（PLoS综合》：一非编码RNA参与调节了精子成熟

来自中科院上海生化与细胞所分子男科学重点实验室的研究人员在新研究中证实一新长链非编码RNA以小RNA前体分子形式参与调节了精子成熟,相关研究论文发表在国际杂志（（PLo SONE））上。     

新型小片段基因表达载体构建方法

介绍一种新型快速构建小片段基因表达载体的方法。该方法省去了目的基因酶切和酶切后纯化步骤,并省去了载体酶切后胶回收纯化步骤,具有简单快速,节省试剂费用,连接效率高等特点。应用该方法已经完成了4个小片段基因(67bp)表达载体的构建。     

NOTES ON THE GENUS RICHARDSIA PAPP IN CHINA (DIPTERA,SPHAEROCERIDAE, COPROMYZINAE)

报道小粪蝇科1新纪录属和1新纪录种:理小粪蝇属Richardsia Papp,1973及该属蒙古理小粪蝇Richardsia mongolica( Papp,1973),之前仅在蒙古分布记录.文中补充了蒙古理小粪蝇雌性后腹部特征图.研究标本均保存在沈阳大学.     

A NEW RECORD SPECIES OF THE GENUS APORCELAIMELLUS HEYNS FROM CHINA (NEMATODA, DORYLAIMIDA, APORCELAIMIDAE)

描述了采自山东省沂水县烟草Nicotiana tabacum Linn.根围土的中国线虫1新纪录种,钝尾小无环咽线虫Aporcelaimellus obtusicaudatus( Bastian,1865) Altherr,1968.该种主要的鉴别特征是雌虫虫体中等到大型,角质层山明显的2层组成;唇区角状,明 显缢缩,唇瓣彼此分离;齿针强壮,长22.1 (19.9-27.1) μm,其开口占齿针长的一半;食道矛线型,贲门圆锥形;雌虫双生殖腺,阴门通常位于体中部,内阴唇骨化明显,呈心形;内阴唇和阴道总长约占阴门处体宽的2/5;尾长31.9 (23.2～37.3) μm,是肛门处体宽的0.7 (0.6～0.8)倍,尾呈钝圆锥形到半球形,末端圆,有厚的肌肉层,肛门后有粗糙的放射状条纹.它与A.faridpuriensis的主要区别在于:齿针较短(19.9 ～27.1 μmvs.35 ～39μm),前直肠较短(96.2μm vs.145 μm).它与A.krygeri的主要区别在于:齿针较短(22.1 μm vs.25 μm),尾较长(23.2 ～37.3 μm vs.20～25 μm),c’值大(0.6 ～0.8 vs.0.2～0.3),尾呈钝圆锥形到半球形,A.krygeri尾非常短,半球形且背凹,具钉状末端( Singh.Sharma& Khatoon,2002;Thome,1974).讨论了钝尾小无环咽线虫的已有报道和国内分布,对Aporcelaimellus属及相关属科的中文译名进行了厘订.     

电穿孔介导小干扰RNA高效转染小鼠附植前胚胎

使用Cy3标记的阴性对照小干扰RNA(siRNA)转染小鼠附植前胚胎,建立向小鼠附植前胚胎导入siRNA的电穿孔方法。通过控制透明带弱化程度、电压、脉冲时间和脉冲次数等条件,采用不同参数组合并结合使用不同介质作为电转缓冲液将Cy3标记的阴性对照siRNA转染小鼠附植前胚胎。在荧光倒置显微镜下,观察胚胎的存活率、siRNA转染率以及阳性转染存活胚胎的囊胚发育率。结果显示小鼠附植前胚胎在使用台氏液消化胚胎透明带10 s后,以opti-MEM作为电转缓冲液,电穿孔参数设置为30 V,1 ms,3次的条件下取得最佳转染效果。总之,电穿孔方法可实现siRNA简便、高效地转染小鼠附植前胚胎。     

种群密度和培养体积对发头裸腹溞生长和繁殖的影响

研究了不同培养密度(D1=100 ind·L-1,D2=150 ind·L-1,D3 =300 ind·L-1)和培养体积(V1 =50 mL,V2=100 mL,V3 =400 mL)对发头裸腹溞生长和生殖的影响.结果表明:在相同培养密度下,发头裸腹溞首次怀卵体长、雌体第一窝幼溞数和后代总数均随着培养体积的增大而减少,而雌体所产后代的性比(雄体∶雌体)随着培养体积的增大而增大.在相同培养体积下,雌体产出后代总数随着培养密度的增加而减少.雌体最大首次怀卵体长(0.95±0.10 mm)和最大后代总数(171.3±19.8 ind)均出现在D1V1组合,最大性比(0.54±0.05)出现在D3V2组合.培养密度和培养体积及其协同作用对发头裸腹溞雌体后代总数、后代性比均具有显著影响(P＜0.001).     

RNA干扰引起的非特异性免疫反应及其机制研究探讨

基因的表达失控是疾病发生的主要原因之一,干扰靶基因的表达可能成为有效的治疗手段。RNA干扰技术是近年兴起的基因调控干预方法,其基础,特别是应用研究极受关注,人们期待RNA干扰能成为肿瘤、病毒感染等难治疾病的临床治疗手段。然而,这一新兴技术在应用研究过程中显现出诸多问题,如细胞毒性、引起机体非特异性反应等等。就RNA干扰引起的非特异性免疫反应展开综述,探讨其机制,期望为RNA干扰的应用研究提供一些思考。     

大蒜素调控黑腹果蝇产卵偏嗜性和适合度

[目的]研究果蝇对大蒜素的产卵选择,并解析果蝇产卵避性的机制和生物学意义.[方法]应用产卵双向选择装置,检测黑腹果蝇Drosophila melanogaster雌成虫对0.01％,0.015％和0.02％大蒜素的产卵选择性;利用产卵装置,检测黑腹果蝇对大蒜素的位置效应;通过毛细管摄食法检测黑腹果蝇摄食行为;利用黑暗(...     

联合应用siRNA和拉米夫定抑制HBV复制和表达的实验研究

观察联合应用小干扰RNA和拉米夫定对HepG2.2.15细胞中HBV抗原表达和复制的抑制作用。构建并转染重组质粒psil-HBV到HepG2.2.15细胞中。转染后的细胞培养基中加入拉米夫定(0.05μm),分别于48、72、96 h收获细胞。用ELISA方法检测HBeAg和HBsAg;HBV DNA水平用实时定量PCR测定;用逆转录PCR检测HBV mRNA水平。96 h后联合应用小干扰RNA和拉米夫定组细胞培养上清中HBeAg和HBsAg抑制率分别为91.8%和82.4%(P<0.05);HBV mRNA表达水平明显降低。HepG2.2.15细胞中联合应用小干扰RNA和拉米夫定对HBV复制的抑制作用比单独应用siRNA或拉米夫定更有效。     

miR-93通过靶定PTEN基因增加肝癌细胞对奥沙利铂的耐药性

微小RNA（miRNA）参与了肿瘤的耐药过程.本研究通过建立对奥沙利铂 (oxaliplatin,Oxa)耐药的肝癌细胞系BEL-7402/Oxa和Hep-3B/Oxa,利用miRNA芯片结合实时荧光定量PCR的方法,筛选得到数个参与肝癌细胞对奥沙利铂耐药的miRNA 分子,其中miR-93表达增加最为明显.MTT实验发现,增加肝癌细胞株中miR-93的表达可以增强其对奥沙利铂的耐药性.进一步结合生物信息学、荧光报告载体及免疫印迹实验,证实miR-93通过靶定抑癌基因PTEN增加肝癌细胞对奥沙利铂的耐药性.总之,肝癌耐药细胞系的建立及其miRNA差异表达谱的分析,以及miRNA分子对肝癌细胞发生奥沙利铂耐药的具体作用及其分子机制的研究,不仅有助于理解肝癌细胞发生耐药的分子机制,而且为探索克服肝癌对奥沙利铂耐药性的有效途径提供可靠依据.