p38丝裂素活化蛋白激酶介导低氧预处理诱导的内质网应激相关的心肌细胞保护

钙网蛋白（calreticulin,CRT）和caspase-12是重要的内质网（endoplasmic reticulum,ER）应激分子,本实验在心肌细胞低氧／复氧（hypoxia／reoxygenation,H／R）模型上观察低氧预处理（hypoxic preconditioning,HPC）对CRT和caspase-12表达及活化的影响,探讨内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）在HPC保护机制中的意义及其细胞信号转导机制。原代培养的Sprague-Dawley乳鼠心肌细胞随机分为6组：H／R组、HPC＋H／R组、SB203580＋HPC＋H／R组、SP600125＋HPC＋H／R组、HPC组和对照组。以细胞存活率、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性及流式细胞术检测细胞损伤情况：Western blot方法检测CRT和caspase-12表达、活化及p38丝裂素活化蛋白激酶（mitogen—activated protein kinases,MAPK）、cJun N-terminal kinase（JNK）磷酸化水平。结果表明：（1）HPC具有细胞保护作用,与H／R组比较,HPC＋H／R组细胞凋亡率和LDH漏出分别降低6．6％和70．0％,存活率增高6．4％：HPC前以特异性p38MAPK抑制剂SB203580预孵育消除HPC的保护作用,与HPC＋H／R组相比,细胞凋亡率和LDH漏出分别增高5．4％和2．1倍,存活率降低5．4％,JNK特异性抑制剂SP600125预孵育对HPC的保护作用无明显影响。（2）H／R明显上调CRT表达（较对照组高8．1倍）和caspase-12活性（较对照组高33．2倍）;单独HPC可诱导CRT表达增多（较对照组高2．6倍）,但上调程度较H／R组低60％。H／R前进行HPC降低CRT过表达程度（降低72．4％）及caspase-12活化水平（降低59．6％）。（3）HPC前应用p38MAPK抑制剂,抑制CRT表达上调（分别较HPC＋H／R组和HPC组低63．9％和71．9％）,并消除HPC减轻H／R上调caspase-12活性的作用（较HPC＋H／R组高7．1倍）;HPC前抑制JNK活性对CRT、caspase-12表达和活化均无明显影响。上述结果提示：HPC可激发适当的ERS,抑制H／R诱导的过度ERS,减少ER凋亡信号介导的细胞凋亡。p38MAPK信号途径在HPC诱导的ER应激分子表达、抑制ER凋亡信号分子活化等机制中发挥重要作用。     

合欢花对慢性应激大鼠生长和脑单胺类神经递质含量的影响

为探讨合欢花对慢性应激大鼠生长和脑单胺类神经递质的影响,采用15只大鼠,设置了对照组、应激组和合欢花组3组实验。应激组和合欢花组均接受7天的应激刺激,之后合欢花组再灌胃合欢花10天。实验结束后,取3组大鼠的脑组织,用高效液相色谱法测定高香草酸(HVA)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的含量。结果表明,应激组大鼠日增重显著低于对照组(P=0.011);而合欢花组大鼠的日增重极显著高于应激组(P=0.002)。应激组大鼠海马、纹状体和前额叶中的HVA含量与对照组相比,虽有升高的趋势,但无显著差异;两组间的NE、DA和5-HT也无显著差异。合欢花组大鼠海马中的HVA、DA含量明显高于应激组,而前额叶中的多巴胺和5-羟色胺,以及纹状体中的5-羟色胺均明显低于应激组。这表明合欢花对慢性应激引起的大鼠生长受抑有缓解作用,对其脑内单胺类神经递质有调节作用。     

综述: 自噬参与心脏疾病调控的研究进展

细胞自噬(autophagy)是将细胞内受损、变性或衰老的蛋白质以及细胞器运输到溶酶体内进行消化降解的过程．细胞自噬既是一种广泛存在的正常生理过程,又是细胞对不良环境的一种防御机制,参与多种疾病的病理过程．正常水平的自噬可以保护细胞免受环境刺激的影响,但自噬过度和自噬不足却可能导致疾病的发生．在心脏中,心肌细胞自噬对维持心肌功能具有重要的作用,自噬的异常可能导致各种心肌疾病如溶酶体储积症(Danon disease)等．各种心血管刺激如心肌缺血(ischemia)、再灌注(reperfusion)损伤、慢性缺氧(chronic hypoxia)等均可诱导心肌细胞自噬增强．而这些情况下心肌细胞自噬的作用还不清楚：它是否是一种潜在的细胞存活机制还是导致细胞死亡或疾病发生的病理性机制,或者是同时具有两种作用,目前还没有定论．心脏疾病是心肌功能出现异常时产生的各种病理状态的总称．在多种心脏疾病中,均伴随有心肌细胞自噬的改变,且影响着疾病的发生发展．在心肌肥厚(hypertrophic cardiomyopathy)中,细胞自噬程度降低而加剧心肌肥厚;在心力衰竭(heart failure,HF)中,细胞自噬增强可导致心肌细胞自噬性死亡;而在心肌梗死(myocardial infarction,MI)中,细胞自噬增强可减小梗死面积．但是细胞自噬在心脏疾病中到底扮演着怎样的角色,取决于细胞自噬发生的水平及病理状态．目前越来越多的人开始关注药物与细胞自噬调节之间的联系,且主要集中于抗肿瘤药物及心血管调节药物的研究．另外,有报道维生素类以及雌激素受体拮抗剂他莫西芬对细胞自噬也具有调节作用．研究心肌细胞自噬与心脏疾病的关系,以及药物对细胞自噬的调节,将有利于从自噬的角度探讨心脏疾病的发生发展过程及机制,开发出治疗心脏疾病的药物．     

TRPC1和Ca2＋在帕金森病内质网应激中的作用

帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病,内质网应激在帕金森病发病过程中具有重要的作用。瞬时受体电位阳离子通道1（transient receptor potential channel 1,TRPCI）是非选择性的阳离子通道,主要位于细胞膜上,叮以调节Ca2＋的内流和抑制内质网应激所致的神经元凋亡。Ca2＋是细胞内重要的第二信使,其浓度的稳定对维持细胞的功能起着重要作用。内质网是细胞内Ca2＋储存的重要细胞器。因此,TRPCI和Ca2＋在帕金森病中起着重要作用。综述了TRPCI和Ca2＋与帕金森病内质网应激的相关进展。     

大肠埃希菌中DPS对氧应激的抵抗

DPS是一种广泛存在于原核生物中的DNA结合蛋白,它能够在细菌乏营养等多种应激状态下为细菌提供保护。大肠埃希菌DPS已经被深入研究。本文从蛋白结构和铁隔离、DNA结合,铁氧化酶活性,调节基因表达四个方面介绍大肠埃希菌DPS的基本特性和作用机制。     

利拉鲁肽下调游离脂肪酸作用下βTC3 细胞PERK 的表达

目的:探讨游离脂肪酸(FFA)作用下胰岛βTC3细胞双链RNA依赖性蛋白样内质网激酶(PERK)的表达以及利拉鲁肽(Lira)对其表达的干预作用。方法:以βTC3细胞为研究对象,分为对照组和FFA组(0.125,0.25,0.5及1 mmol/L)孵育24 h,Westernblot方法检测PERK的表达。然后,分为对照组,FFA组,和FFA+Lira组(0.5 mg/L和1 mg/L),Lira预孵育6 h后,1 mmol/L FFA继续孵育24 h,Western blot检测PERK的表达。结果:①不同浓度FFA孵育24 h后,与对照组相比,1 mmol/L FFA组PERK表达增加(P<0.05)。②与1 mmol/L FFA组相比,0.5mg/L Lira+1 mmol/L FFA和1 mg/L Lira+1 mmol/L FFA组PERK表达减少(P<0.05),两组之间有统计学差异(P<0.05)。结论:FFA作用能够上调βTC3细胞PERK的表达,而Lira在一定程度上逆转FFA水平异常导致的βTC3细胞PERK表达上调,减轻内质网应激反应。     

内质网应激预处理对人正常肝细胞缺氧再复氧损伤的保护作用

目的:研究内质网应激预处理对人肝细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:将培养的人肝细胞分为4组:正常对照(C)组、细胞缺氧复氧损伤(H/R)组、内质网应激(ER)组、内质网应激预处理(ERP+H/R)组。收集各组细胞,以流式细胞仪检测细胞凋亡,Western-bloting及RT-PCR检测内质网应激特异蛋白GRP78表达水平,并通过透射电镜观察各组细胞超微结构改变。结果:ERP+H/R组细胞凋亡率明显低于H/R组(P<0.05),ER及ERP+H/R组GRP78蛋白表达明显高于H/R组(P<0.05)。结论:内质网应激预处理对肝细胞缺氧复氧损伤具有明显的保护作用,内质网应激特异性蛋白GRP78可能在肝细胞缺氧复氧损伤中作为一种关键性的保护蛋白出现。     

抗氧化剂在糖尿病中的应用研究进展

氧化应激是自由基的促氧化与机体的抗氧化失衡造成的.自由基的高反应活性可以使细胞组分发生化学变化,并导致脂质过氧化.越来越多的证据表明:糖尿病患者体内活性氧物质明显增多,并且抗氧化防御系统功能紊乱.抗氧化剂可以降低糖尿病患者体内的氧化应激水平,清除自由基并改善抗氧化防御体系,所以将抗氧化剂应用于糖尿病是可行的.许多抗氧化剂已经用于糖尿病的研究与治疗,本文主要将作用于糖尿病的各种抗氧化剂做一综述.     

Calcineurin B-like interacting protein kinase OsCIPK23 functions in pollination and drought stress responses in rice （Oryza sativa L.）

Droughtis very harmful to grain yield due to its adverse effect on reproduction,especially on pollination proeess in rice.However,the molecular basis of such an effect still remains largely unknown.Here,wereport the role of amember of CBL(Calcineurin B-Like)Interacting Protein Kinase(CIPK)family,OsCIPK23,in pollination and stress responses in dee.Molecular analyses revealed that it is mainly expressed in pistil and anther but up-regulated by pollination,as well as by treatments of various abiotic stresses and phytohormones.RNA interference-mediated suppression of OsCIPK23 expression significantly reduced seed set and conferred a hypersensitive response to drought stress,indicating its possible roles in pollination and drought stress.In consistent,overexpression of OsCIPK23 induced the expression of seVeral drought tolerance related genes.Taken together,these results indicate that OsCIPK23 is a multistress induced gene and likely mediatesa signaling pathway commonly shared by both pollination and drought stress responses in rice.