冠状病毒PLpro蛋白酶对泛素样分子的DUB活性

SARS冠状病毒基因组中非结构基因nsp3编码的木瓜样蛋白酶 (PLpro) 在病毒基因组复制及逃避宿主天然免疫中发挥重要作用,是研发抗病毒药物的重要靶标．SARS冠状病毒PLpro是一种病毒编码的去泛素化酶 (DUB)．为深入研究SARS冠状病毒 PLpro对泛素样分子 (ubiquitin-like protein,UBL) 的DUB特性,本研究构建缺失 PLpro N末端泛素样结构域 (Ubl) 和下游跨膜结构域 (TM) 的PLpro构建体（constructs）,并构建3种缺失蛋白酶催化活性的突变体,检测PLpro对泛素样分子干扰素刺激基因15 (ISG15)及SUMO-1的作用．实验结果表明,PLpro和PLpro-TM 在细胞内具有很强的去ISG(DeISGylation) 活性;缺失PLpro N末端泛素样结构域(Ubl) 对PLpro 的去ISG15 活性没有影响;对PLpro蛋白酶活性位点C1651 和 H1812 突变后,PLpro-TM的去ISG15活性消失,而对D1826位点突变后不影响此活性．PLpro 不具有去SUMO (DeSUMOylation)活性,而PLpro-TM具有一定的去SUMO活性;PLpro催化活性相关的3个关键氨基酸残基 Cys-His-Asp突变后对去SUMO活性有一定的影响．研究结果提示,SARS PLpro除了具有DUB的活性,还具有体内去ISG活性和去SUMO活性;PLpro蛋白酶活性与其去ISG活性之间有一定相关性;PLpro去SUMO-1 活性具有TM 依赖性．SARS冠状病毒PLpro 对泛素样分子作用特性的研究为阐明病毒逃避宿主天然免疫机制和开发新型抗病毒药物提供重要的理论依据．     

建立“人工面神经技术”恢复周围性面瘫兔的闭眼功能

目的：建立“人工面神经技术”以恢复单侧周围性面瘫兔的眼轮匝肌闭眼功能,为周围性面瘫提供一种新的治疗手段。方法：制备单侧周围性面瘫兔,建立健侧眼轮匝肌肌电信号采集、中枢信号处理模式识别、患侧电流刺激眼轮匝肌系统。当健侧眼轮匝肌采集的肌电信号经信号识别、提取以及电脑分析判断,符合其闭眼刺激阈值时,即对人工电刺激器发出指令,由刺激电极直接作用于惠侧眼轮匝肌,引起眼睑完全闭合。结果：以最小电流刺激患侧眼轮匝肌,引起眼睑完全闭合。刺激方式为正负矩形波,电流强度为0．30～0．50mA。结论：利用可植入式微机电技术,在单侧周围性面瘫模型建立“人工面神经反射弧”,恢复患侧眼轮匝肌闭眼收缩,可维持双侧闭眼功能的对称性和同步性。     

烟雾病5 例临床分析

目的:研究烟雾病(moyamoya disease,MMD)的临床及影像学特征。方法:回顾性分析5例烟雾病患者,分析其临床及影像学特点。结果:本组病例既往均无阳性病史,中、青年起病,男性居多,均以缺血性脑血管病起病,肢体瘫痪不重,经颅多普勒(TCD)及头颅核磁改变明显,数字减影血管造影(DSA)检查均存在血管闭塞及侧支开放,烟雾血管网形成,1例MRA证实烟雾血管网形成。结论:对于无既往史的中、青年脑卒中患者,要考虑MMD的可能,需完善TCD、头核磁检寻找证据,最后完善数字减影血管造影确诊。     

HA纳米载体介导转hGM-CSF基因的HepG2疫苗诱导的 抗瘤效应研究

目的:观察HA纳米颗粒载体介导转染hGM-CSF基因的HepG2细胞疫苗体外抗肿瘤效应,为hGM-CSF基因修饰的HepG2细胞疫苗的临床应用提供依据。方法:HA纳米颗粒载体介导hGM-CSF基因转染HepG2细胞制备转GMCSF基因的HepG2细胞疫苗。密度梯度离心法分离人PBMC,体外诱导人PBMC。WST-1法测定PBMC的增殖活性及对HepG2细胞的杀伤效应,流式细胞术分析CD4+和CD8+的阳性表达率,ELISA法测定INF-γ的分泌。结果:WST-1结果显示,转基因HepG2组疫苗能诱导PBMC增殖,其增殖率优于野生型疫苗(p<0.05);其诱导的PBMC对HepG2的杀伤率高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p<0.05)。FCM结果显示,转基因HepG2疫苗组PBMC中CD4+和CD8+阳性表达率均高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p<0.05)。ELISA结果显示,转基因组PBMC培养上清中IFN-γ含量为1989.76±254.21pg/ml,高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p<0.05)。结论:HA纳米颗粒载体介导转染hGM-CSF基因能增加HepG2细胞疫苗的免疫原性,转hGM-CSF基因HepG2细胞疫苗可有效诱导PBMC增殖、分化,增加INF-γ的分泌,提高其对HepG2细胞的杀伤作用。     

Effects of shark hepatic stimulator substance on the function and antioxidant capacity of liver mitochondria in an animal model of acute liver injury

This study was carried out to investigate whether shark hepatic stimulator substance （HSS） can prevent acute liver injury and affect mitochondrial function and antioxidant defenses in a rat model of thioacetamide （TAA）-induced liver injury. The acute liver injury was induced by two intraperitoneal injections of TAA （400 mg/kg） in a 24 h interval. In the TAA plus shark HSS group, rats were treated with shark HSS （80 mg/kg） 1 h prior to each TAA injection. In this group, serum liver enzyme activities were significantly lower than those in the TAA group. The mitochondrial respiratory control ratio was improved, and the mitochondrial respiratory enzyme activities were increased in the TAA plus shark HSS group. The mitochondrial antioxidant enzyme activities and glutathione level were higher in the TAA plus shark HSS group than in the TAA group. These results suggest that the protective effect of shark HSS against TAA-induced acute liver injury may be a result of the restoration of the mitochondrial respiratory function and antioxidant defenses and decreased oxygen stress.     

TCD对2型糖尿病患者脑血流动力学评估

目的评估TCD检查在糖尿病患者脑血管病变诊断中的作用。方法64例2型糖尿病患者和40例健康体检者分别行TCD检查,2组检查结果进行对比分析。结果患病组脑动脉的Vp较对照组显著加快．其中MCA、TICA、ACA、VA和BA的Vp值与对照组比较差异有显著性。脑血管病变的程度与年龄、病程有关。结论TCD对2型糖尿病颅内动脉血流动力学的改变灵敏性较高,在诊断糖尿病患者缺血性脑血管病变,预测和减少脑血管意外方面有着重要的临床意义。     

基于FPGA的随机字符发生器在ERP中的应用

脑电领域的众多探索一直以来都是各国科学家研究的热点。刺激源是脑电实验中不可或缺的一部分。刺激序列正确编排和稳定发生是诱发脑电信号被正确提取的先决条件。利用可编程逻辑器件作为随机字符信号发生器,使之同时具有计数和VGA显示功能,由此产生的视觉ERP刺激序列,可以作为脑区功能存在病变的病人的理想刺激源。     

A miniaturized assay to quantify effects of chemicals or physical stimuli upon locust activity

Solitary and gregarious locusts differ in many traits, such as body color, morphometrics and behavior. With respect to behavior, solitary animals shun each other, while gregarious animals seek each other＇s company, hence their crowding behavior. General activity, depending on the temperature, occurs throughout the day but is much lower in solitary locusts. Solitary locusts occasionally fly by night while gregarious locusts fly regularly during daytime （swarming）. In search of new assays to identify substances that control or modify aspects of （phase） behavior, we designed a simple activity assay, meant to complement existing behavioral measurement tools. The general activity is reflected in the number of wall hits, that is, the number of contacts between the locust and the vertical walls of a small arena. Using this single parameter we were able to quantify differences in total activity of both nymphs and adults of isolation-reared （solitary）, regrouped- and crowdreared （gregarious） locusts under different conditions. Furthermore, we demonstrate that there are inter- and intra-phase dependent differences in activities of 5th instar nymphs afar injections of the three different adipokinetic hormones.     

弥猴单侧软腭肌肉对针式电极刺激的反应

目的建立针电极口内刺激猴软腭肌肉诱发腭咽闭合运动的模式,取得软腭肌肉运动的有效刺激数值,为软腭肌肉功能重建奠定基础。方法通过解剖成年猕猴软腭的五组肌肉,确定其体表位置;利用实验动物用腭部肌肉电极定位刺激器及针式电极对软腭肌肉进行有效刺激;结合鼻咽纤维镜、头颅侧位X片及软腭造影技术观察、记录肌肉收缩及腭咽闭合动作。结果在猕猴口内定位目标肌肉进行针电极刺激可诱发肌肉收缩。刺激电压为3 V、刺激频率为20 Hz时均能诱发单侧软腭肌肉的有效收缩;单侧腭帆提肌在刺激电压为5 V、20 Hz时可发生腭咽闭合动作。咽腭肌、舌腭肌在刺激电压5 V、刺激频率100 Hz时发生软腭下降动作。腭帆张肌仅发生收缩,而未发生腭咽闭合。应用鼻咽纤维镜和X线成像技术配合能记录腭咽闭合动作。结论弥猴可作为研究软腭肌肉运动模式的实验动物。应用电极刺激软腭肌肉,可初步建立腭咽闭合的动作模式。     

基于按摩的电刺激器的设计

目的设计一种基于中医按摩的电刺激仪器——将产生的电刺激信号通过中医的按摩手法给患者按摩。方法研究采用STC89C58RD＋单片机作为控制器,采用LCD点阵液晶显示作为可视化的提示工具,采用4＊4矩阵键盘作为输入控制接口,采用变压器作为电刺激信号升压器件。结果研究实现了预期目标,用户可通过LCD提示输入控制点刺激信号强度的按键,单片机处理后输出相应的脉冲波形,进而触发生成用于按摩的电刺激信号。结论对51单片机开发应用,实现了输入不同的频率信息,产生不同强度的电刺激信号,使人感觉不同程度的麻刺激,能够用于治疗和保健。