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51.
核酶设计、合成与克隆的一种新方法 总被引:5,自引:0,他引:5
介绍了一种设计、合成与克隆人造核酶的新方法.通过在“锤头结构”模型中非保守性区域引入 Bgl I 切点,不仅维持了核酶切割活性所必需的二级结构,而且为核酶克隆的鉴定提供了极为方便的手段.另外还通过在核酶模板两端引入限制性内切酶半切点,一步直接将核酶模板连接、聚合、克隆到体外转录载体上,大大简化了以往核酶克隆的繁琐操作,省时、省力,克隆效率也较高. 相似文献
52.
目的 研究中国南海堂皇芋螺(Conus imperialis)毒素基因序列,为毒素功能研究奠定基础。方法 采用Trizol法提取堂皇芋螺毒腺管的总RNA,应用3’端快速扩增cDNA末端(3’RACE)及巢式PCR技术,获得A、O、J超家族芋螺毒素新序列;或以A家族高度保守的内含子及3’端非翻译区(3’UTR)设计引物,克隆出新的α-芋螺毒素新序列。选择合成毒素ImIIA及Im1.2,测定ImIIA二硫键的连接方式,并测定两种毒素对神经型烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)的抑制活性。结果 获得11条毒素前体肽序列,分属A、O1、O2、J3等超家族,其中Im1.95为已报道芋螺毒素,其余为新发现芋螺毒素。ImIIA二硫键连接方式为少见的“C1-C2,C3-C4”,10μmol/L Im1.2、ImIIA对α2β2、α2β4、α4β2、α3β2、α3β4 5个nAChR亚型抑制活性较低。结论 通过基因克隆方法,从堂皇芋螺中获得了11个芋螺毒素,其中10个为新序列,属于A、O1、O2、J3等超家族毒素,Im1.2、ImIIA对神经型nAChR各受体亚型活性较低。 相似文献
53.
植物激素乙烯在多种生理生化过程中发挥重要作用,但其在特定组织器官中的合成机制尚不完全清楚。拟南芥中存在12个功能未知的ACC氧化酶类似蛋白(ACO-like homolog,ACOL),运用基因定点编辑技术构建了ACOL8的功能丧失型突变体,发现该基因的突变削弱了经典的乙烯“三重反应”。与野生型相比,突变体黄化幼苗下胚轴及主根的长度显著增加,这与突变体对外源ACC的敏感性下降现象一致。同时还发现ACOL8基因的表达受乙烯信号的正反馈调控,EIN3过表达增强其表达水平,而etr1-3的突变则产生相反效应。再者,在正常条件下,ACOL8基因的突变并未影响拟南芥的生长;但在盐胁迫条件下,突变体的根冠比显著下降,这说明该基因参与植物的盐胁迫响应。综上,这些结果说明ACOL8可能具有ACC氧化酶的功能,参与乙烯的合成与响应。 相似文献
54.
55.
56.
反义RNA技术在植物基因工程领域中的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
周跃钢 《生物化学与生物物理进展》1996,23(4):297-301
反义RNA技术在植物基因工程领域中的应用包括:a.番茄和其他水果的成熟控制;b.植物的抗病性;c.改变花卉的颜色;d.植物淀粉合成的控制;e.油料植物种子中脂肪酸合成的控制;f.杂交种子生产中雄性不育性的控制;g.其他. 相似文献
57.
硒对培养人胚肝细胞Ⅲ型前胶原,羟脯氨酸合成的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
原代培养人胚肝细胞经1.156×10 ̄(-7)mol/L硒预处理4h,加入20mmol/L四氟化碳作用20h,观察硒对其Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和羟脯氨酸(Hyp)生成的影响。结果培养液中PCⅢ水平、细胞内Hyp含量及细胞内外丙二醛(MDA)水平均降低,与未加硒对照组比较差别有显著性(P<0.01)。而硒谷腕甘肽过氧化物酶(Se-GSH-PX)活性则较对照组显著增高(P<0.001),且PCⅢ水平与Se-GSH-P_X/MDA比值呈负相关(r=-0.9156,P<0.01)。提示硒可提高Se-GSH-P_X/MDA比值,抑制脂质过氧化激发的肝细胞胶原合成。 相似文献
58.
胰岛素介体-肌醇磷酸多糖,被认为是胰岛素的第二信使,存在于细胞膜上的糖肌醇磷脂是产生该介体的前体,经胰岛素或磷脂酰肌醇特异性的磷脂酶C(PIPLC)水解,产生介体和二酰甘油(DG)。本实验以人红细胞为材料,用^3H同位素标记、有机溶剂提取、薄层层析及放射性自动计数等方法,分析胰岛素或PIPLC作用于红细胞后前体和DG的变化情况,以推测介体的产生机制。结果显示:胰岛素使红细胞膜上及释放至胞外上清的前 相似文献
59.
氨基PEG化试剂的合成及其修饰能力的测定 总被引:5,自引:0,他引:5
分别用氰脲酰氯法及N-羟基丁二酰亚胺活性酯法合成了蛋白质的氨基PEG化试剂mPEGcc和mPEG-GS,并研究了它们对蛋白质的修饰作用。在合成过程中,通过分析反应体系中微量水分的存在对mPEGcc合成效率的影响,及溶剂中小分子可活化杂质成分对mPEG-GS合成产物质量的影响,发现去水剂的存在,可使mPEGcc产率提高7倍;二氧六环优于DMF,且二氧六环的预处理也很重要。同时,为了测定活化PEG修饰 相似文献
60.
天然高分子吸附剂研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
本文综述了蛋白质、淀粉、甲壳素、纤维素等天然高分子材料作为吸附剂使用的研究进展情况,对它们的制备方法、使用范围和应用前景作了介绍,引用文献122篇。 相似文献