植物体内HRGP的研究进展

综述了HRGP的分类、结构、功能及其基因在植物生长发育中的表达和调控。     

人Pescadillo诱导大规模染色质伸展

人Pescadillo基因编码的蛋白分子中含有一个BRCT结构域, Pescadillo在DNA合成、细胞增殖和转化中发挥重要作用. 考虑到BRCT结构域能够诱导大规模染色质伸展, 对Pescadillo在大规模染色质伸展中的作用进行了研究. 首先从人乳腺MCF10A细胞中得到了Pescadillo编码区的cDNA, 其序列在第580~582位氨基酸发生缺失, 将该cDNA 片段与lac阻遏物在AO3-1细胞中融合表达, 通过lac阻遏物结合细胞基因组中含有lac操纵基因的区域将Pescadillo靶向至染色质周围, 发现Pescadillo能够诱导大规模染色质伸展, 并将诱导大规模染色质伸展活性的结构域定位至其BRCT结构域, 这为深入理解Pescadillo的重要作用提供了新的线索.     

柿果实采后胞壁多糖代谢及其降解酶活性的变化

以富平尖柿为试验材料,研究了室温下柿果实硬度和细胞壁组分及其降解酶活性变化。结果表明,柿采后后熟期间果肉硬度持续下降,平均日下降3．1％,其中第7天到第16天下降最快,平均日下降6．9％。碳酸钠可溶果胶(SSP)和24％KOH可溶组分含量持续下降,与果肉硬度变化呈极显著正相关(r分别为0．9698和0．8084);而水溶性果胶(WSP)和4％KOH可溶组分含量不断上升,与果肉硬度变化呈极显著负相关(r分别为0．9566和-0．9392),螯合剂可溶果胶(CSP)与24％KOH不溶组分含量变化缓慢。多聚半乳糖醛酸酶(PG)和纤维素酶(Cx)活性均在采后第16天达最高值。相关性分析表明,PG活性上升可能是导致柿SSP含量下降和WSP含量上升的主要原因;而Cx活性则可能引起纤维素以及难溶性的半纤维素(24％KOH可溶组分)向易溶的半纤维素(4％KOH可溶组分)转化,从而导致了柿果肉硬度的下降。     

植物细胞壁伸展测定仪在蚕豆扩张蛋白特性研究中的应用

扩张蛋白(expansin)在细胞扩张和果实成熟中起着极为重要的作用.植物细胞壁伸展测定仪是研究扩张蛋白必不可少的仪器.为此以电涡流传感器为核心部件装配了一种具有结构简单、操作方便和测量准确等优点的新型测定仪,并利用该仪器研究了蚕豆(Vicia faba)扩张蛋白的特性.结果表明蚕豆根、茎、上胚轴和成熟叶片中均存在扩张蛋白,而且叶片和幼根的扩张蛋白活性最强;免疫印迹证实在蚕豆根、茎、上胚轴和成熟叶片中确实存在扩张蛋白.以上结果说明本仪器灵敏且可靠,用此仪器首次发现在成熟叶片中存在扩张蛋白.     

西伯利亚蓼几丁质酶基因Class Ⅳ的克隆及生物信息学分析

根据西伯利亚蓼抑制消减文库（SSH）中获得的几丁质酶（CHI）基因的部分序列,采用RACE技术克隆了具完整编码区的cDNA序列,基因全长1017bp,开放阅读框编码270个氨基酸。序列分析表明,该基因的编码蛋白（PsCHI1）以前体形式存在,N端分别有22个氨基酸的信号肽和35个氨基酸的几丁质结合域（CBD）,C端199个氨基酸为催化区（CD）,连接CBD与CD的14个氨基酸为可变交联区,成熟蛋白为不含信号肽部分,呈碱性,带正电荷。PsCHI1与所选其它植物classⅣCHI前体序列具有高度的同源性（53％-69％）,而与classⅠ和classⅡCHI的氨基酸序列同源性较低,推测为植物classⅣCHI。根据日本水稻CHI晶体结构构建了PsCHI1三维分子模型,分析显示PsCHI1可以识别比classⅠ和classⅡCHI短的几丁质片段,并以其它植物CHI的已知结构域和功能为基础,确定PsCHI1具有能够水解真菌细胞壁的结构,推测其可能有抗病原微生物的功能。     

黑麦小孢子母细胞形成和发育过程中细胞胼胝质壁合成的变化

结合戊二醛-饿酸固定,环氧树脂包埋,苯胺蓝-DAPI染色和荧光显微镜观察。研究了黑麦小孢子母细胞的发育过程及其细胞胼胝质壁合成的变化。结果发现,黑麦花药中胼胝质的合成最早出现在造孢细胞晚期,并首先在小孢子囊中央的造孢细胞中沉积,随后向小孢子囊两端的细胞扩展,随着花药的发育,胼胝质在小孢子囊中央的造孢细胞中大量积累并解本,而且,小孢子囊中央的细胞与邻近绒毡层排列的造孢细胞分离并逐渐消失。紧靠绒毡层排列的造孢细胞最后转变成花粉母细胞,经减数分裂,形成小孢子,本研究对胼胝质的功能和形成的机制进行了讨论。     

吲(口朶)乙酸、激动素和单糖对苘麻愈伤组织细胞壁组分的影响

本实验采用 H~3标记糖饲喂示踪分析法。将苘麻愈伤组织分别用吲哚乙酸和激动素处理,并在培养基中供给 H~3葡萄糖或 H~3半乳糖。——实验表明,激素对细胞壁组成分影响,不仅与激素的种类有关,也与供给的外源单糖有关。而外源单糖(半乳糖、葡萄糖)单独加入或同时加入,使激素对苘麻愈伤组织诱导的影响又有所不同。在吲哚乙酸作用下,促进了 H~3葡萄糖的掺入;而半乳糖的加入又抑制了 H~3葡萄糖掺入到细胞壁各组分。在激动素作用下,促进H~3半乳糖的掺入,而葡萄糖的加入又抑制了 H~3半乳糖掺入到壁的各组分。     

植物细胞壁富含羟脯氨酸糖蛋白（HRGP）的电子显微镜观察

本文介绍了一种简单可行的,用以观察和鉴定一种植物细胞壁蛋白质－富含羟脯氨酸糖蛋白（HRGP）的方法,胡萝卜HRGP属于一种伸展蛋白（extensin)。通过简化的装置将HRGP喷射到云母片上,再经旋转投影,使其在透射电子显微镜下呈现为棒状分子（rod-like molecule),经电镜观察和测量表明,HRGP的分子长度为87nm。     

溶葡球菌酶的比色测定及某些性质的研究

溶葡球菌酶是一种专一地溶解葡萄球菌的溶菌酶。和蛋清溶菌酶一样,通常采用比浊法进行测定,底物或为葡萄球菌、或为该菌的细胞壁、或为该菌细胞壁的肽聚糖。本文报道一种简便灵敏的溶葡球菌酶比色测定法,以偶联了KNR艳蓝染料的葡萄球菌(死)细胞或偶联了KNR艳蓝染料的该菌细胞壁肽聚糖为色源底物,根据酶作用后释放出的可溶性KNR生成物计算酶活性。本文采用该比色测定法检定了溶葡球菌酶的某些动力学性质。