一株高效羽毛降解菌的筛选与鉴定

将废弃羽毛制成氨基酸肥,从长期堆积腐烂羽毛的土壤中筛选出2株能降解羽毛的菌株。结果发现,其中X-Y4菌株降解羽毛的效率最高,经16S rDNA和生理生化分析鉴定为产吲哚金黄杆菌(Chryseobacterium indologenes)。以羽毛为唯一碳源和氮源,研究发酵条件对该菌株降解羽毛产可溶性蛋白的影响,通过单因素实验,确定了该菌株最优发酵条件：羽毛填量10 g/L、转速200 r/min、初始pH 9.0、接种量2%、温度35℃,在此条件下,可溶性蛋白产量为(173.27±2.95)μg/mL。将该羽毛降解菌制得的氨基酸肥分别通过叶面喷洒和灌根施加于黑叶葵扇白菜盆栽中,并对其基本指标进行测定分析。结果表明：0.2 L/m²灌根施加,对黑叶葵扇白菜的促生效果最明显,其鲜质量增加了63.48%。     

耐热糖化酶基因的克隆及其在枯草杆菌中的表达*

应用PCR技术从嗜热古生菌硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobussolfataricus)中扩增到大小约为1.9kb编码嗜热糖化酶的DNA片段,并将其插入枯草杆菌诱导型表达载体pSBPYF,获得含有该糖化酶基因的重组质粒pSGAYF,转化枯草芽孢杆菌DB1342。经蔗糖诱导后,该糖化酶在枯草杆菌DB1342(pSGAYF)中获得胞外分泌表达,酶活为3.6U/mL,最适温度为90℃,最适pH6.0。     

合成乙醇重组乳杆菌的研究

将含有Zymomonas mobilis乙醇合成途径的关键酶基因的片段Ptac-pdc和Ptac-adhB,分别/同时接入pHY300PLK以及pBBR1MCS-5载体中,得到了pHY-PA、pBBR-PA等重组质粒,分别转化入几株乳杆菌。在42℃下进行乙醇发酵试验,结果表明:在Lactobacillus plantanum CICIM B0080中同时引入基因pdc、adhB有效地将碳代谢流导向了产乙醇方向,重组菌B0080(pHY-PA)发酵6.7%葡萄糖60h分别产生0.4%(V/V)乙醇,为原始菌B0080的67倍;而将pdc、adhB基因同时引入L.amylovorus B0112和L.acidophilus B0068,能检测到相当于原始菌2倍的乙醇产出。在重组菌发酵过程中,仍有大量的乳酸产出,在引入产乙醇基因的同时敲除乳酸脱氢酶基因,将有可能使乳杆菌的代谢流向更有效地转向产乙醇途径。     

柄杆菌对固氮蓝藻生物量及色素的影响

柄杆菌对固氮蓝藻生物量和色素的影响研究结果表明:多态柄杆菌(Caulobacter polymorphus)017-41或新月柄杆菌(Caulobacter creseentus)CB_2的活菌、死菌及破碎细胞悬液分别与鱼腥藻(Anabaena)、念珠藻(Nostoc)不同藻珠混合培养时,试验组生长量均优于对照组;对衰老黄化的藻培养物的生长刺激作用尤为显著;试验组藻培养物的藻蓝或藻红素含量亦明显高于对照组。其作用机理尚待进一步阐明。     

海鲍分离微生物Acinetobacter sp.酯酶基因的表达和酶学性质

【目的】克隆源于海鲍内脏中一株不动杆菌Acinetobacter sp.的酯酶基因estA,并对其进行重组表达和性质研究。【方法】利用分子生物学技术克隆出酯酶基因estA并构建pPICZα-C-estA重组表达载体,并通过电转化方法将重组质粒转入毕赤酵母X33中;通过甲醇诱导培养重组菌获得重组酯酶,并对重组酯酶进行生化表征。【结果】克隆得到的estA基因序列全长912 bp,编码304个氨基酸;重组X33发酵上清液中酯酶酶活力达到1 200 U/L,重组酯酶的分子量约为33.7 kD;酶学性质研究表明重组酯酶催化底物对硝基苯乙酸乙酯水解反应的最适pH和温度为8.0和40?C,在pH 8.0-10.0温度及小于60?C时具有较好的稳定性。【结论】成功克隆了海洋来源的不动杆菌酯酶基因并在Pichia pastoris中实现了高效表达。     

地震中的传染病——气性坏疽

什么是气性坏疽 气性坏疽是由梭状芽胞杆菌所引起的一种严重急性感染.感染的伤口内肌肉坏死,呈暗红色或土灰色,失去弹性,并出现大小不等的水泡气体,积聚在组织间隙内,压迫伤口边缘,有时整个肢体发生水肿、变色、厥冷和坏死.由于细菌外毒素引起的严重毒血症,患者进而出现休克和多脏器功能衰竭而死亡.     

鲍曼不动杆菌感染的呼吸机相关肺炎20例

目的 了解我院NICU内鲍曼氏不动杆菌感染呼吸机相关肺炎的情况,探讨有效预防和控制的该类感染的措施。方法 收集我院NICU内2006.1-2007.2之间发生呼吸相关肺炎病通过细菌培养确定为鲍曼氏不动杆菌感染的患儿的临床资料以及该菌的药敏试验结果进行分析。结果 鲍曼氏不动杆菌是呼吸机相关肺炎的主要致病菌之一,其流行情况复杂,并且出现了耐碳青酶烯类的菌株感染,可造成严重的不良后果。结论 预防该菌在NICU内导致感染需要引起临床工作者更多的重视,加强对其定植情况的监测是预防其感染和流行的重要措施,对该菌开展及分子流行病学的深入研究将有助于指导NICU内NI防治。     

内生解淀粉芽孢杆菌CC09产Iturin A摇瓶发酵条件优化

【目的】提高内生解淀粉芽孢杆菌CC09发酵产抗菌脂肽Iturin A的产量。【方法】首先采用单因子实验研究了碳源、氮源、NaCl浓度、pH、温度、转速和装液量等因子对CC09产Iturin A能力的影响,然后对其中显著性因子:氮源浓度、pH、温度及装液量4个因素进行正交实验,进一步优化发酵条件。【结果】优化培养基组成及发酵条件可以提高CC09菌株的生长速度及产Iturin A的量,其中可溶性淀粉以及一定比例的蛋白胨和酵母粉是CC09菌株产Iturin A的良好碳源和氮源;培养温度、装液量、培养液pH等也对CC09菌株产Iturin A有显著影响。优化后的培养基成分:可溶性淀粉(碳源)5 g/L、比例为3:1的胰蛋白胨酵母粉混合氮源15 g/L、NaCl 1 g/L;最佳培养条件:pH 6.0、28°C、摇床转速120 r/min、培养瓶装液量20%。【结论】在此条件下,Iturin A的产量可达到690 mg/L,较优化前的138 mg/L提高了4倍。     

气体环境对厌氧益生菌乳双歧杆菌V9菌株生长影响的研究

<正>乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)V9菌株分离自健康蒙古族儿童肠道,已被广泛应用于开发各类益生菌产品[1]。由于双歧杆菌为厌氧菌[2],因此培养和保存时的气体环境会影响其活菌数量和益生功效,也成为该菌实现产业化道路上必须关注的重要环节。本刊于2012年第7期刊登了其木格苏都、张和平等的文章"不同气体环境对益生菌Bifidobacterium lactis V9生长的影响"[3]。作者对该菌在不同气体环境中的生长代谢特性进行了系统研究,明确了在有微量二氧化碳和氧气存在的环境下更有利于其生长。该研究为提高乳双歧     

一株海洋低温葡萄糖氧化酶菌株的筛选、鉴定及部分酶学性质

【目的】从海洋样品中分离筛选出产葡萄糖氧化酶菌株。【方法】采用双层平板筛选法进行初筛、复筛确定一株酶活较好的菌株,命名为GOD2(Glucose oxidase)。通过形态学、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析研究其分类地位,并对其产生的葡萄糖氧化酶进行分离纯化和部分酶学性质的研究。【结果】细菌GOD2为产葡萄糖氧化酶菌株且遗传稳定,初步鉴定该菌株为假单胞杆菌(Pseudomonas migulae),其所产酶最适反应温度为20°C,热稳定性较差,40°C剩余相对酶活80%;超过40°C酶活力迅速下降。【结论】GOD2是一株极具研究价值的产低温葡萄糖氧化酶菌株。目前没有关于利用该菌生产葡萄糖氧化酶的报道。