"重组酶法生产D-对羟基苯甘氨酸"成果通过专家鉴定

中科院上海生命科学研究院植物生理生态研究所分子微生物学开放实验室主持的国家“863”计划项目“半合成β-内酰胺类抗生素相关工业用酶的研究”课题中的“重组酶法生产D-对羟基苯甘氨酸”部分,于2005年4月27日通过了成果鉴定。     

芽胞杆菌产生的脂肽类抗生素的结构和应用

脂肽类抗生素不仅对细菌、真菌有抗菌作用,而且对支原体、寄生虫和病毒等也具有显著的抑制作用。其主要包括表面活性素(Surfactins)、伊枯草菌素(Iturins)和芬芥素(Fengycins),其中Iturins和Fengycins有抗真菌活性,Surfactins有抗支原体、抗病毒等活性。综述了芽胞杆菌产生的脂肽类抗生素的结构、功能和应用,为其在农业和医药的研究与应用提供参考。     

铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制研究进展

铜绿假单胞菌（Pa）是临床最常见的条件致病菌,尤其是在医院获得性感染中占有非常重要的地位,但近年来随着碳青霉烯类抗生素的广泛应用,耐碳青霉烯类的铜绿假单胞菌株逐渐增多。据拉丁美洲抗生素监测组资料显示,亚胺培南的敏感性由1997年的77．1％降至2001年的62．2％,美罗培南由83．0％降至64．4％。PATZER等报道显示,1986—1992年临床分离的Pa菌株中耐亚胺培南株仅为1．8％,1994年至1996年耐亚胺培南株为2．6％,     

氟喹诺酮类抗生素及耐药基因污染控制的研究进展北大核心CSCD

氟喹诺酮类抗生素属于喹诺酮类抗生素,是一类人畜通用的抗生素。近年来,被广泛应用于人类和畜牧、水产等养殖业领域,然而其大量使用,造成在环境中的不断残留和累积,给自然环境和人类健康造成了较大威胁。现有研究表明,微生物降解是有效去除氟喹诺酮类抗生素残留污染的有效方法之一。本文总结和介绍了近年来氟喹诺酮类抗生素微生物降解单株菌和混合菌群、微生物降解酶、降解途径以及微生物降解氟喹诺酮类抗生素的实际应用,并对目前氟喹诺酮类抗生素微生物降解研究中存在的问题进行了分析,以及对未来氟喹诺酮类抗生素微生物降解研究的重点进行了探讨,以期为后续的研究提供参考。     

塔克拉马干沙漠存在超耐β-内酰胺环抗生素微生物的证据及对一个新物种的生物化学特性描述

在对塔克拉玛干沙漠土著微生物进行研究过程中,发现10株细菌能够在含有1 000 mg/L氨苄青霉素的0.1×TSB平板上生长.这些微生物具有广泛的β-内酰氨类抗生素耐受性.它们均属于变形杆菌纲,其中5个菌株鉴定为条件致病菌Stenotrophomonas matltophila,还有4个菌株与Mesorhizobium amorphae亲缘关系很近.有趣的是,菌株A-3-E T与已知物种同源性低,通过基于生物化学方法的多相分类学研究,我们将其确定为一个新属,并命名为Paramesorhizobium desertii gen.nov.,sp.nov.,发现高浓度的β-内酰胺类抗生素,如1000 mg/L的唑啉头孢菌素或250 mg/L的头孢氨噻肟,依然无法抑制其生长.此外,该菌株还能耐受所测试28种抗生素中的17种,塔克拉玛干沙漠可能是一个新的β-内酰胺环抗生素耐药细菌的自然资源库.     

云芝糖肽对氧化偶氮甲烷-葡聚糖硫酸钠诱导小鼠结直肠癌模型中相关肠道菌的影响及潜在意义

旨在探究云芝糖肽(polysaccharopeptide, PSP)对炎症相关结直肠癌(colorectal cancer, CRC)模型小鼠中肠道潜在致病菌和益生菌的影响。将雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和PSP组,每组10只。模型组和PSP组以氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)/葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)造模。PSP组在造模基础上每日灌胃PSP 650 mg/kg,持续13周。小鼠炎症状态以疾病活动指数(disease activity index, DAI)进行评估。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术测定各组小鼠新鲜粪便中厌氧消化链球菌(Peptostreptococcus anaerobius,P. anaerobius)、嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,A. muciniphila)、脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis, B．fragilis)、共生梭菌(Clostridium symbiosum, C．symbiosum)及乳酸杆菌(Lactobacillus spp.)的相对丰度。结果显示,PSP可降低造模所导致的小鼠DAI值升高,且在前两轮DSS处理时与模型组比较有显著性差异(P<0.05、 P<0.01)。PSP下调潜在致病菌P. anaerobius、A.muciniphila、B.fragilis以及C.symbiosum的相对丰度,且中期时P.anaerobius、A.muciniphila、 B．fragilis的丰度均显著低于初始水平(P<0.05、 P<0.01、 P<0.05)。表明PSP可缓解致炎剂诱导的小鼠结肠炎症,并降低部分肠道致病菌的相对丰度,提示PSP对炎症相关CRC可能具有潜在的预防作用。     

支原体对大环内酯类抗生素耐药机制的研究进展

支原体是能独立生活的最小原核细胞微生物,分支原体和脲原体2个属.按照遗传物质(G C)%含量、基因组大小、培养时对胆甾体的需求以及其他生物学特性等的差异,支原体可分为肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)、人型支原体(Mycoplasma hominis,MH)、解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)、生殖支原体(Mlycoplasma genitalium,MG)、发酵支原体(Mycoplasma fermentans,MF)等100多种,其中前三者与人呼吸和泌尿生殖系统感染性疾病密切相关.     

核甙类抗生素产生菌的筛选及其活性组分研究

从成都郊区土壤中筛选出一株能产生抗生素的放线菌 ,经过形态及培养特征观察、生理生化特性试验、细胞壁化学组成分析 ,确定其分类学归属为链霉菌属 ( Strep-tomyces)。从产生菌的固体培养物中分离得到活性物质、理化性质研究表明 ,该物质为胞嘧啶核苷衍生物。抗菌和抗肿瘤活性试验结果显示 ,此物质不仅具有抑菌活性 ,而且具有较强的抗肿瘤活性。     

氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II的表达纯化及初步活性

用PCR扩增的氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II[aac(3)-II]基因构建了能表达较高活性AAC(3)-II的重组工程菌,并获取重组AAC(3)-II。含pET28a质粒的工程菌转入aac(3)-II基因前后对氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度进行比较,重组菌超声裂解上清液及其纯化的AAC(3)-II进行SDS-PAGE和Western印迹电泳鉴定。最低抑菌浓度表明转入aac(3)-II基因的工程菌比未转入的工程菌对庆大霉素(gentamicin,GEN)的提高了256倍,对妥布霉素(tobramycin,TOB)及其奈替米星(netilmicin,NTL)提高了16倍,电泳鉴定表明纯化获取的是重组AAC(3)-II,其相对分子质量约为32kDa,纯度大于95%,纯化后的10μgAAC(3)-II,分别在10s内使80μgGEN、30s内使80μgTOB和NTL乙酰化而失去抑菌作用。研究为氨基糖苷类抗生素伴侣的开发研究初步打下基础。     

铜绿假单胞菌新基因PA0058插入失活对氨基糖苷类抗生素耐药性的影响

【目的】铜绿假单胞菌是一种重要的条件致病菌,临床上常引起难治性和顽固性感染,随着各种抗生素的广泛使用,该菌对多种抗生素呈现耐药性,研究其耐药性机理有着重要意义。【方法】以一株临床分离株Pseudomonas aeruginosa PA68作为出发菌株,应用人工Mu转座技术构建突变文库并从中筛选得到一株对链霉素抗性明显增强的菌株M122,并对突变株M122进行测序分析及表型检测。通过Southern杂交实验证实转座子是否为单拷贝插入,对突变株M122的基因表达谱与野生型PA68菌株进行对比分析。【结果】确定了Mu转座子在M122基因组上为单拷贝插入,插入位点为基因PA0058的第214 bp处。对M122进行表型检测,发现其对多种氨基糖苷类抗生素的耐药性均得到增强,通过转入携带完整基因PA0058的表达质粒可以使突变株M122的耐药性有所降低,利用同源重组的方法,在模式菌株P.aeruginosa PAK中进行PA0058基因敲除,得到的敲除株具有链霉素耐药性升高的表型。基因PA0058的缺失引起多种基因表达水平改变,尤其是katB、ahpC、ahpF等抗氧化酶基因转录表达显著增高。【结论】首次发现铜绿假单胞菌PA0058基因的插入失活提高了细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性,且导致突变株M122中抗氧化酶基因转录表达水平的上调。