碳酸酐酶在中肋骨条藻光合作用中的作用

探讨了在正常空气条件下生长的中肋骨条藻(Skeletonema costatum)的碳酸酐酶(CA)在其光合固碳中的作用.在中肋骨条藻的胞内和胞外均有CA活性,但胞外CA活性很低.CA抑制剂AZ(乙酰唑磺胺)对中肋骨条藻的光合放氧速率没有明显影响,而CA抑制剂EZ(乙氧苯唑胺)对其光合放氧速率有强烈的抑制作用.EZ的抑制作用使细胞最大光合速率、饱和光强和无机碳亲和力下降,无机碳的补偿点和光呼吸提高,使强光下光抑制作用增强.这些结果表明:中肋骨条藻的胞外CA在其光合作用中所起的作用较小,而其胞内CA通过催化胞内碳库中的HCO-3快速转化成CO2,提高胞内CO2的有效供给,从而提高细胞光合固碳能力和对逆境(高O2、强光和低CO2)的适应能力.     

人源性抗TNFα小分子抗体的改构和分析

在获得人源性抗人TNF α单链抗体 (ScFv)基因序列的基础上 ,对ScFv的连接肽部分进行基因改造 ,并构建了Fab抗体基因。改构前后的ScFv分别重组入表达载体pBV2 2 0 ,经 42℃热诱导 ,在E .coliDH5α中表达了ScFv蛋白 ,得到分子量约为 30kD的重组蛋白质 ,改构前后ScFv的表达量分别占菌体总蛋白质的 6 .5 %和13 .8%。同时构建Fab可溶性表达载体并转化非抑制型菌株HB2 15 1,经IPTG诱导 ,在约 5 0kD分子量处呈现一条新生蛋白质条带。从大肠杆菌裂解液中对ScFv进行了复性和层析纯化 ,对Fab基因的表达产物进行了亲和层析纯化 ,并证实 :(1)改构后ScFv在大肠杆菌中的表达量有所提高 ;(2 )改构前后的ScFv与Fab均具有与hTNF α相结合的活性 ,具有GGGGS连接肽的ScFv与hTNF α的亲和常数为 6 .70× 10 4 (mol/L) -1,而改构后具有(GGGGS) 3 连接肽的ScFv的亲和常数提高为 7.2 7× 10 5(mol/L) -1,Fab与hTNF α的亲和常数为 7.6 1× 10 5(mol/L) -1,Fab与改构后ScFv的亲和力无明显差异 ;(3)ScFv与Fab均有中和hTNF α细胞毒的作用 ,具有(GGGGS) 3 连接肽的ScFv与Fab的中和活性基本相同 ,但均明显低于一株鼠源性单抗     

抗A型肉毒毒素人源单链抗体融合蛋白的重组设计*

以获得的抗A型肉毒毒素单链抗体为模板,进行融合改构,将人IgG1的Fc片段连接到ScFv的C端,在大肠杆菌中实现抗体融合蛋白ScFv-Fc的表达,表达量30%以上,蛋白以包含体形式存在,经过体外变复性的抗体融合蛋白ScFv-Fc,进行Prote in G Sepharose柱亲和层析纯化,纯度达90%~95%。体外活性检测结果表明,重组抗体融合蛋白ScFv-Fc可以特异结合A型肉毒类毒素抗原,其相对亲和力近似于母本单链抗体,其稳定性高于母本单链抗体。     

中国根霉12#纤溶酶活力单位的测定活力单位的测定

主要阐述了根霉纤溶酶活性（效价）的测定方法,采用血纤维蛋白平板法,在以尿激酶为参照标准的情况下,给出了根霉纤维酶提纯各步骤的活性情况。     

植物吸收转运无机氮的生理及分子机制

氮是植物生长必需的营养元素。植物从土壤中吸收的氮素主要是NO3-和NH4 +等无机氮源。植物吸收NO3-和NH4+的系统均有高亲和转运系统(high-affinity transport system, HATS)和低亲和转运系统(low-affinity transport system, LATS)之分。近10多年的研究已对这些转运系统的分子基础有了较好的理解, 本文着重对近年来植物吸收无机氮分子机制的研究进展进行了综述。     

尖吻蝮蛇毒类凝血酶促凝作用的研究

探讨尖吻蝮蛇毒类凝血酶（ＤＡＴＬＥ）的促凝作用特点及影响其药效的有关因素。方法测定ＤＡＴＬＥ诱导的体外全血浆及吸咐血浆凝固时间,不同实验条件对ＤＡＴＬＥ及凝血酶诱导体外全血浆凝固时间（ＴＴ）、白陶土部分凝血活酶时间（ＫＰＴＴ）和凝血酶原时间（ＰＴ）的影响。结果在体外,ＤＡＴＬＥ能直接使人全血浆及吸咐血浆凝固,并呈剂量相关性,该促凝作用不受ＡＴ－Ⅲ和肝素的影响,Ｎａ＋离子抑制,而Ｃａ２＋离子能增强其促凝作用;ＤＡＴＬＥ促凝作用的最适ｐＨ值在５．０～８．５之间;ＤＡＴＬＥ在体内能增强内源性和外源性凝血作用,在０．０５～０．１ｍｇ／ｋｇ的促凝剂量下,ＤＡＴＬＥ略使血浆纤原含量减少。结论ＤＡＴＬＥ为一类凝血酶,在一定剂量范围内,主要表现为促凝作用,有不同于凝血酶的特点。     

四种动物血浆纤维蛋白原含量的比较

血浆纤维蛋白原是血浆蛋白之一,它是由三对不同的多肽链以二硫键连接而成为纤维状蛋白质。分子量为340.0000,在人体血浆中浓度为200—400mg/100ml血浆。用盐析法可将血浆蛋白分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白三部分。 研究止血、血管内栓塞和溶解栓塞的药物,常以纤维蛋白原含量的变化为指标。因此了解常用实验动物的血浆纤维蛋白原的正常含量,对生理和药理学工作者是有一定参考价值的。据我所查资料,蟾蜍和家鸡的血浆纤维蛋白