VEGFR-3反馈性抑制巨噬细胞TLR4诱发的炎症反应

当机体受到病原微生物感染时,Toll样受体(TLR)在固有免疫反应中发挥关键调控作用。然而,过度的TLR信号引起的炎症反应将导致组织损伤,甚至内毒素休克等疾病的发生。为了更好地理解TLR4信号稳态机制,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,王红艳实验室研究发现,在细菌感染的巨噬细胞中,血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)和其配体VEGF-C的表达量明显上升。VEGF-C结合并活化VEGFR-3受体后,显著降低巨噬细胞中促炎因子IL-6和TNFα等的分泌。这主要是由于VEGFR-3通过活化PI3K-Akt1通路和上调SOCS1的表达,抑制了巨噬细胞中TLR4-NF-κB信号通路。在严重细菌感染时,VEGFR-3胞外配体结合区域缺失或胞内激酶活性区突变的基因工程小鼠死亡率显著升高。王红艳实验室及其合作者的研究揭示了VEGFR-3在巨噬细胞中反馈调控TLR4-NF-κB通路,为治疗淋巴水肿伴随的感染提供了新策略。     

转运蛋白ABCG1/4 和ABCA1对脑胆固醇的调节作用

脑是富含胆固醇的器官,机体大约有25%的胆固醇集中在脑组织中.ATP结合盒超家族转运蛋白对脑组织中胆固醇的膜外转运和动态平衡起着重要的调节作用.研究发现,ATP结合盒超家族转运蛋白亚体ABCG1、ABCG4和ABCA1在成体脑组织中存在不同程度的表达,一种或多种亚体的缺失可以导致神经退行性病变.然而,ATP结合盒超家族转运蛋白亚体对脑发育过程中脑胆固醇动态变化的调节缺乏相关性的报道.在本研究中,从低胆固醇饮食喂养的C57BL/6J小鼠中获取出生后不同发育时期的脑组织,对ABCG1、ABCG4和ABCA1的mRNA与蛋白质表达水平进行测定,并对脑组织和血清中ATP结合盒超家族转运蛋白的表达水平与胆固醇水平的相关性进行研究.同时,使用ABCG1、ABCG4单一基因敲除鼠和ABCG1、ABCG4双基因敲除鼠,研究ATP结合盒超家族转运蛋白对与胆固醇合成的相关基因表达的影响以及对脑组织胆固醇代谢的调节作用.结果发现,ABCG1、ABCG4和ABCA1在机体多个器官中均有表达,但ABCG1和ABCG4在小鼠脑组织中表达量最高.在脑组织发育过程中,ABCG1和ABCG4mRNA水平呈现明显的表达时效性,小鼠于出生后42天达到峰值,而ABCA1 mRNA的表达水平无明显变化.血清和脑组织中中酯化型胆固醇水平呈双高峰分布,也于出生后42天达到最高.基因敲除鼠模型显示,单一敲除ABCG1或者ABCG4基因对脑组织胆固醇水平无明显影响,而ABCG1和ABCG4基因的同时缺失导致脑胆固醇水平显著升高,并明显降低胆固醇合成相关基因的表达水平.本研究表明,在脑发育成熟过程中,ATP结合盒超家族转运蛋白亚体ABCG1和ABCG4,而非ABCA1,以调节脑胆固醇的膜外转运;ABCG1和ABCG4互补调控脑胆固醇的动态平衡.     

强化饮食结合量化运动处方干预对IFG人群胰岛素抵抗的影响

目的探讨强化饮食结合运动处方干预对空腹血糖受损(IFG)人群胰岛素抵抗的影响。方法采取前瞻性观察研究方法,将2个社区150例IFG人群随机分成对照组和实验组进行为期3年的干预。其中实验组进行强化饮食结合量化运动处方干预,对照组不给予任何干预,观察两组患者各生化指标及胰岛素抵抗指数、胰岛素敏感指数。结果 (1)干预1年后,两组比较,FINS、IR差异无统计学意义(P0.05);TC、TG、HDL、LDL、血压、体重、腰臀比、ISI比较,差异有统计学意义(P0.05)。(2)干预3年后,两组各指标比较,差异均有统计学意义(P0.05),且较第1年有所改善。结论通过长期强化饮食结合量化运动处方干预,可降低IFG人群的胰岛素抵抗。     

蛇伤性溃疡中西医结合高压氧治疗的体会

目的总结中西医结合高压氧治疗蛇伤性溃疡的临床疗效。方法对我院收治的27例蛇伤性溃疡患者在全身支持治疗、伤口局部清创、外用及湿敷中药治疗外,并给予高压氧治疗。结果 27例蛇伤性溃疡患者均治愈出院,治愈率100%。结论中西医结合高压氧治疗蛇伤性溃疡的疗效确切,值得临床借鉴及推广。     

金黄地鼠与白化地鼠遗传生化基因位点概貌

目的建立金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点。方法选用小鼠和大鼠的遗传生化基因位点,采用蛋白质和同工酶醋酸纤维电泳的方法,对金黄地鼠和白化地鼠进行生化基因位点检测。结果建立了金黄地鼠和白化地鼠25个生化基因位点,分析金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点的多态性,为进一步研究金黄地鼠白化突变系的遗传机理奠定基础。结论金黄地鼠生化基因位点存在多态性,白化地鼠与金黄地鼠生化基因位点存在差异。     

Development and Characterization of Fifteen Polymorphic Microsatellites for Extremely Endangered Salamander,Echinotriton chinhaiensis

Echinotriton chinhaiensis is a critically endangered salamander and its distribution is restricted to Ningbo, Zhejiang Province of China. In this study, we developed and characterized fifteen polymorphic microsatellite loci for E. ehinhaiensis from dinucleotide- and tetranucleotide- enriched library. The number of alleles ranges from 4 to 12 with an average of 7.27 alleles per locus. The observed and expected heterozygosities values were from 0.250 to 0.844 and 0.511 to 0.872 with an average value of 0.596 and 0.722; respectively. The polymorphic microsatellite loci described in this paper are useful in the further study on genetic diversity and gene flow, which would be helpful to formulate effective conservation strategies for the E. chinhaiensis.     

肝素结合表皮生长因子抑制剂CRM197 对裸鼠卵巢癌移植瘤 的抑制作用

目的:研究CRM197对裸鼠卵巢癌移植瘤生长的抑制作用探讨其对逆转卵巢癌组织耐药作用及其在卵巢癌治疗中的可行性.方法:用人卵巢癌亲本细胞A2780、耐紫杉醇细胞A2780/Taxol及耐顺铂细胞A2780/DDP分别建立裸鼠卵巢癌移植瘤模型,观察注射CRM197组与阴性对照组裸鼠肿瘤生长情况,免疫组化法测定各组裸鼠肿瘤组织中HB-EGF及P-gp表达情况.结果:HB-EGF及P-gp在各肿瘤组织中不同程度的表达,在注射CRM197的裸鼠肿瘤组织中表达明显降低(P＜0.05),差异具有统计学意义.结论:CRM197通过抑制肝素结合表皮生长因子的信号传导通路激活抑制了裸鼠卵巢癌移植瘤的生长,使裸鼠卵巢癌移植瘤HB-EGF及P-gp表达明显降低.     

过表达apoA-I可缓解BEL-7402细胞中衣霉素诱导的内质网应激

内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ER stress）对非酒精性脂肪性肝病（non alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的发生发展具有十分重要的作用。本实验室前期结果证实,载脂蛋白A1（apolipoprotein A-I,apoA-I）可以通过减少肝细胞脂质堆积来减轻蛋氨酸胆碱缺乏饲料造成的非酒精性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH),但相关机制仍不十分清楚。为探索apoA I对内质网应激的影响,本研究采用衣霉素处理人肝癌BEL-7402细胞。Western印迹结果证实,衣霉素确实可以诱导BEL-7402细胞内质网应激,并具有时间和剂量依赖性。通过将apoA-I表达载体及其对照载体转染到BEL-7402细胞,再加入衣霉素处理,结果显示,与对照组相比,过表达apoA-I的细胞内质网应激标志分子表达明显减轻,同时与脂质合成相关的固醇调节元件结合蛋白1、脂肪酸合成酶和乙酰辅酶A羧化酶1蛋白质水平明显降低。脂质检测结果表明,细胞内甘油三酯和游离胆固醇水平也明显降低（P<0.05）。上述结果表明,apoA-I能够减轻衣霉素引起的内质网应激,可能机制是通过调控固醇调节元件结合蛋白1减少肝细胞的脂质堆积。     

果蝇钙调蛋白和肌球蛋白NINAC相互作用分析

果蝇的视觉信号转导途径是已知的最快的G 蛋白偶联信号通路。这其中涉及到TRP/TRPL通道的开放以及钙离子的内流等一系列反应的形成。NINAC（neither inactivation nor afterpotential C）是一种特异性存在于果蝇感光细胞中的第3类肌球蛋白（Myosin III）,其在终止果蝇的视觉信号转导通路中起着非常重要的作用。NINAC蛋白具有两种亚型：一种是132 kD的蛋白亚型 (p132),另一种则是174 kD的蛋白亚型(p174)。这两种不同的蛋白亚型都具有相同的激酶催化结构域(kinase domain),以及与肌球蛋白相似的马达结构域(motor domain)。但是,它们在C末端却存在着非常大的差异,这其中包括了钙调蛋白结合基序(IQ motif)。NINAC的这两种蛋白亚型在果蝇的感光细胞中的定位以及作用有很大不同,尤其是在与钙调蛋白的相互作用方面。钙调蛋白结合基序与钙调蛋白（CaM）之间的相互作用对于果蝇的视觉信号通路具有重要的意义：NINAC结合钙调蛋白能力的缺失将导致果蝇的视觉传导缺陷。本文通过蛋白共表达的方法,成功表达并纯化得到了不同版本的NINAC与钙调蛋白的蛋白复合物。静态光散射的结果表明,在Ca2+存在情况下,p174蛋白可以结合2个Ca2+-CaM,而p132只结合1个Ca2+-CaM。通过分析型凝胶过滤以及等温量热滴定技术,进一步鉴定了p174及p132的IQ2（第2个钙调蛋白结合基序）序列与Ca2+ CaM的相互作用。通过序列分析及进一步的突变实验发现,p174 IQ2中的3个疏水氨基酸（F1083,F1086 和 L1092）对于钙调蛋白的结合非常重要,并导致了p174与p132蛋白和Ca2+ CaM结合能力的差异。本文的研究提供了NINAC与Ca2+-CaM相互作用的生化机制,将为进一步在果蝇视觉信号通路中深入研究CaM是如何调节NINAC的体内功能实验打下基础。     

白菜和甘蓝基因组转座子表达及其对基因调控的潜在影响

转座子或转座元件是大多数真核生物基因组的主要组成成分。甘蓝(Brassica oleracea)基因组比白菜(B. rapa)大主要是转座子的扩增差异造成的。然而, 这两个芸薹属近缘物种转座子表达水平以及对基因的调控和功能的影响目前还不清楚。文章对白菜和甘蓝叶、根、茎3个器官的转录组数据进行了初步分析。结果显示, 转座子的表达量很低, 转录组reads中有1%来自转座子的转录本; 转座子的表达存在器官差异, 且不同类别和家族的转座子表达量相差很大, 相同类别和同一家族的转座子在白菜和甘蓝基因组中的表达活性也不相同。进一步鉴定到转录读出的LTR反转座子, 其与下游基因距离小于2 kb的有41个, 小于100 bp的有9个, 这些LTR的转录读出很可能通过正义或反义的转录本激活或干扰下游基因的表达。同时, 具有转录读出的intact LTR比solo LTR具有更强的读出活性。通过深入分析转座子的插入位点发现, 白菜基因组中转座子插入基因内部的频率比甘蓝基因组中的高; 与反转座子相比, DNA转座子更偏向于插入或保留在基因的内含子当中。这些结果为认识转座子对其他蛋白编码基因的影响提供了基础。