心肌内向整流钾离子通道的分子机制

心肌内向整流钾电流对维持静息电位和心肌的兴奋性有重要作用,１９９３年以来,多种内向整流钾通道（Ｋｉｒ）克隆成功,为探明通道的结构特性和内向整流的产生机理创造了条件,Ｋｉｒ肽链含两个跨膜段（Ｍ１,Ｍ２）４条肽链聚合成一个功能单位,内向整流是胞内Ｍｇ＾２＋和多聚胺与通道负电荷区域相互作用的结果,此区域可能与Ｍ２和Ｃ末端有关,这些进展为探讨通道的功能调节和新药设计提出了新的思路。     

锌离子对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元GABAA受体介导电流的？…

采用制霉菌素膜片箝 技术,研究了锌离子对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元ＧＡＢＡＡ受体介导电流的作用。     

神经元钙激活钾电流的特征和功能

钙激活钾电流是由动作电位激活的一类外向钾电流,它是由不同类型的钙激活钾通道所介导。钙激活钾电流参与动作电位复极化和后超极化的电位的形成,并通过调节神经元的放电频率和影响神经元的放电类型参与神经元的多种上生理功能。     

钙依赖型蛋白激酶调节保卫细胞膜内向钾离子通道的实验证据

保卫细胞内钙离子浓度的变化对气孔保卫细胞质膜上的内向钾离子通道活性有显著调节作用,而钾离子通道活性的变化可导致细胞渗透压的改变,进而调节气孔的开闭运动。然而,钙离子通过何种机制实现对钾离子通道的调节尚不清楚。作者利用膜片钳全细胞记录方法探讨了钙依赖型蛋白激酶（ＣＤＰＫ）是否参与了钙离子调节保卫细胞钾离子通道的信号转导过程。当胞内钙离子浓度为１．５μｍｏｌ／Ｌ时,保卫细胞全细胞内向钾电流被抑制约６０％;同时加入ＣＤＰＫ的底物组蛋白ⅢＳ或ＣＤＰＫ的底物竞争性抑制剂鱼精蛋白可完全逆转钙离子的作用;但在胞内同时加入纯化的ＣＤＰＫ蛋白则可进一步促进钙离子对保卫细胞内向钾电流的抑制。研究结果初步证明,ＣＤＰＫ介导了钙离子调节保卫细胞内向钾离子通道的信号转导过程     

乙型肝炎病毒表面抗原基因在异源细胞中的表达研究

本研究构建了一系列乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的表达载体,其中HBsAg基因的启动区被小鼠金属硫蛋白启动子取代;而对HBsAg基因下游非编码区的几种基因元件则进行了不同的删除,并且添加异源基因调控元件。利用Hela细胞瞬时表达系统对各种构建物的表达水平进行分析。实验发现：除了必须取代HBsAg基因原有的启动子外,乙型肝炎病毒(HBv)增强子Ⅰ及其多聚腺苷酸化(poly A)信号对HBsAg在非肝脏细胞中表达也至关重要。但HBsAg的poIy A信号可用异源的poly A信号及猴空泡病毒(sV 40)T抗原基因的剪接信号取代。在HeLa细胞表达系统中,这种取代可进一步提高HBsAg的表达水平。反之,HBV增强子Ⅱ在HeLa细胞中对HBsAg基因的表达无显著作用。实验结果提示：除了已报道的HBV增强子Ⅰ能激活基因本身的启动子外,很可能还存在另外的功能,即对HBsAg转录体起稳定作用。     

植物生物反应器优化策略与最新应用*

随着分子生物学和植物基因工程的迅猛发展以及分子医药和现代农业等学科的交叉融合,植物生物反应器已成为分子医药农业的核心内容。利用植物生物反应器生产抗体、疫苗和功能性食品,具有规模化、成本低、安全性高、周期短等优势。2022年2月,加拿大卫生部批准了新型冠状病毒疫苗Covifenz^®,这是世界首款植物源人体疫苗,标志着以植物生物反应器为代表的分子医药农业时代的来临。综述植物叶片和种子等代表性的植物生物反应器类型,分析瞬时表达系统和稳定表达系统的构建原理和应用,探讨通过启动子和密码子优化、糖基化过程“人源化”、基因沉默抑制和蛋白酶作用抑制等优化植物生物反应器的策略,总结国内外抗体、疫苗和功能性食品等植物源产品的开发进展,以期为我国植物生物反应器的研究及其在分子医药领域的应用提供参考。     

坤复康片联合阿莫西林克拉维酸钾对慢性盆腔炎患者血液流变学、红细胞免疫功能和炎症因子的影响

摘要 目的：探讨坤复康片联合阿莫西林克拉维酸钾对慢性盆腔炎患者血液流变学、红细胞免疫功能和炎症因子的影响。方法：采用随机数字表法将我院2021年4月~2022年4月期间收治的98例慢性盆腔炎患者分为对照组（阿莫西林克拉维酸钾干混悬剂治疗,n=49）和研究组（坤复康片联合阿莫西林克拉维酸钾干混悬剂治疗,n=49）。对比两组症状好转时间、血液流变学、红细胞免疫功能和炎症因子水平,观察两种用药方案的安全性。结果：研究组的下腹疼痛、腰骶疼痛、白带量多、经期量多等临床症状好转时间均短于对照组（P<0.05）。研究组治疗14 d后全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度、纤维蛋白原水平低于对照组（P<0.05）。研究组治疗14 d后血红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）高于对照组,免疫复合物花环率（RBC-ICR）低于对照组（P<0.05）。研究组治疗14 d后血清C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-17（IL-17）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率对比无差异（P>0.05）。结论：坤复康片联合阿莫西林克拉维酸钾可通过改善慢性盆腔炎患者的血液流变学、炎症因子、红细胞免疫功能来改善临床症状,具有较好的临床疗效。     

柠檬酸铁铵对悬浮HEK293细胞转染的影响机制探究

基于聚乙烯亚胺（polyethyleneimine, PEI）的悬浮人胚胎肾细胞（human embryonic kidney 293 cells, HEK293）转染技术前景广阔,但培养基组分会影响转染效率。简单的离心换液存在污染风险,且影响细胞状态。探究抑制转染效率的关键组分对转染过程的影响机制,有利于从根本上解决该问题。首先通过探究培养基中对转染效率具有潜在影响的组分确定关键组分柠檬酸铁铵（ferric ammonium citrate, FAC）的抑制作用,然后通过考察柠檬酸铁铵添加对细胞状态、PEI与DNA形成的复合物（PEI-DNA complex, PEI-DNA复合物）结合情况、目的基因表达情况的影响,分析其抑制转染效率的机制。结果表明,高浓度的柠檬酸铁铵对细胞转染存在明显抑制作用,且该抑制作用随着柠檬酸铁铵浓度的升高而逐渐增强。当柠檬酸根和铁离子同时存在时才会抑制细胞转染过程。过高浓度的柠檬酸铁铵使PEI-DNA复合物的粒径显著增加,复合物进入细胞更加困难,导致进入细胞的复合物数量减少,最终引起细胞转染效率的大幅下降。柠檬酸铁铵通过影响PEI-DNA复合物的大小限制D...     

羊草草原植物－土壤之间主要营养元素动态的研究

羊草草原土壤中Ｎ、Ｐ、Ｋ含量的季节变化规律是生长季初期较高,６－８月生长旺季较低,生长季末再度升高。营养元素在植物体内的分配是地下部分大于地上部分。地下部分Ｎ的贮量为地上部分的３．６倍,Ｋ为２．９倍,Ｐ为２．８倍。地上部分３种元素含量的季节变化曲线呈单峰型,从生长初期开始上升,最大值出现在８月,生长末期逐渐下降。地下部分的季节变化规律,大体上在整个生长季内呈上升趋势,随着根系的生长,营养元素的积累量不断增加。对植物－土壤之间营养元素动态分析结果表明,随着时间的推移,Ｎ、Ｐ、Ｋ在备状态中的比例趋于恒定。在稳定状态下,３种元素在土壤中的比例逐渐减少,与初始量相比Ｎ、Ｐ、Ｋ的含量分别减少２１．２３％、５．１４％和２．９９％。在其它状态中,３种元素的含量均有提高,特别在枯枝落叶和死根中增加的幅度较大。