重组人磷脂酶D2在体内能明显抑制慢性哮喘豚鼠血清中GPI-PLD的表达

 通过建立慢性豚鼠哮喘模型,研究重组人磷脂酶D2(rhPLD2)干预慢性哮喘豚鼠血清中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)含量的变化,探寻可能的机制. 以rhPLD2干预慢性哮喘豚鼠,用TX-114分相法检测豚鼠血清中GPI-PLD酶活性.与正常状态豚鼠相比较,慢性哮喘状态豚鼠其血清中GPI-PLD酶活性显著升高.但以rhPLD2及地塞米松干预慢性哮喘豚鼠后,该指标显著下降. rhPLD2可通过抑制其血清中GPI-PLD酶活性表达,来抑制哮喘发生过程中的炎症反应.     

白细胞介素-2的修饰

白细胞介素－２的修饰王京杭（山东大学应用生化研究所,２５０１００Ｃｈｉｎａ）白细胞介素－２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２,ＩＬ－２）是一种具有多种免疫调节功能的淋巴因子,由１３３个ａａ,产生于抗原或植物凝集素激活的Ｔ细胞,能激活淋巴细胞杀灭肿瘤等异己细胞,恢复和提高机体的抗病能力［１］。     

疫苗

甲型流感病毒低温适应重组疫苗株基因组中ts缺损的定位〔英」/MeaveQ。、。E…IAeta Virol一1984,28(3)一204~21〔译自DBA,1984,3(1了),84一08111〕852424一卯一,本文研究了亲代流感病毒基因组中以及低温适应株A/Leningrad/134/17/57或A/Leningrad/134/47/57与甲型流感病毒流行株H]Nl和H3NZ的重组病毒基因组中的温度敏感(ts)表型及ts突变的定位。流行株HINI和H3NZ具有ts表型,并在i或2个基因中含有ts突变。在40℃克隆纯化3次后,ts表型丢失。具有不同ts表型的2个低温适应株,在编码非糖蛋白的3个基因(A/Lenin-grad/134八7/57于25oC…     

不需要放射性同位素的糖基化DNA探针

在为获得安全、快速、非放射性的DNA标记方法的探索中,我们已研制出用于产生和检测糖基化DNA的程序。此项工作始于葡糖基化DNA(来自T4噬菌体)可被伴刀豆球蛋白(ConA).沉淀这一观察。一种葡萄糖取代的三磷酸胸苷类似物(2′-脱氧尿苷-5-烯丙基胺-麦芽三糖一5′-三磷酸盐)已被合成,并在缺口翻译反应中用于标记DNA。掺入的速度和程度均类似于被代替的三磷酸胸苷。     

环糊精葡萄糖基转移酶在天然产物糖基化修饰中的应用

环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glucosyltransferase,CGTase)是一种可催化淀粉或多糖中α-1,4键断裂并环化形成环糊精(cyclodextrins,CDs)的α-淀粉酶.CGTase在工业上主要用于制造环糊精,近年来利用其转糖基作用改造天然产物的性质取得了令人瞩目的研究进展,正成...     

蛋白质N-糖基化在拟南芥生长周期中的变化规律及去糖基化对根发育的影响

蛋白质N-糖基化修饰在植物生长发育中发挥重要作用。为探究蛋白质N-糖基化在拟南芥(Arabidopsis thaliana)整个生长周期中的变化规律以及去N-糖基化对拟南芥生根发育的影响,通过N-糖链酶解和HPLC与MALDI-TOF-MS分析解析了不同生长时期的拟南芥Col-0植株的N-糖链组成(结构和含量)变化。以...     

叶酸受体基因转染细胞诱导后的类脂改变对叶酸摄取的影响

用胆固醇合成抑制剂Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ（洛伐他汀,暂译名）和神经鞘脂类合成抑制剂ＦｕｍｏｎｉｓｉｎＢ１（抑鞘脂素Ｂ１,暂译名）处理能表达糖基化磷脂酰肌醇锚定叶酸受体（ＧＰＩＦＲ）的基因转染细胞（ＦＲα·ＴＲＶＢ－１）３ｄ,发现前者可使细胞的胆固醇含量减少约３５％,而后者可使神经鞘脂类减少４４％以上;同时发现,处理组细胞结合叶酸的能力减少约４０％,其对５－甲基四氢叶酸的摄入率减少逾８０％．这主要是由于细胞质膜中胆固醇和神经鞘脂类含量减少,从而导致膜内ＧＰＩＦＲ结合叶酸功能降低及ＧＰＩＦＲ摄入叶酸的内化过程障碍所致．其详细作用机制尚待进一步研究     

糖基化终末产物对3T3-L1脂肪细胞脂联素分泌的影响

目的糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGE)对3T3-L1脂肪细胞脂联素(adiponectin,APN)分泌的影响。方法3T3-L1小鼠前脂肪细胞体外培养并诱导分化为成熟的脂肪细胞,以PBS和BSA作为阴性对照,用含不同浓度梯度(50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml)AGE的培养液对成熟的脂肪细胞体外培养48h,收集细胞和上清液,用RT-PCR方法检测脂联素mRNA的表达,ELISA方法检测培养液中脂联素蛋白的分泌情况。结果AGE干预组脂联素的表达在mRNA和蛋白水平较对照组均明显下降(P<0.05),并且随着AGE浓度的升高脂联素的合成和分泌逐渐减少,其中100μg/ml、150μg/ml AGE干预组脂联素的减少较对照组有显著差异(P<0.001)。结论糖基化终末产物能够通过抑制3T3-L1细胞脂联素mRNA的合成,近而抑制脂联素的分泌,且这种抑制呈浓度依赖性。     

抑制RAGE表达的siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建特异性针对细胞膜上晚期糖基化终末产物受体（RAGE）的小干扰RNA（siRNA）腺病毒载体,鉴定其对大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞RAGE表达的影响。方法设计并合成针对大鼠RAGE基因的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack中,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,脂质体法转染至QB1293A细胞中包装,获得RAGE—siRNA的重组腺病毒,荧光显微镜观察RAGE—siRNA感染INS-1细胞后绿色荧光蛋白（GFP）的表达,Western印迹检测RAGE的蛋白表达。结果成功制备RAGE—siRNA重组腺病毒,在INS-1细胞中RAGE—siRNA感染效率达到90％以上,并能够抑制INS-1细胞RAGE的表达。结论成功构建了携带RAGE的siRNA重组腺病毒载体,能有效沉默INS-1细胞中RAGE的表达。     

1998～2008年中国中部H9N2亚型AIV分离毒株HA基因的进化分析

从过去10年由中国中部分离的具有不同致病力的25株H9N2亚型禽流感选出6株(3#、12#、25#、14#、4#、22#)代表性毒株,利用RT-PCR扩增它们的HA基因,并比较分析该基因的序列,旨在探讨HA基因的变异对AIV毒力、抗原性变化的影响。结果表明:6株H9N2 AIV亚型分离株的HA基因在HA1和HA2的氨基酸裂解位点上没有出现高致病性禽流感病毒所特有的R-X-R/K-R模式,它们均为弱毒力毒株。HA上潜在糖基化位点除了3#和12#分离株多出一个之外,其余均为8个。3#和12#所表现出较强的致病性可能与其在HA的头部(HA1)的A抗原位点上多了一个糖基化位点(145~147aa),改变了HA基因空间构型有关,空间构型的改变导致抗HA抗体作用位点的变异或缺失并影响其较近的受体结合位点,从而改变该毒株的抗原性。研究结果提示需要持续跟踪H9N2 AIV在中国鸡群中的传播和进化,以便及时掌握疫情,有效防控禽流感。