猕猴结核分枝杆菌PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立猕猴结核分枝杆菌PCR快速检测方法。方法根据GenBank中报道的人型结核分枝杆菌标准株H37RV全基因序列,针对其中致病性结核分枝杆菌所特有的保守区域ESAT-6设计一对引物进行TouchdownPCR反应,利用此方法对100份野生来源猕猴全血标本进行检测,并与传统的PPD实验和咽拭子抗酸染色实验结果作比对。结果抽取33份野生来源猕猴的外周血,提取DNA进行扩增,扩增片段经纯化、回收克隆测序后用BLAST软件进行同源性对比,与GenBank中报道的序列基本相同,检测标本中有4份（4／33）为阳性,其中3份（3／33）标本与结核菌素试验和咽拭子抗酸染色试验结果相符合。结论建立了从猴全血中直接检测猴结核分枝杆菌DNA的TouchdownPCR方法,具有敏感性和特异性高,且简便的优点。     

结核分枝杆菌热休克蛋白Hsp16.3及其合成肽在小鼠体内诱导的免疫应答

目的比较结核分枝杆菌Hsp16.3和Hsp16.3合成肽在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法80只BALB/c小鼠随机分5组共免疫3次,间隔2周。分别于0、2、4、6、8周采集血液,ELISA法检测在抗原Hsp16.3和Hsp16.3合成肽包被时血清中的抗体浓度及第8周时血清中的抗体滴度。末次免疫完成后4周,取每组8只免疫小鼠分离脾淋巴细胞,用Hsp16.3和Hsp16.3合成肽分别刺激后,MTT法测定脾淋巴细胞的增殖指数,     

结核分枝杆菌感染的动物模型

复制结核分枝杆菌感染的动物模型是进行结核病研究的基础。本文分别对小鼠、豚鼠、兔和非人灵长类动物结核模型的特点及其应用进行综述,并指出慢性持续性感染模型是结核动物模型研究的重点。     

现行BCG为基础的结核疫苗

尽管1882年Robert Koch就发现了结核病(TB)的致病因子结核分枝杆菌,TB目前仍然是一个主要的世界性健康问题。每年全球死亡数介于160万至220万之间,此数量取决于50万患HIV和结核菌复合感染的个体是否被包括在HIV／AIDS或TB总数内。这种情况还由于部分病人不完全遵守化疗规则造成结核菌的多重抗药性病例增加而恶化。每年有5500万人成为新的感染,使     

脑干结核瘤1 例报道

编者按:该特殊病例报道仅供读者参考. 脑结核瘤是结核分枝杆菌(简称结核杆菌)侵犯脑实质形成的肉芽肿性病变,多见于儿童、青少年及免疫缺陷的成人.目前在我国占同期颅内占位病变的1%～2.5%,发达国家约占0.2%.以单发者常见,约占80%.多见于大脑半球及小脑,脑干病变少见.现报道1例脑干结核瘤患者,最初诊断为脑干胶质瘤,因病变位置位于生命中枢,无法手术,后经感染科临床诊断为颅内结核性肉芽肿,通过经验性抗结核治疗病情得到控制.     

三磷酸腺苷发光法快速检测结核分枝杆菌药敏技术的研究

目的 建立一种利用三磷酸腺苷( ATP) 与荧光素酶反应测定结核分枝杆菌( 简称结核杆菌) 释放的ATP 来判断结核杆菌药敏的技术。方法 ATP 生物发光法( 简称ATP 法) 通过裂解液体培养基中的结核杆菌, 释放活菌中的ATP, 加入荧光素酶使之发光以检测结核杆菌的活性。共采用H37Rv 标准株和10 株临床分离菌株, 用ATP 法与BACTEC 3D 法同步平行进行利福平药敏检测, 连续7 d 检测结核杆菌释放的ATP, 观察其生长曲线, 并以此判断对药物的敏感性。结果 在生长5 ～7 d的培养基中ATP法可以检测到敏感菌释放的ATP, 并且显著高于耐药菌所释放的ATP, 通过与BACTEC 3D 法相比确定其判断药敏的临界值, 检测结果与L-J 法及同步平行的BACTEC 3D 法对照组符合率达100% 。结论 ATP法可用于结核杆菌对抗结核药物敏感性的检测, 且因其价格较低, 无放射性元素的存在, 作为一种新型的结核杆菌药敏检测技术具有巨大的临床应用潜力。     

非一线抗结核药物耐药机制及耐药性诊断研究进展

结核病(Tuberculosis, TB)至今仍是世界三大传染疾病之一。2014年,TB导致的死亡人数已经超过HIV。二线抗TB药物是临床治疗耐多药TB(Multidrug-resistant TB, MDR-TB)的主要药物,然而某些MDR-TB患者由于未及时诊断、治疗方案不合理、所处区域医疗条件差等原因,逐渐发展成为广泛耐药TB(Extensively drug-resistant TB, XDR-TB),使治疗更加困难,其死亡率甚至与肺癌接近。目前结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)的耐药性机制研究已经转向非一线药物,如二线、三线和一些新研发的抗TB药物,揭示这些非一线药物的耐药机制对于耐药TB的治疗和新型抗TB药物的研发具有重要意义。本文对目前临床上使用的主要非一线药物的耐药机制研究进行了综述,并对目前常用的TB耐药性诊断方法的优缺点进行了归纳比较。     

分子生物学技术在结核诊断和流行病学研究中的应用

结核是当今世界范围内致残和致死的几个主要传染病之一,每年会导致３００多万人死亡。诊断基础为罗琼氏培养基或选择性培养基培养,金胺Ｏ染色,萋纳氏染色,镜检,需２～８周。这就迫切要求分子生物学技术在结核快速诊断中的应用。本文综述了ＤＮＡ杂交、ＤＮＡ指纹图、脉冲场凝胶电泳和ＰＣＲ在结核诊断和流行病学研究中的应用,同时,评述了用分子生物学技术检查结核耐药基因的适用性     

活动性肺结核密切接触者结核感染情况及随访分析

本文筛查和随访结核密切接触者的潜伏感染情况和发病情况,并分析了相关的影响因素。首先,回顾性分析了2012年3月—2019年8月在无锡市第五人民医院结核科住院的活动性肺结核患者的临床资料,并随访了其中进行过γ干扰素释放试验(interferon-γ release assay, IGRA)的密切接触者。7年共完整随访到39例活动性肺结核患者及其74例密切接触者,74例密切接触者中27例IGRA阳性(36.5%),47例IGRA阴性(63.5%),且IGRA阳性密切接触者中无一例进展为活动性结核。单因素分析结果提示,IGRA阳性密接组和IGRA阴性密接组在吸烟(3/27 vs 0/47,P=0.045)、与结核患者接触时间>5 h/d (22/27 vs 23/47,P=0.007)、同屋居住(23/27 vs 20/47,P=0.001) 3方面的差异具有统计学意义。进一步比较发现,较于IGRA阴性密接组,IGRA阳性密接组接触的活动性肺结核患者痰涂片结核菌的负荷量更高(P=0.019)。多因素分析结果则显示,肺结核患者痰涂片结核菌量能够显著影响密切接触者的IGRA结果,痰结核菌量...