蓖麻蚕rDNA核骨架结合元件SAR的检测和特征分析

采用二碘水杨酸锂盐 (LIS)制备细胞核骨架 ,Southern杂交法检测与细胞核骨架结合的rDNA片段 ,发现蓖麻蚕rRNA基因 5′非转录间隔区 (NTS)内存在一个很强的核骨架结合元件 .外切核酸酶Ⅲ消化限定表明 ,该SAR位于SacⅡ -EcoRⅠ限制酶片段内 ,长度约 1kb .经DNA顺序分析表明 ,该片段AT碱基富集 ,A +T >70 % ,含有拓扑异构酶Ⅱ保守序列和ATATTT结构花式 ,以及酵母自主复制序列(ARS)的同源序列 ,该SAR内含有 (AT) ₁₈序列已证明是核酸酶S1的超敏感位点 ,这种核酸酶S1的超敏感性可能是SAR元件的信号特征之一 .     

天尖杉科的核形态学研究

４种三尖杉科植物的形态结构的研究结果如下：它们的间期核均为复杂沟色中心型,分裂前期染色体属于中间型,体细胞分裂中期染色体的核型为：（１）三尖杉Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘｕｓ ｆｏｒｔｕｎｅｉ Ｈｏｏｋ．ｆ．,Ｋ２ｎ＝２４＝２１ｍ＋１Ｍ＋２ｓｍ（２ＳＡＴ）。核型不对称性属于２Ａ型,着丝点端化值（Ｔ．Ｃ％）为５３．９９;（２）高山三尖杉Ｃ．ａｌｐｉｎａ（Ｌｉ）Ｌ．Ｋ．Ｆｕ,Ｋ２ｎ＝２４＝１９ｍ＋３Ｍ＋２ｓｍ     

融合热释放对低温冷冻人骨髓细胞的核酸与酶类活性的影响

本文用定性定量组织细胞化学方法,对冻前及不同降温条件冻存的人骨髓细胞的 DNA、碱性磷酸(ALP)、过氧化物酶(POX)活性进行测定。在程序降温过程中,没有消除融合热的骨髓细胞的 DNA、ALP、POX 活性均显著下降。消除融合热后,冻存骨髓细胞 DNA 活性没有改变,ALP、POX 活性略有下降。因而,融合热的释放是骨髓细胞生物活性下降的重要因素。     

The characteristics of the spindle fiber attachments（SFAs） enriched fraction from mouse nuclei

The characteristics of the particulate mouse centromere enriched fraction from isolated nuclei obtained in our laboratory were investigated by indirect immunofluorescence,test of the activity of microtubule organizing center(MTOC),SDS-PAGE,and fluorescence in situ hybridization.Most of the particles of the fraction are complexes of DNA and kinetochore proteins and show MTOC activity.The DNA isolated from the fraction can hybridize with DNA in the regions of the primary constrictions of all chromosomes of ascions of the primary constrictions of all chromosomes of ascites cells.The kinetochore proteins isolated from the fraction are mainly those with molecular weight of 55 KD and 59 KD.Results suggested that the fraction obtained is a centromere enriched nuclear fraction as indicated in our previous report.     

核内受体超家族的结构与机能分析

根据受体编码基因建立的系统发育树分析结果,将全部核内受体分为三个亚类。几乎核内受体超家族所有成员都具有相同的结构模式：受体分子由Ａ／Ｂ、Ｃ、Ｄ和Ｅ区构成;这些结构区分别参与配体与受体、受体与ＤＮＡ以及受体与其它核内转录因子的相互作用,调节靶基因的转录激活过程。因此,核内受体超家族是一大类重要的转录调节因子。     

Percoll等密度梯度离心法分离利什曼原虫细胞核

分离纯化锥虫类原生动物细胞核存在着许多困难,阻碍了人们对这类单细胞生物的细胞核在各方面作进一步研究。本文提出一个从破碎细胞开始的分离核的完整程序。采用起始密度为1.083的Percoll工作液作等密度梯度离心,获得了纯度较高的利什曼原虫(Leishmania gerbilli)细胞核。经测定,L.gerbilli细胞核在Percoll中的浮力密度为1.048—1.051。     

影响哺乳动物细胞核移植因素的分析

细胞核移植(nuclear transplatation)是克隆具有相同遗传基础的优秀家畜的有效方法。在不远的将来,它可能成为一个广泛应用的生物技术。这一生物技术,可以使一群体内的优秀个体迅速增殖,导致快速的遗传改良,在一个繁殖周期内,获得大量与亲本遗传性状完全一致的复制子代。同时,细胞核移植又是研究哺乳动物早期胚胎发育及细胞分化过程中的基因表达与调控,不同细胞周期内,细胞核与细胞质的相互关系及其作用机理等理论问题的理想手段。在对几种哺乳动物(如小鼠、兔、羊和牛等)进行的具有开拓性研究实验中,已经显示出,哺乳动物细胞核移植作为克隆动物的一项生物技术,是进行科学研究的重要手段,并有可能投入商品化。然而,目前只有20～40％通过细胞核移植后重组的胚胎能够发育成形态学正常的桑椹胚或囊胚,能够发育产仔的就更少。这说明存在一     

重组人血管生成素制备和生物活性鉴定

血管生成素（angiogenin,ANG）是一种很强的促血管生成因子,与肿瘤的发生发展有着密切的关系,拮抗ANG被认为是抗肿瘤血管靶向治疗的一个有效途径. 同时,ANG具有促进伤口愈合、保护神经元以及抗细菌感染等活性.但是,开展相关研究所需的最基本的天然ANG蛋白来源非常有限,大规模表达和纯化有生物活性的重组血管生成素蛋白（rANG）具有广泛的应用前景. 我们可以在大肠杆菌中表达rANG,但表达产物在胞内聚集形成不溶性的包含体,需经变性、复性、阳离子交换层析和反向C18的HPLC方法纯化后,才能获得高纯度的rANG. 经SDS-PAGE鉴定,纯化蛋白质为单一条带,质谱鉴定蛋白分子量与理论分子量一致. 经体外活性检测,证实纯化的蛋白质具有核糖核酸酶活性、促内皮细胞管腔形成和细胞核转位等生物学活性.本文详细描述了rANG的表达、纯化、活性鉴定等过程和所使用的方法与技术.