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本文报道荧光染料双苯并咪唑Hoechst 33258(bisbenzimlde),应用于香菇(Lentinusedodes)、平菇(pleurotus ostreatus)、金针菇 (Flammulina velutipes)、木耳(vAurtculariaaurieula),毛木耳(A.Polytricha)等5种食用菌菌丝体。担孢子、分生孢子核的荧光染色研究。配制染液的Mcllvaine缓冲液pH值、缓冲液含0.6M MgSO4·7H2O、菌丝生长期、孢予贮存期亦与染色效果密切相关。我们观察到,使用插片法,爬片2/5的菌丝体,pH7.0一7.4 Hoechst 33258染液,染色3分钟为菌丝体核荧光染色的最佳效果。新鲜的担孢子,分生孢子、使用pH 6.8含0.6 M MgSO4·7 H2O Hoechst 33258染色液染色3分钟比使用pH 6.8 Hoechst 33258的染液有明显增效作用。 相似文献
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采用NCBI提供的BLAST软件在线检索SeMNPV特异性基因ORF22、ORF40,并将其构建到pMD18-T载体上。以纯化的pMD18-T-ORF22、pMD18-T-ORF40质粒为标准样品,已计数野生型SeMNPV的基因组作对照,用荧光定量PCR检测样品中SeMNPV多角体含量。荧光定量PCR检测得到标准曲线方程为con=10(-0.282CT 9.965)(相关系数:R2=0.9997)和con=10(-0.296CT 9.945)(相关系数:R2=0.9995)。测得一个SeMNPV多角体包含102核酸分子,检测到SeMNPV复合剂包含633PIBs/mg、691PIBs/mgSeMNPV多角体,两者结果一致。与复合剂中SeMNPV实际含量相符。 相似文献
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活性氧(reactive oxygen species, ROS)是植物体内的一把“双刃剑”。ROS作为信号分子在植物生命活动中发挥关键作用, 但ROS过量积累会对生物大分子造成氧化损伤。准确测定ROS含量对于评估植物细胞内的氧化还原状态至关重要。由于植物体内ROS各组分半衰期短且反应活性强, 定性定量检测较为困难。因此, 选择合适的检测方法以提高检测的时空准确性非常重要。目前, 荧光分析法因其具有灵敏度高、选择性好、检出限低和直观性强等优点, 受到研究人员的广泛关注。该文详细描述基于流式细胞仪和激光共聚焦显微镜, 利用2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2DCFDA)荧光探针检测水稻(Oryza sativa)体内ROS水平和时空分布的操作流程及注意事项。该技术也可用于直接检测拟南芥(Arabidopsis thaliana)、玉米(Zea mays)和大豆(Glycine max)等模式植物组织中ROS的水平和分布。 相似文献