水稻草矮病毒NS6基因在大肠杆菌中的表达及植物表达载体的构建

Large amount of disease-specific protein(SP) accumulated in the rice plant cells infected by rice grassy stunt virus(RGSV). It was deduced that the protein was encoded by NS6 gene on genomic vRNA6 and thus referred to as NS6 protein.But its function is unknown. In an effort to prove the above deduction and to elucidate the function of NS6 protein of RGSV, we constructed a bacterial expression plasmid pGTNS6 producing a fusion protein of glutathione S-transferase (GST) and NS6 protein, and a plant expression vector pCBTNSv6 containing NS6 gene. A recombinant plasmid pTNSv 6 containing the coding region of NS6 gene and the non-coding region at its 5' terminus, cloned by RT-PCR from purified RNAs of Shaxian isolate of RGSV, was used as the start point. Western blot analysis showed that the fusion protein reacted strongly with antisera raised against RGSV-SP, which served as evidence of the deduction.EHA105 of Agrobacterium tumefasciens containing pCBTNSv6 has been obtained and the transformation of rice is underway.     

转病毒来源发夹RNA小麦表现对大麦黄矮病毒的抗性

将大麦黄矮病毒GPV株系的复制酶基因片段和CP基因片段构建成可在植物细胞内表达含有双链复制酶RNA(茎)和反义CP RNA(环)的复合发夹RNA结构, 希望能够诱发植物体针对病毒的RNA干扰作用, 从而达到抗病毒目的。利用基因枪法将该结构导入小麦幼胚愈伤组织细胞后, 通过在幼苗再生阶段进行以叶片为模板的快速PCR来加速阳性植株的筛选过程, 最终共获得基因组整合有外源基因的小麦再生植株21株。对再生植株接种不同剂量的病毒, 其中9株对BYDV-GPV有低度抗性, 表现在低接毒量时无症状, 接毒量提高时发病且严重; 6株具中度抗性, 表现在低接毒量时无症状, 接毒量提高时局部有不严重症状; 6株具高度抗性, 两种情况下均无症状。抗性实验结果表明, hpRNA介导对BYDV的抗性可能受到BYDV含量的影响, 具有剂量效应的特点。     

水稻矮缩病毒第10号片段编码区的cDNA克隆及序列分析

采用聚合酶链式反应技术,扩增了水稻矮缩病毒(RDV)基因组第10号片段的编码序列,该片段编码病毒的非结构蛋白。对扩增产物进行了克隆和限制性内切酶分析,并绘制了物理图谱。克隆片段大小为1150 bp,含Sac I、Hind III、Nde I、BamH I、Sai I 等酶切位点,引物设计时还在该片段两侧增加了Bgl II和 EcoR I 切点,以便克隆到植物中间载体质粒。利用上述酶切位点对该片段进行了亚克隆和序列分析,结果表明,本研究克隆的RDV中国流行林基因组第10号片段的编码区与日本流行株的相应区域比较,核酸的同源率为96.03％,编码的氨基酸的同源率为97.17％。     

云南鳅属一矮小型新种(鲤形目:鳅科)

云南省呈贡县白龙谭生活着两种色型的云南鳅,经解剖证实,它们为同种异色型;实地考察和100余尾标本验证,它们的全长均小于50mm,但所怀卵粒已近成熟,堪称为矮小型种。与云南鳅属已纪录的种比较后确认,该种云南鳅为一尚未纪录的新种,命名为异色云南鳅 Yunnanilus discoloris。     

矮慈菇居群的数量分类研究

本文运用聚类分析和主成分分析基础上构造最小生成树的方法,对采自中国南方的7个矮慈菇居群用28个形态学性状进行了数量分类研究。结果划分出3个类群,综合反映了各居群间的亲缘关系。本文还简要讨论了数量分类学方法在居群生物学中的应用问题。     

矮生菜豆胚乳细胞形成时的超微结构研究

应用透射电镜对矮生菜豆的游离核胚乳、胚乳细胞及珠被绒毡层的超微结构进行了观察,揭示了胚乳细胞化过程中自由生长壁的形成方式。实验表明,在游离核胚乳中存在大量有被小泡,胚乳游离核的外层核膜发生明显外突并以出芽的方式产生有被小泡。初始胚乳细胞壁为自由生长壁,大量有被小泡融合于自由生长壁末端使之不断延伸并产生分枝。与珠被绒毡层相邻的胚乳细胞产生发达的壁内突,具有传递细胞特征;在这些细胞中出现大量的核糖体及粗糙内质网,表现现高度的合成活性。     

虱矮螨属二新种记述(蜱螨亚纲:矮螨科)

记述我国虱矮螨属Ｐｅｄｉｃｕｌａｓｔｅｒ Ｖｉｔｚｔｈｕｍ二新种：亚潜虱矮螨Ｐ．ｓｕｂａｒｃａｎｕｓ Ｇａｏ ｅｔ Ｚｏｕ,ｓｐ．ｎｏｖ．和闽菇虱矮螨Ｐ．ｍｉｎａｇａｒｉｃｉ Ｇａｏ ｅｔ Ｚｏｕ,ｓｐ．ｎｏｖ．,均采自蘑菇床（培养料）,模式标本保存于上海农学院。     

一种简便、快速的大肠杆菌质粒转化方法

将受体菌与质粒DNA混匀直接在Ca2+离子选择平板上进行转化和筛选,其转化过程仅需2 min左右,并能得到105以上的转化效率, 可满足一般克隆工作的需要。 Abstract：After mixing the recipient cells and plasmids DNA, directly spread the mixture on selective media containing Ca2+. The whole process of transformation just needs 2 min or so, and could acquire the transformation efficiency of more than 105, which is enough to common gene cloning.     

稷山矮牡丹腋芽的组织培养

1植物名称稷山矮牡丹(Paeonia suffruacosa Andr.var.spontanea Rehd.). 2材料类别腋芽. 3培养条件以MS为基本培养基.(1)丛生芽诱导与增殖培养基:MS 6.BA 2.0 mg·L-1(单位下同) NAA 0.1-0.2;(2)壮苗培养基:MS;(3)生根培养基:MS IAA 0.2-0.3.上述培养基蔗糖用量30 g·L-1、5.0 g·L-1琼脂,pH 5.8.培养温度(25±1)℃,光照强度40～60 μmol·m-2·s-1,光照时间15 h·d-1.