苏云金芽胞杆菌产苏云金素菌株CT-43及其 缺失突变株的差异蛋白

[目的]苏云金素(Thuringiensin)的合成和代谢途径的相关研究在国内外一直进展缓慢,本文拟从蛋白质组水平揭示与苏云金素合成或代谢相关的蛋白.[方法]利用双向电泳技术研究了高产苏云金素的苏云金芽胞杆菌野生菌株CT-43、其高产突变菌株CT-43-1C及不产突变菌株BMB0806在蛋白表达水平的差异,然后对差异蛋白点进行质谱鉴定,最后对鉴定出的蛋白进行生物信息学分析.[结果]与野生型和高产菌株相比,在BMB0806中发现了13个差异显著的蛋白点,鉴定出了其中的9个,生物信息学结果显示有6个蛋白可能与苏云金素合成或代谢相关.[结论]通过蛋白质组研究找到了6个可能与苏云金素合成或代谢相关的蛋白,为苏云金素合成基因簇的克隆和合成途径的验证提供了有力的证据.     

酸性α-淀粉酶生产菌株的选育的初步研究

从淀粉厂的酸性土壤中筛选得到一株生产酸性α-淀粉酶的野生菌,YX-1。此菌株具有较高的产酶能力,初步鉴定为Bacillus stearothermophilus。YX-1能够生产两种α-淀粉酶,在其发酵过程中具有两个产酶高峰,提取两个产酶期的粗酶EI和EII,经特性分析发现两种酶的最适pH值分别为4.5和5.0,最适温度均为60℃。     

枯草芽孢杆菌α乙酰乳酸脱羧酶基因在啤酒酵母工业菌株中的表达

啤酒酿造中,双乙酰是影响啤酒生产熟化期长短及其风味的主要因素.存在于多种细菌中的a-乙酰乳酸脱羧酶(EC4.1.1.5,简称a-ALDC)[1]能将双乙酰的前体a-乙酰乳酸直接转化为对啤酒风味没有影响的乙偶姻,从而大大降低啤酒中双乙酰的含量,缩短啤酒熟化期.但所有的啤酒酵母菌不产生此酶.虽然在发酵过程中添加此酶是一个解决的途径,但解决问题的根本是将ALDC基因引入到啤酒酵母菌中.国外已开展这方面的研究[2,3],本研究组曾用随机克隆的方法获得了枯草芽孢杆菌a-ALDC基因[4],本文报道了枯草芽孢杆菌ALDC基因在工业用啤酒酵母中的表达研究结果.     

激光诱变青霉PT95原生质体选育类胡萝卜素高产菌株

采用激光对青霉PT95菌株的原生质体进行了诱变处理,选育到一株菌核生物量和类胡萝卜素含量均有显提高的突变菌株L05。与出发菌株相比,L05菌株的菌核生物量提高了98.6%,菌核中的类胡萝卜素含量提高了28.3%,在查氏平板上的类胡萝卜素产率提高了154.0%。所选育的L05菌株经3次传代培养,菌落没有发生扇形变异,菌核生物量和类胡萝卜素含量没有明显改变,说明该菌株具有良好的遗传稳定性。     

有机浮渣降解菌株的筛选及初步研究

通过筛选三株能降解烃类菌株及浮渣成分的化学分析,对炼油厂有机浮渣有较好的处理效果。并对其降解最适条件进行了系列研究,结果：将有机浮渣按一定比例稀释,按10%接种量添加混菌溶液,35℃摇瓶培养2d,降解率达90%以上。     

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)培养特征多样性与寄主及地理来源的相关性分析

球孢白僵菌不同菌株微观萌发特征及宏观培养特性表现出高度的多样性,2个性状集团经主成分分析后,得到微观萌发特征的主因子为单芽管萌发孢子比例、芽管总平均长度及芽管整齐度;宏观培养性状的主因子分别为察氏培养基上的菌落颜色、菌落基质颜色、菌落生长速率及液体培养液的pH值。由主因子指标进行典型相关分析,两性状集团总体相关不显著(p=0.1378),但菌落生长速率与单芽管萌发孢子比例及芽管总平均长度表现出显著的相关性。由主因子指标进行的聚类及Shannon-Wiener多样性指数统计表明,相同地理来源菌株间的相似性程度高于相同分离寄主间的菌株相似性。     

虾青素高产菌株的选育

采用激光（Laser）、紫外线（UV）、亚硝基胍（NTG）及其复合诱变法夫酵母菌,再用高浓度葡萄糖培养基选育经复合诱变的法夫酵母菌。结果表明：与原始出发菌相比,菌株经诱变后其虾青素产量有显著提高,其中复合诱变的是青素产量可达7.26μm/ml。诱变高产菌株遗传稳定性好。     

不同菌株同态发酵玉米秸秆生产饲料蛋白的比较研究

利用24株能够降解纤维素和木质素的菌种对玉米秸秆粉进行单菌株发酵、多菌株组合发酵以及不同氮源发酵生产饲料蛋白的比较研究。结果表明。结果表明：24株单菌株发酵中F－21的发酵产物真蛋白含量最高（平均为7．64％）;以F－5,F－17,F－21和F－24组成的多菌株发酵体系,经3d发酵后,发酵产物粗蛋白含量由2．80％提高到10．07％比原料本身的粗蛋白含量高259．6％;粗纤维含量由38．17％降低到36．07％,氨基酸总量由2．1％增加到5．7％,比原料本身高171．4％,且氮基酸种类齐全;尿素和（NH4）2SO4的添加量与发酵产物真蛋白含量的关系呈抛物线,对相同添加量以尿素效果较好,而在尿素中,2％的添加量为最好,聚类分析将24株单菌株发酵后真蛋白含量和对照分为4组,其中G3{F-1,F-21}发酵效果最好,G1{F-3,F-5,F-7,F-8,F-12,F-13,F-15,F-17,F-19,F-20,F-22}次之,G2{F-2,F-4,F-9,F-10,F-11,F-14,F-18,F-18,F-23,F-24}较差,G4{对照,F－16}最差。试验结果表明,由F－5,F－17,F－21和F－24组成的多菌株发酵体系为发酵秸秆生产饲料蛋白的优良菌株。     

发酵甜高粱计耐高浓度酒精酵母菌的选育

采用负染色计数法从非自然诱变菌株中成功地选育一株以C4植物甜高粱汁做基质发酵生产液体生物燃料（酒精）的酵母菌株,产酒率最高达12．80％（V／V）。     

高产突变微生物氨基酸产生的动力学

本文用于做模型的实验数据是从已报道的十种不同高产突变微生物产生九种不同氨基酸的文献中获得的。文中的数学模型有助于我们更好地了解氨基酸发酵的共同概况,而这一点在过去只通过测定数据资料而无法得到重视。我们发现Luedeking-Piret模型对于阐述所有的氨基酸产生数据都是正确的。这一结果表明了所有有关的突变微生物氨基酸产生方式之间的类似性。结果同样表明了突变微生物氨基酸产生主要是非伴随生长的;并且同样说明配给微生物的基质主要用于生物量和氨基酸的产生。当微生物达到生长静止期时,氨基酸产生方式不变;但当基质被耗尽时,产物立即停止产生。