绵羊季节性繁殖分子机制及休情季节诱导绵羊发情配种技术

季节性繁殖是限制绵羊生产效率的重要因素。季节性繁殖分子机制的深入解析是提高绵羊休情季节发情配种率的前提。研究发现,长光照与短光照条件下绵羊季节性繁殖通路中出现一系列相关信号分子变化及细胞形态学改变。基于季节性繁殖分子机制,研究者已研发出若干休情季节诱导母羊发情配种的技术或方法。本文从季节性繁殖分子机制方面总结了上述光照信号分子及垂体和下丘脑组织中细胞形态学的变化特征,及休情季节诱导母羊发情配种技术的应用效果及其利弊,并提出解决问题的关键在于寻找能够提高休情季节配种率的绿色高效的新型技术。     

4x菜心×2x芥蓝的胚胎发育观察及离体培养获得异源三倍体

对4x菜心×2x芥蓝和4x芥蓝×2x菜心的授粉受精及胚胎发育进行了观察,并对其杂种幼胚进行了离体培养.结果表明,4x菜心×2x芥蓝和4x芥蓝×2x菜心的授粉受精均能完成,但胚胎发育受阻,前者在授粉后11d左右(球形胚时期)胚胎败育,后者在授粉后5d左右(几个细胞的原胚时期)胚囊便干缩坏死. 经子房离体培养,4x菜心×2x芥蓝获得了杂种植株,适宜的培养时期是授粉后6～8d,而4x芥蓝×2x菜心未能培养成功.经形态学观察和核型分析,杂种植株在花色、花大小等方面具双亲特征,染色体数为2n=3x=29,含有菜心的2个染色体组(AA)和芥蓝的1个染色体组(C),为异源三倍体(AAC).     

胚胎肝干细胞的研究进展

近年来的研究表明在胚胎肝脏中存在大量的肝干细胞,它们在肝脏的发育中起着重要作用,并且受到各种时序性表达基因的调控。几个研究组采用不同的方法,分别从小鼠、大鼠和灵长类动物的胚胎肝脏分离并鉴定了具有双潜能的肝干细胞。就胚胎肝脏的发育、调控机制以及胚胎肝干细胞的分离、鉴定等方面的研究进展作一综述,并对胚胎肝干细胞的应用前景和今后的研究方向作了展望。     

More new lines of human parthenogenetic embryonic stem cells

Two papers [1, 2] published in a recent issue of Cell Research describe the derivation of pluripotent human embryonic stem （hES）-like cell lines from parthenogeneic blastocysts.     

小鼠胚胎Sry基因的RNA干涉研究

为了研究Sry基因的调控网络,采用siRNA技术使Sry基因沉默,探讨了有效沉默Sry基因的途径和最佳条件.设计、合成针对小鼠Sry基因的发夹状寡核苷酸链,退火后连入真核表达载体pSilencer4.1-CMVneovector,构建以小鼠Sry基因为靶点的siRNA干涉载体pSilencer4.1/Sry217及pSilencer4.1/Sry565,通过尾静脉注射法将载体质粒导入妊娠小鼠体内,于小鼠妊娠第11.5天,即11.5dpc(dayspostcoitum,性交后天数)取出胚胎,采用双重PCR法对胚胎进行性别鉴定,鉴定为雄性的胚胎采用半定量RT-PCR法检测Sry基因的表达量,研究不同干扰序列、不同注射时间及注射剂量对Sry基因表达量的影响.研究结果,确定了质粒的最佳注射时间为9.5dpc,注射剂量为20μg,注射干扰质粒pSilencer4.1/Sry565对Sry基因的抑制效率达85%左右.结果表明,siRNA可以显著抑制雄性胚胎Sry基因的表达.     

应用激光扫描共聚焦显微镜研究卵母细胞和早期胚胎的细胞骨架

介绍了应用激光扫描共聚焦显微镜, 结合免疫荧光技术研究卵母细胞和早期胚胎细胞骨架的方法.观察了β-微管蛋白、γ-微管蛋白、微丝以及染色体在小鼠卵母细胞和早期胚胎中的分布和形态, 讨论了实验过程中的注意事项以及实验结果的分析和处理方法.     

威宁绵羊GHR基因克隆及组织表达

本试验以6月龄、1周岁和2周岁的威宁绵羊公母羊为研究对象,利用分子手段对威宁绵羊GHR基因编码区序列进行克隆,并进行生物信息学分析,此外,本试验同时采用实时荧光定量PCR的手段对GHR基因在威宁绵羊不同性别及不同生长阶段心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及背最长肌6个组织中mRNA水平上的表达规律进行探究,结果显示:威宁绵羊GHR基因CDS区序列长度为1 905 bp,发现2个SNP位点。GHR基因在威宁绵羊各组织均有不同程度的表达,在不同性别、不同生长阶段相同组织中的表达具有一定的显著性差异。     

绒山羊和绵羊KAP6.1基因CDS区克隆与分析

目的:克隆绒山羊、绵羊KAP6.1基因CDS全序列,分析序列特征和蛋白结构。方法:RT-PCR法克隆基因并测序,生物信息学软件分析序列特征和结构。结果:绒山羊、绵羊KAP6.1基因CDS序列全长252 bp,编码83个氨基酸;绒山羊、绵羊KAP6.1蛋白在基本理化特性、二级结构以及空间三维结构上的差异较小。结论:绒山羊与绵羊KAP6.1蛋白结构上的差异将会在一定程度上影响其功能。