植物代谢工程在活性天然产物制备中的应用

本文分析了目前应用植物代谢工程在提高活性天然产物产量方面的研究成果,讨论了植物代谢工程的应用前景。     

光合作用条件下烟草叶片中的NADP含量分析

用酶循环法在叶片水平上分析NADP含量的结果显示,在光照条件下,NADP含量呈现出先迅速下降进而缓慢上升的变化,上升过程受高温和抗霉素A(antimycin A)抑制,说明此法所得结果能够反映光合作用条件下叶中内源NADP含量的变化趋势.     

生川乌中生物碱成分含量随煎煮时间变化的研究

本文研究乌头中生物碱成分的含量随煎煮时间变化的趋势,为考查乌头类中药的毒性,提供定量指标.按不同时间水煎提取样品;分别采用容量法、比色法和薄层扫描法测定总生物碱、双酯性生物碱和乌头碱的含量.生川乌醇水双提总生物碱含量最高,水提样品中以煎煮4 h较高;生川乌醇水双提酯性生物碱含量最高,水提样品中以煎煮2 h为最高,比双提酯性生物碱含量低;生川乌醇水双提乌头碱含量最高,水提样品中以煎煮2h为最高,比双提乌头碱含量低.为乌头类中药的毒性研究提供了详细的参考指标.     

楮实子油的化学成分及含量分析

楮实子为桑科植物构树[Broussonetia papyrifera(L.)Vent.]的干燥成熟果实,在中国分布广泛[1],具有补肾清肝、明目、利尿的功效,临床上用于治疗腰膝酸软、虚劳骨蒸、头晕目昏、目生膜、水肿胀满,还可以治疗顽癣、神经性皮炎、湿疹等皮肤病,<名医别录>载为上品[2].楮实子不仅具有开发治疗老年性疾病新药的潜力,还可以制成美容保健类的产品[3-5].     

人载脂蛋白A-Ⅰ半胱氨酸突变体的二级结构和脂质结合能力的比较

为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体,分别为apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),和apoA-Ⅰ(L195C).观察比较各种野生型及突变apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量和二级结构稳定性及其脂质结合能力.结果显示,野生型apoA-Ⅰ,apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),apoA-ⅠMilano和apoA-Ⅰ(L195C)的α螺旋含量分别为54±4%,49±4%,50±2%,51±6%,56±4%,52±3%,和54±1%,各种蛋白的α螺旋含量无显著性差异(P>0.05).野生型apoA-Ⅰ的变性标准自由能(ΔG0D)为10.5kJ/mol;apoA-Ⅰ(S52C)和apoA-ⅠMilano的ΔG0D比野生型低2.1kJ/mol;而apoA-Ⅰ(K129C)的ΔG0D比野生型apoA-Ⅰ高1.6kJ/mol.与野生型apoA-Ⅰ相比,apoA-Ⅰ(K129C)和apoA-Ⅰ(L195C)两个突变体与脂质结合能力明显下降(P<0.05),而其它半胱氨酸突变体(包括apoA-ⅠMilano)在脂质结合动力学方面与野生型apoA-Ⅰ无明显差异.以上结果提示,不同位点发生的半胱氨酸突变对apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量无明显影响,但对蛋白的二级结构稳定性和脂质结合能力影响不尽相同.     

外源钙离子对东南景天生长及锌积累的影响

采用水培试验,研究了外源添加不同浓度钙离子（Ca²⁺）对两种生态型东南景天生物量、根系形态及体内锌、钙、硫含量的影响.结果表明：随着外源Ca²⁺浓度的上升,两种生态型东南景天的干物质量均增加,且超积累生态型地上部增加显著(P<0.05);超积累生态型根长和根表面积增加,而非超积累生态型降低;超积累生态型根、茎、叶锌含量随着外源Ca²⁺浓度的增加而上升,但各处理间差异不显著(P>0.05),非超积累生态型地上部锌含量显著降低(P<0.05).非超积累生态型根、茎、叶钙含量与外源Ca²⁺浓度呈显著正相关(P<0.05),超积累生态型根系硫含量与外源Ca²⁺浓度呈极显著正相关(P<0.01).外源Ca²⁺对超积累生态型东南景天锌吸收及积累有促进作用,而Ca²⁺浓度的升高抑制了非超积累生态型东南景天对锌的吸收.适当增加外源Ca²⁺可促进超积累生态型东南景天生长,改善其锌积累能力.     

重组人促性腺激素释放激素及导肽的分离纯化与活性分析

对含重组人促性腺激素释放激素(GnRH)及导肽(LEP)的工程菌株进行诱导表达,分离纯化GnRH/LEP并进行生物学活性分析.工程菌IPTG诱导,收获的菌体经超声破碎后,裂解液用Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化GST-GnRH/LEP融合蛋白,经CNBr裂解、Sephadex G-25柱脱盐、QAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析和RP-C18柱脱盐,得到纯度大于98%的重组GnRH/LEP.Western blot表明表达产物均具有GrRH抗原特异性.生物学活性分析表明:该表达产物可促进小鼠次级卵泡向成熟卵泡发育,可提高其血清中E2含量.     

灰绿藜中六种矿物质元素含量的测定

目的：研究了灰绿藜不同部位矿质元素的分布特点及动态变化。方法：采用火焰原子吸收分光光度法对灰绿藜各部位中的K、Ca、Mg、Cu、Fe和Na六种元素的含量进行了测定与分析。结果：从测定结果可见,不同生长时期灰绿藜的各部位,其矿物元素含量不同。随着生长时间变化,各元素在各部位的增长趋势也有升有降。测定结果的相对标准偏差为0.001%～0.580%,回收率为91.51%～114.32%。结论：得出灰绿藜不同部位矿质元素的分布与变化。     

秦芄挥发性成分研究

目的:研究秦芄(Radix Centianae Macrophyllae)中的挥发性成分.方法:利用水蒸气蒸馏法提取秦芄挥发油,用GC/MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果:分离出8个组分,鉴定出7个化学成分.检出率为91.40%.秦艽挥发性成分大于1%的分别确定为萜品烯-4-醇1.224%,(E,E)-2,4-癸二烯醛1.295%,棕榈酸乙酯32.009%,棕榈酸54.608%.结论:首次报道了用GU/NS对秦艽挥发性成分的研究,为该类植物的研究开发提供必要的试验数据.     

醋豆与大豆中脂肪酸含量的比较及营养学意义

目的:分析比较醋浸泡后大豆中的脂肪酸(FA)含量的变化,为大豆开发提供实验数据.方法:用石油醚提取总脂肪,甲基化后用气相色谱分析脂肪酸的含量分布.结果:醋浸泡28d后,醋豆总脂肪的相对含量趋于稳定,其中醋豆和大豆相比,软脂酸下降了1.21%,硬脂酸下降了0.58%,油酸下降了3.01%,亚油酸增加了1.32%,亚麻酸增加了6.32%.结论:饱和脂肪酸(SFA)和单不饱和脂肪酸的相对含量下降,多不饱和脂肪酸(PUFA)相对含量显著升高.醋大豆及大豆的多不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸相对含量的比值分别为4.11和3.2.上述变化的从营养学或生理学的角度,更符合人体需求.