TRV病毒诱导大豆基因沉默体系优化及应用

病毒诱导的基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）技术已广泛用于植物基因功能研究，以烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus, TRV）为载体的沉默体系介导大豆基因沉默效率有待明确，采用无缝克隆技术构建TRV-VIGS沉默体系，探索不同接种方法对大豆靶基因在不同组织间的沉默效率，为大豆基因功能研究提供依据。以八氢番茄红素去饱和酶（phytoene desaturase, GmPDS）及泛素连接酶（GmATL3）基因为靶基因，将含有pTRV1和重组载体菌液采用注射、灌根（agroinoculation）、注射与灌根相结合3种方法分别接种大豆中黄13，接种28 d观察沉默表型现象，并使用RT-qPCR技术检测根部与叶部基因相对表达量，明确不同方法沉默效果。注射接种的大豆叶边缘及叶内出现黄化褪绿，灌根接种与注射加灌根接种的叶片表面出现褪绿斑点及褶皱褪绿表型。RT-qPCR结果表明，3种接种方法对沉默GmPDS效果接近100%；注射接种对GmATL3的沉默效率在叶部为80%-95%，根部为40%-60%；灌根与注射加灌根接种，根部沉默效率为7...     

外来入侵植物肿柄菊在云南的扩散风险研究

预测外来入侵植物的潜在入侵范围以及对不同环境的适应性,能够为外来植物入侵提供预警和预防.该文通过实地调查肿柄菊(Tithonia diversifolia)在云南的入侵范围,以及收集世界其他地区分布点,结合12个关键环境变量,利用MaxEnt模型对肿柄菊适生区范围和环境限制因子进行分析.结果表明:在世界范围适生区分布格...     

昆明地区菊苗上优势种害虫的发生规律

为明确菊苗上优势种害虫的发生规律及季节动态，采用五点取样法，利用粘虫板对2018—2020年温室种植的菊苗上优势种害虫进行调查，利用四分位法对优势种害虫发生期进行划分，同时分析了菊苗上优势种害虫的发生规律、季节动态及时间生态位。结果表明：西花蓟马在一年大部分时间均可危害菊苗，主要发生期集中在4—8月，3年的发生高峰分别在5月、6月和7月，此时西花蓟马的种群数量分别为636、1411和256头·板^-1,西花蓟马的生态位宽度呈现逐年降低的趋势；菊潜叶蝇的生态位宽度较小，每年的危害主要集中在1—6月，主要发生期在3—6月，3年的发生高峰均在3月，此时菊潜叶蝇的种群数量可达256、239和124头·板^-1;桃蚜和白粉虱在3年的生态位宽度较大，说明桃蚜和白粉虱在菊苗上的发生时间最长，主要发生期均在2—4月，发生高峰在全年内不固定。4种害虫间的生态位重叠指数相似，说明4种害虫在发生的时间维度上具有相似性且存在竞争关系。因此，在防治菊苗优势种害虫时应以西花蓟马和菊潜叶蝇为主，1—6月主要防治菊潜叶蝇，3—10月主要防治西花蓟马。     

营林技术措施防治南京裂爪螨试验

采用疏伐和施药肥、施肥营林技术措施防治南京裂爪螨试验表明，当立竹度从3150根/hm^2疏伐到2700根/hm^2时，丝巢密度下降了25.0％，重度受害株下降了60.9％。施药肥5个月防治效果达到83.1％和92.2％，施肥达49.2％。施药肥、施肥后翌年毛竹产量大大提高，新竹产量分别提高33.5％和26.8％，春笋产量分别提高103.0％和118.2％，产值分别增加1，457元/hm^2和1，256元/hm^2，投入产出比为1：2。疏伐后施药肥效益更显，投入产出比为1：5。     

新疆外来入侵杂草豚草属LAMP快速检测技术的建立

【目的】开发外来入侵生物三裂叶豚草和豚草不同生育期、不同部位的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术,以达到田间快速、准确和高效识别的目的。【方法】以SYBR Green Ⅰ为指示剂,分别针对三裂叶豚草和豚草不同发育阶段(幼苗期、生长期、种子期)开展LAMP技术开发。【结果】特异性验证结果显示,所检测杂草的LAMP产物均呈阳性(产生白色沉淀),而与其对照的其他2种杂草的LAMP产物均为阴性(无白色沉淀)。灵敏度检测结果显示,该体系的DNA最低检测限为10^-10 ng·μL^-1,比常规聚合酶链式反应灵敏度高。【结论】本研究建立的LAMP检测体系能有效应用于三裂叶豚草和豚草样本的快速检测,为其快速、高效识别提供技术支撑。     

论埃迪卡拉纪微体球状化石Schizofusa与Leiosphaeridia的关系

埃迪卡拉纪是新元古代最后一个纪,是新元古代雪球地球事件与寒武纪生命大爆发之间地质历史最重要的转折时期,在研究地球早期生命演化方面具有举足轻重的地位。我国华南三峡地区埃迪卡拉系陡山沱组中下部的地层中,发现了大量的以具刺疑源类为主的微体化石,其中有两个形态简单、分布广泛的类型——分别是以光面、球状为特征的Leiosphaeridia和光面囊胞状、具开裂特征的Schizofusa。本文通过对这两种化石材料的细致观察与统计,对两者间的亲缘关系进行了详细探讨,认为Schizofusa开裂之前应为光面球体,即Schizofusa是某些光面球的发展演化后期阶段。     

黑心菊(Rudbeckia hirta)对陇东黄土高原油污土壤植物修复效应

为了揭示黑心菊(Rudbeckia hirta)对陇东黄土高原油污土壤的植物修复效应，在长庆油田公司实施为期5个月的场地修复试验，测定了不同浓度油污土壤胁迫时黑心菊土壤总石油烃(total petroleum hydrocarbons, TPH)去除率、生长指标、土壤理化性质和酶活性以及微生物群落结构的变化。结果显示：(1)3%、6%和8%油污土壤中黑心菊根区土壤TPH去除率分别为73.44%、81.28%和36.80%;(2)油污浓度≤6%土壤对黑心菊株高、根长、地下部干重、根活力和根冠比有明显促进作用，但当浓度≥8%时则产生了显著抑制作用(P<0.05);(3)与对照组(CK)相比，黑心菊在有效增加根区土壤碱解氮和速效磷含量以及土壤脱氢酶、多酚氧化酶、脲酶和碱性磷酸酶活性的同时显著减低了土壤pH(P<0.05);(4)微生物群落结构的LEfSe组间差异分析结果表明，Idiomarina属、嗜盐单胞菌属(Halomonas)、盐厌氧菌属(Halanaerobium)、Balneolaceae属和Fodinicurvataceae属、纤细单胞菌属(Cellulomonas)...     

基于烟草脆裂病毒构建同时表达2种外源蛋白的载体及其应用

目的 构建在整个寄主植物中能同时表达两个非融合蛋白的病毒载体。方法 以烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus，TRV）基因组RNA2的农杆菌侵染性克隆pYL156为材料，缺失TRV RNA2的2b基因5"端279 bp并将其起始密码子ATG改变为AGG、同时引入豌豆早枯病毒（pea early-browning virus，PEBV）外壳蛋白（coat protein，cp）基因启动子，获得pTRV2e²载体；在pTRV2e²载体的2b和PEBV的cp启动子下游插入不同的外源基因，测定病毒TRVe²表达外源蛋白的能力、携带外源基因后重组病毒的稳定性以及分析蛋白质的生物学功能。结果 病毒TRVe²能快速同时表达2个非融合的外源蛋白，且至少能表达70 ku外源蛋白，且该病毒携带~2.0 kb外源基因能稳定存活于寄主植物中；病毒TRVe²可用于分析蛋白质的生物学功能以及2个蛋白质间的相互作用。结论 本文构建的重组病毒TRVe²为快速有效地表达2个外源蛋白以及分析2个蛋白质间的相互作用提供技术工具。