Ｚｎ７－金属硫蛋白与Ｃｄ７－金属硫蛋白均有抗羟自由基、保护心肌线粒体的作用,且Ｚｎ７－金属硫蛋白的作用比Ｃｄ７－金属硫蛋白的作用更明显。原因是去金属蛋白对Ｃｄ２＋的亲和力比对Ｚｎ２＋高１００００倍,因而在近ｐＨ中性的环境中,Ｚｎ７－金属硫蛋白将释放更多Ｚｎ２＋,并暴露较多的还原态巯基。     

水稻诱导结瘤和根瘤菌导人

一定的水稻品种以无菌水培和砂培,待秧苗长到一定时期,用一定浓度的合成植物生长激素2,4——二氯苯氧乙酸(2,4—D)或二甲四氯钠处理水稻根系,并接种田菁茎瘤根瘤菌(Azorhizobium Caulinodans)处理后10～15天内水稻根系产生瘤状结构(类根瘤),20天后水稻类根瘤经电镜检查,发现根瘤菌已侵入水稻根系,以及根瘤菌在水稻类根瘤内转化形成的类菌体。不同的水稻品种和不同浓度的2,4—D或二甲四氯钠处理,植株的生长状况和根系的结瘤状况各不相同。在参试的11个水稻品种中以湘晚籼4号等四个品种结瘤状况较好。水稻水培2,4—D处理浓度以0.5ppm,水稻砂培2,4—D处理浓度以1ppm、二甲四氯钠以2ppm较为适宜。