秋水仙素诱导新疆一枝蒿多倍体

以茎段浸泡法和培养基培养法诱导新疆一枝蒿多倍体的结果表明,茎段浸泡法的诱导效果比较好,其中以0．2％秋水仙素浸泡茎段1d的处理效果最好,多倍体诱导率达27．3％。     

秋水仙素诱导的野生大豆根类细胞超微结构变化

萌发了４ｄ的野生大豆种子经秋水仙素处理３ｄ以后,根尖分生区细胞的超微结构发生了一些显著变化,许多质体环绕细胞核分布,这些质体中含有数量不等的淀粉粒,液泡的体积明显增大,有几个液泡分布的细胞核周围,少数细胞中形成网状粗面内质网聚集体;细胞核所占细胞体积的比例减小,有的细胞核形状变得极不规则,从超微结构分析,这些细胞已具备了分化细胞的特征,而不再入于有丝分裂之中。     

问：秋水仙素处理单倍体得到的一定是纯合子吗？

答：单倍体是指体细胞中含有本物种配子染色体数目的个体。那么如果此物种是二倍体如某玉米植株基因型是Aa．其单倍体植株的基因型为A、a两种,当用秋水仙素加倍以后．生成植株的基因型为AA、aa两种纯合子;但如果此物种为四倍体、六倍体、八倍体等偶数倍多倍体时,如某马铃薯植株基因型为从aa时,则形成的单倍体植株的基因型为AA、Aa、aa3种类型。     

秋水仙素诱导月季品种‘月月粉’2n花粉的研究

为获得二倍体古老月季品种‘月月粉’人工诱导2n花粉用于现代月季杂交育种,该研究在了解‘月月粉’花粉母细胞发育过程的基础上,使用秋水仙素注射结合包裹法处理幼嫩花蕾,成功获得了可正常萌发的2n花粉,并通过观察诱导获得的花粉离体及其在雌蕊上的萌发特征,初步评估2n花粉用于杂交育种的性能。结果表明:(1)秋水仙素药棉包裹造成部分花蕾在采粉前死亡,花蕾存活率随秋水仙素浓度提高和处理时间延长均极显著降低。(2)2n花粉诱导率在秋水仙素浓度为2.5、5.0、7.5和10.0 g/L间存在显著差异,但在处理时间为24、48和72 h间无显著差异;最佳诱导处理为5.0 g/L秋水仙素处理24 h,诱导率可达15.83%,该处理获得的2n花粉经亚历山大染色检验活力为27.2%。(3)‘月月粉’花粉母细胞在减数分裂时存在异常落后染色体和平行纺锤体,在四分体时期形成染色体数目加倍的二分体和三分体,最终产生2n花粉。(4)所诱导的2n花粉的体外萌发率和花粉管长度与天然花粉无显著差异,且都可以在母本柱头上萌发并长出花粉管进入子房,表明可用于进一步的杂交育种。     

绵羊胎儿成纤维细胞不同处理对核移植重构胚发育的影响

研究供体细胞代数、大小、周期以及基因转染处理对重构胚发育的影响. 结果如下: (i)体外培养5~7代细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚率显著高于16~18代细胞的桑椹/囊胚率(17.3% vs. 4.9%, P < 0.05); (ii) 15~25 μm细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚率为20.0%, 高于8~15 mm细胞、25~33 μm细胞桑椹/囊胚率(8.0%, 9.7%), 但效果不显著(P > 0.05); (iii) 血清饥饿与非血清饥饿的细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚发育率没有显著性差异(11.8% vs. 18.6%, P > 0.05), 但非血清饥饿的效果要好于血清饥饿; (iv) 用0.05 μmol/L秋水仙素处理供体细胞效果最好, 重构胚的桑椹/囊胚率可达27.5%, 而未处理或用0.1 μmol/L秋水仙素处理供体细胞, 重构胚的桑椹/囊胚率分别为17.1%和12.1%, 但三者之间差异不显著(P > 0.05); (v) 以转染绿色荧光蛋白基因(GFP)细胞做供体核, 重构胚的桑椹/囊胚率显著低于非转基因细胞做供体核的桑椹/囊胚率(3.1% vs. 20.4%, P < 0.05). 上述结果表明, 传代少、中等大小的细胞更适合做供体核; 血清饥饿没有必要; 用0.05 μmol/L秋水仙素处理供体细胞有利于重构胚的发育; 转基因供体细胞对重构胚发育有影响.     

秋水仙素诱导兰属'素心黄'多倍体的方法研究

采用继代培养法和侧芽萌动培养法比较秋水仙素诱导'素心黄'多倍体的效果.结果表明,继代培养法加倍效果较好,其诱导率为16.7%;细胞学鉴定表明,该方法诱导培育的植株具有多倍体表型特征,其体细胞染色体数2n=80,未见嵌合现象,而对照2n=40.     

毛泡桐同源四倍体的诱导

在含有不同浓度秋水仙素双层培养基上以叶片作外植体诱导毛泡桐同源四倍体植株,用变异植株根尖细胞染色体计数和成熟叶片中单细胞DNA含量测定的方法进行倍性分析。结果表明,在16个试验组合中,预培养6d的毛泡桐叶片经20mg·L-1秋水仙素处理72h的四倍体诱导率可达20%。     

红豆杉离体细胞四倍体的诱导

细胞大规模培养被认为是目前生产紫杉醇最有希望的替代途径之一,获得更高产的细胞系,可降低细胞大规模培养生产紫杉醇的成本,加速其产业化进程。药用植物多倍体与二倍体相比具有根,茎,叶和花果的巨型性,抗逆性强,次生代谢产物含量提高等特性。本研究通过同步化培养和秋水仙素诱导处理,成功建立了红豆杉四倍体细胞系并且经过7个周期的继代证明了该细胞系的稳定性。结果显示,用浓度为750mg/L的秋水仙素处理3d可以得到稳定传代的四倍体细胞系,其四倍体细胞比例稳定在62.5%。进一步对其次生代谢产物紫杉醇的检测显示该四倍体细胞比对照二倍体细胞具有更高的合成紫杉醇的能力。     

洋葱内表皮细胞中的网状结构物

使用 Triton 抽提和卡马氏亮蓝染色方法,在洋葱鳞茎内表皮细胞中观察到网状结构物的存在。秋水仙素和细胞松弛素 B 的处理,进一步区分出两种不同的网状结构:近质膜较细的网状结构能被秋水仙素破坏;核周围与核成切线状结合的较粗的网状结构,经细胞松弛素 B 处理后,其形象更为突出。本文讨论了卡马氏亮蓝方法所揭示的带壁细胞的网状结构物。     

秋水仙素诱导的野生大豆根类细胞超微结构变化

萌发了4d的野生大豆种子经秋水仙素处理3d以后,根尖分生区细胞的超微结构发生了一些显著变化：许多质体环绕细胞核分布,这些质体中含有数量不等的淀粉粒;液泡的体积明显增大,有几个大液泡分布在细胞核周围;少数细胞中形成网状粗面内质网聚集体;细胞核所占细胞体积的比例减小,有的细胞核形状变得极不规则。从超微结构分析,这些细胞已具备了分化细胞的特征,而不再处于有丝分裂之中。