AngⅡ对培养新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及丝裂素活化蛋？…

本研究目的在于探讨丝裂素活化蛋白激酶是否在ＡｎｇⅡ诱导的培养新生大鼠心肌成纤维细胞的增殖反中起重要作用。     

3，4苯并芘对内皮祖细胞生物学功能的影响

目的研究3,4苯并芘（BaP）对人脐血来源的内皮祖细胞（EPC）生物学功能的影响。方法密度梯度离心法分离获取人脐血单个核细胞,采用贴壁培养法培养MNC中的EPC,通过Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-ac-LDL）摄取实验和FITC标记的植物凝集素（FITC-UEA-I lectin）结合实验鉴定细胞。消化收集第3代细胞,分别采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、黏附能力测定实验、Transwell小室法及Matrigel体外成血管试验观察BaP对EPC增殖能力、粘附能力、迁移能力及成血管能力的影响,并检测各组细胞培养上清液SOD含量。采用单因素方差分析及LSD-t检验进行统计学分析。结果采用贴壁培养法能成功培养出EPC;与正常对照组相比,BaP呈浓度依赖性降低EPC的增殖能力{正常对照组OD（1.02±0.04）显著高于BaP各组[BaP①组OD（0.66±0.04）,BaP②组OD（0.55±0.04）,BaP③组OD（0.35±0.05）,均P〈0.01],BaP染毒组间增殖能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）};与正常对照组比较,BaP呈浓度依赖性降低EPC的黏附能力{正常对照组[（117.50±17.16）个/200倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（80.00±14.46）个/200倍镜,BaP②组（66.00±9.06）个/200倍镜,BaP③组（49.80±10.72）个/200倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间黏附能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.05）};与正常对照组相比,EPC的迁移能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[（46.10±4.51）个/400倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（35.50±4.95）个/400倍镜,BaP②组（26.80±4.08）个/400倍镜,BaP③组（19.50±2.84）个/400倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间迁移能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）};与正常对照组比较,EPC的成血管能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[（33.20±3.70）个/100倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（22.00±3.39）个/100倍镜,BaP②组（16.20±2.59）个/100倍镜,BaP③组（10.80±2.39）个/100倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间成血管能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.05）}。同时细胞培养上清液中SOD的活力也呈BaP浓度依赖性地降低{正常对照组[（22.6±2.19）U/ml]高于BaP各组[BaP①组（15.94±1.68）U/ml,BaP②组（12.5±1.58）U/ml,BaP③组（6.9±1.55）U/ml,均P〈0.01],BaP染毒组间SOD活力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）}。结论 BaP体外诱导显著影响EPC的多种生物学功能,其机制可能与氧化损伤有关。     

生物进化速率

生物进化的速率 ,是由其所属的大门类的特性及所处的地质时代所决定 ,因为 ,古生物学家已发现在地球历史中 ,生物的演化具有一个加速度 ,愈是高等的生物 ,其演化速率愈快。对不同的生物 ,其演化速率也是千差万别的。演化速率最终是以单位时间内有多少新物种形成来衡量的 ;而成种速率在某些程度是受生物繁衍速率所决定的。一、进化速率及成种速率进化速率必然影响成种速率 ,成种速率是进化速率的量化体现。从速率方面 ,成种作用可分为两大类 :１）传统的渐变成种 :这要经历很多世代才能实现 ,几乎是难以观察到的 ;２）瞬时成种 :在动物中 ,向…     

应用皮电检测新技术探索人体应激时的皮电响应

近年来,皮肤电作为反映情绪状态的一个敏感指标,引起了人们的广泛关注。为了研究情绪对皮肤电的具体影响．本研究用皮电检测仪（EDSD）的“能量过筛”技术,检测被试应激前后的皮肤电阻和电容的变化,提出了用皮肤电的综合情况来表征人体调节能力的概念。试验采用音乐、噪声、静息为应激源,让被试接受10min的刺激,并在刺激前后进行“能量过筛”,统计结果显示：（1）人体在应激前后的皮肤电的综合情况变化具有显著差异;（2）音乐可以调节人体的生理状态,而噪声则对人体十分有害;（3）在应激前后配以POMS心境量表检测被试的心理指标,以及对心率、血压生理指标的测量,也从不同水平上证实了不同的应激源对心理和生理指标的影响。     

山羊品种间体细胞核移植研究

萨能奶山羊是著名的奶用山羊品种,波尔山羊则是世界著名的肉用山羊品种.为了研究波尔山羊体细胞在奶山羊卵母细胞中的去分化,我们将成年波尔山羊的颗粒细胞或耳皮肤成纤维细胞作为供核细胞(试验组),移入奶山羊中Ⅱ期的去核卵母细胞透明带下,经电融合和离子霉素与6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活,直接移入同期发情奶山羊输卵管或经体内培养,将发育的重构胚移人同期发情羊子宫内.妊娠早期作B超诊断,确立妊娠的观察至足月.同时将奶山羊的35日龄胎儿成纤维细胞作供核细胞(对照组),按试验组同样方法处理,将重构胚直接移入同期发情的奶山羊输卵管内.结果试验组,波尔羊颗粒粒细胞与耳皮肤成纤维细胞的融合率分别为78.2%(115/147)、57.4%(116/202),重构胚卵裂率为85.8%(115/134),桑椹胚、囊胚的发育率38.8%(52/134),早期妊娠三头,分别于妊娠40、60、60日龄终止妊娠.对照组,融合率为89.5%(136/152),早期妊娠率为42.9%(6/14),四头受体足月分娩,产四头公羊羔,其中三头存活,一头分娩时死于肺不扩张,并体重过大,显示胎儿过大综合症.经基因型鉴定证实,这四头克隆羔羊均源于同一胎儿成纤维细胞系.以上结果表明,波尔羊体细胞核在奶山羊卵母细胞中能够去分化,并维持一定程度的发育.     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜细胞内核心蛋白多糖基因表达的影响

利用外源性碱性成纤维细胞生长因子(Basic Fibroblast Growth Factor,bFGF)刺激体外培养的人正常牙周膜细胞.采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞内decorin的基因表达的变化,研究bFGF对体外培养的人牙周膜细胞内核心蛋白多糖(decorin)的作用,进一步探讨bFGF抑制Ⅰ型胶原的作用机制.发现bFGF刺激牙周膜细胞后能促进牙周膜细胞的增殖,bFGF抑制decorin的合成是bFGF促进牙周膜细胞增殖的重要调节因素之一.     

原子力显微镜对人羊膜间充质干细胞成脂分化的观察

观察人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)成脂分化前后超微结构及其机械性能的变化,以期进一步了解hAMSCs在体外成脂分化的过程。用流式细胞仪分析细胞表面分子表达情况,油红O染色检测hAMSCs成脂分化情况,原子力显微镜观察(AFM)分化前后超微结构及机械性能的变化等。结果显示,流式细胞检测显示,CD34,CD45,HLA-DR,呈阴性表达,CD29,CD90呈阳性表达;油红O染色可见脂肪细胞胞质中有大小不等的圆性红色脂肪滴;AFM观察诱导后的hAMSCs表面有脂滴状的颗粒,粘弹力增大,硬度减小。运用AFM可以清晰观察到诱导前后形貌及机械性能变化。     

《免疫学杂志》：科学家建立基因敲除免疫缺陷小猪模型

近期,中科院广州生物医药与健康研究院的科学家成功建立了基因敲除免疫缺陷小型猪模型。该成果日前在线发表在《免疫学杂志》上。 广州生物院赖良学团队利用TALEN技术在小型猪中敲除了RAG基因,获得了重症联合免疫缺陷小型猪模型,研究人员对猪的胎儿成纤维细胞进行转染后获得杂合和纯合的RAG1／2敲除的细胞克隆。细胞克隆用于体细胞核移植后获得27头克隆猪,其中有10头为RAG2单等位碱基缺失,9头为RAG1双等位碱基缺失,3头为RAG2双等住碱基缺失,这些碱基缺失都导致了外显予读码框移码。敲除猪表现出典型的重症联合免疫缺陷疾病特征,包括胸腺萎缩,脾脏发育不良,淋巴细胞减少等。     

5’核苷酸酶碱性磷酸酶双重染色法在毛细淋巴管研究中的应用

本文应用5’-N-ALP双重染色法观察了裸鼠皮肤及人胃癌组织内淋巴管的形态和细微分布.在光镜下毛细淋巴管、淋巴管呈5’-N强阳性反应,管壁显示明显的棕色或深棕色,而毛细血管、血管的ALP呈强阳性,管壁呈明显的蓝色.据此可用组化方法将毛细淋巴管和毛细血管区别开来.本法能显示呈褐色的毛细淋巴管,特别是呈实性条索状的毛细淋巴管,因而双重染色比HE染色更能客观、准确地显示毛细淋巴管的分布.     

光学相干层析成像技术用于裸鼠皮肤霉菌感染研究

利用中心波长为850 nm的宽带光源SLD实现了纵向分辨率为8μm的光学相干层析成像系统。系统采用傅里叶域光学延迟线实现了深度扫描速度为160 mm/s,成像深度为3 mm。获得了裸鼠皮肤霉菌感染部位和健康皮肤的光学相干层析(optical coherence tom ography,OCT)图像,皮肤病变前后的内部结构信息清晰可见。