缝隙连接与动脉粥样硬化

缝隙连接是连接相邻两个细胞间的重要通道,其功能和数目的改变与动脉粥样硬化的发生密切相关.构成缝隙连接的亚单位称为连接蛋白,其在动脉粥样硬化的发生中起到至关重要的作用.因此,以细胞问的缝隙连接为靶点的治疗可能会对动脉粥样硬化的治疗提供新思路.     

神经组织缝隙连接

近年来神经组织中缝隙连接的分布和功能研究取得了一些显著进展。分子生物学方法的应用促进了ＧＪ结构,亚型及生物物理特性的揭示,染料偶联实验和Ｃａ＾２＋成像技术为ＧＪ的功能研究提供了直观有效的手段。ＧＪ的调控涉及ＧＪ的表达,导通性的改变等环节。ＧＪ胞间通讯的基本形式是交换第二信使和电偶联。     

新诊断2型糖尿病患者血清Pannexin-1、Apelin、RBP4、VEGF水平与糖脂代谢和胰岛素抵抗的关系研究

摘要 目的：探讨新诊断2型糖尿病患者血清缝隙连接蛋白-1(Pannexin-1)、爱帕琳肽（Apelin）、视黄醇结合蛋白4(RBP4)、血管内皮生长因子（VEGF）水平与糖脂代谢和胰岛素抵抗的关系。方法：选择2018年2月至2020年2月我院诊治的120例新诊断2型糖尿病患者作为糖尿病组,选择同期在我院进行体检的120例健康者作为对照组。检测所有受试者甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶(ALT)、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）水平、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素(FINS)、Pannexin-1、Apelin、RBP4、VEGF水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感性指数（ISI）和胰岛?茁细胞功能指数(HOMA-β)。分析Pannexin-1、Apelin、RBP4、VEGF水平与糖脂代谢和胰岛素抵抗相关指标的关系,分析影响上述指标表达的相关因素。结果：与对照组相比,糖尿病组体质量指数（BMI）、TG、TC、FPG、FINS、Pannexin-1、Apelin、RBP4、VEGF水平,HOMA-IR明显升高（P<0.05）,ISI和HOMA-β明显下降（P<0.05）。新诊断2型糖尿病患者血清Pannexin-1、Apelin、RBP4、VEGF水平与ISI和HOMA-β均呈负相关（P<0.05）,与BMI、TG、TC、FPG、FINS、HOMA-IR均呈正相关（P<0.05）。TG与Pannexin-1表达联系密切（β=0.006,P<0.05）,ISI和HOMA-IR与Apelin表达联系密切（β=-6.673、0.049,P<0.05）,FPG和TC与RBP4表达联系密切（β=22.309、0.506,P<0.05）,HOMA-IR与VEGF表达联系密切（β=0.574,P<0.05）。结论：新诊断2型糖尿病患者血清Pannexin-1、Apelin、RBP4、VEGF水平异常升高,并参与新诊断2型糖尿病患者的糖脂代谢和胰岛素抵抗,在2型糖尿病的诊断和预防中有一定临床价值。     

心肌细胞缝隙连接重塑与心律失常

缝隙连接是相邻心肌细胞间电、化学偶联的通道,亦是心室肌成为功能性合胞体的重要结构.心肌有缝隙连接蛋白(connexin,CX) 40、43与45的表达,心室肌主要表达CX43.CX43形成的缝隙连接大部分呈点状分布于闰盘部位,心肌细胞膜侧面分布极少.心肌缺血-再灌注、肥厚、衰竭、高胆同醇与糖尿病条件下,心肌细胞缝隙连接...     

综述与专论: 胶质细胞病——伴皮层下囊肿的巨脑性脑白质病致病机制研究进展

伴皮层下囊肿的巨脑性脑白质病（MLC）是MLC1或GlialCAM突变导致的星形胶质细胞功能障碍的中枢神经系统髓鞘变性疾病,以星形胶质细胞肿胀与髓鞘囊泡形成为特征性病理改变。MLC/GlialCAM与ClC-2共定位于星形胶质细胞终足处,既往研究发现MLC1/GlialCAM突变后影响ClC-2通道的电容传导性,导致星形胶质细胞的水离子稳态失衡参与MLC的发病,但在GlialCAM纯合敲除的小鼠中,通过与选择性开放Clc-2通道的转基因小鼠杂交并不能纠正小鼠表型,提示有其他因素共同参与了MLC的发生发展。最近研究表明,突变后的MLC1通过促进Connexin43的内化,减少其在细胞膜处形成缝隙连接,影响细胞间通讯效率,从而导致水肿形成和髓鞘囊泡形成,进一步导致MLC的发生。这些研究提示,少突胶质细胞、星形胶质细胞及缝隙连接蛋白等构成的胶质细胞合胞体的功能异常是MLC致病机制的研究方向。     

心肌肥厚大鼠心肌Cx43的表达及法舒地尔的干预作用

目的：研究腹主动脉缩窄大鼠心肌缝隙连接蛋白Cx43的变化及法舒地尔的干预作用。方法：腹主动脉缩窄建立心肌肥厚大鼠模型,随机分假手术组,腹主动脉缩窄组、腹主动脉缩窄＋10mg／kg法舒地尔（ip,每天1次,8周）组、腹主动脉缩窄＋40mg／kg（ip,每天1次,8周）。病理切片观察心肌组织学变化;免疫组化法检测心肌Cx43蛋白表达。结果：模型组大鼠心肌细胞排列紊乱,肥大,间隙增宽,Cx43蛋白表达量明显低于正常组;Fas治疗后,死亡率下降,cx43蛋白表达量高于模型组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：Fas可能通过调高Cx43蛋白表达,治疗大鼠心肌肥厚。     

初生与成年牦牛心肌的组织学结构比较

为探究牦牛心肌发育过程中组织学结构的变化,采用组织学、组织化学和免疫组织化学方法对初生和成年牦牛心肌的组织学结构、心钠素（ANP）和缝隙连接蛋白43（Cx43）的表达情况进行了观察。结果显示,初生牦牛心肌细胞数量少且细短,闰盘为直线型或V型,心肌细胞间以Ⅲ型胶原纤维为主,Ⅰ型胶原纤维较少;成年牦牛心肌细胞粗长,其数量是初生牦牛的2倍,闰盘呈竹节样吻合或阶梯状,心肌细胞间以Ⅰ型胶原纤维为主。初生和成年牦牛,ANP在心房肌细胞中均表达强烈,且右心房表达量显著高于左心房,心室肌细胞中不表达。ANP在普肯耶纤维中有少量表达。初生牦牛心房肌细胞ANP表达量高于成年牦牛。在心肌细胞膜和胞质内,初生牦牛Cx43表达强于成年牦牛,但在闰盘内,成年牦牛Cx43表达强于初生牦牛。Cx43在初生和成年牦牛的普肯耶纤维中均呈膜阳性。结果提示,初生与成年牦牛相比,成年牦牛的心肌细胞变粗长且数量增多,ANP在心房肌表达减弱,Cx43在闰盘表达更显著,说明成年牦牛较初生牦牛适应循环变化的代偿能力呈进行性减弱;细胞间牢固性增加,有助于实现心肌收缩信号的迅速传导。     

强直电刺激嗅内皮质-海马环路诱发CA1神经元的癫痫同步性膜电位振荡行为

目的和方法 :4 0 0～ 5 0 0 μm大鼠水平脑切片含有封闭的EC 海马环路。强直电刺激 (60Hz ,2s)海马Schaeffer侧支诱发癫痫放电 ,全细胞记录CA1胞体层单个神经元电活动 ,同步记录相应树突区细胞外场电位 ,探讨单个神经元膜电位振荡特性与细胞外癫痫电活动之间的关系。结果 :①强直电刺激诱发CA1神经元膜电位后放性振荡行为呈宽频特征 (3～ 10 0Hz)。以θ节律多见 ,跟随在刺激引起的膜电位去极化或超极化偏移 (paroxysmaldepolarizingorhyperpolaringshift,PDSorPHS)之后 ,振荡波的上升支和下降支分别由膜电位去极化 超极化或超极化 去极化成分构成 ;②逐渐增强的IPSP构成了膜电位振荡的起搏成分 ,继而反弹形成锋电位和阈下振荡 ,与细胞外癫痫样电活动同步 ,并促成癫痫放电由紧张性向阵挛性形式转变 ;③发现了电偶联电位 (spikelets)以及细胞之间的染料偶联现象。结论 :单个神经元作为振荡器可以启动群体神经元超同步化癫痫样电活动 ;缝隙连接可能参与了膜电位振荡的启动与场电位癫痫样电活动的同步作用。     

Ⅱ型糖尿病对小鼠肝脏Cx43蛋白表达及肝纤维化的影响

采用高脂饲料喂养结合链脲佐菌素(STZ)诱导法,建立Ⅱ型糖尿病小鼠动物模型。模型成功建立8周后,检测小鼠血清中葡萄糖、糖化血清蛋白(GSP)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)的含量;以苏木精-伊红染色和油红O染色分别观察肝脏组织病理学变化和脂质沉积情况;以Masson染色结合α平滑肌动蛋白(α-SMA)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的免疫组织化学观察肝脏纤维化程度;以蛋白免疫印迹、免疫组化和实时荧光定量PCR分别检测肝脏缝隙连接蛋白43(Cx43)和基因表达。结果表明：与正常组相比,模型组小鼠的血糖、糖化血清蛋白显著升高;肝脏肿大色泽不均,血清AST、ALT、AKP水平显著升高;肝脏组织形态上有所改变,脂质沉积增加;胶原纤维分布显著增加,并且Ⅱ型糖尿病导致了α-SMA表达的增加,E-cadherin表达显著降低;肝组织Cx43表达显著增加。研究结果表明：长期的高血糖易导致小鼠肝损伤和纤维化,从而诱发糖尿病肝病,其肝脏纤维化的机制可能与高血糖诱导Cx43的表达密切有关。     

连接蛋白及细胞间连接通讯的调控

由连接蛋白构成的缝隙连接是细胞间直接进行连接通讯的分子基础。连接蛋白是有十余个成员组成的较保守的大家族,具有共同的基因结构及４跨膜的分子结构,分子间的不同组合影响着缝隙连接的通透性及电传导性。本文还综述了细胞间连接通讯受低ｐＨ值、电压、膜流动性和磷酸化的调控的可能机制。