琅琊山虫生真菌物种多样性和季节变化

在皖东琅琊山自然保护区设置的20个样方中共采集672份虫生真菌标本,分属于4科8属20种.优势种依次为球孢白僵菌、粉拟青霉、环链拟青霉、布氏白僵菌和玫烟色拟青霉,其中球孢白僵菌占绝对优势,相对多度高达73.8%.选用物种多度、Shannon-Wiener指数H′和Pielou均匀度E对琅琊山虫生真菌物种多样性和季节分布进行研究发现,虫生真菌数量丰富但物种多样性指数较低;夏季虫生真菌菌株最为丰富,均匀度相对较低,随着气温及降雨量的下降,菌株数量急剧下降,均匀度相对较高;不同季节白僵菌属的数量波动大,但拟青霉属波动较小.     

含水量与温度对球孢白僵菌孢子粉贮存寿命的影响及模拟分析

将含水量 1 12 %、4 73%、7 2 3%、9 84 %及 14 11%的球孢白僵菌BeauveriabassianaSG870 2分生孢子粉在4℃和 2 5℃下黑暗贮存 18个月 ,定期检测活孢率 ,以确定孢子粉的贮存寿命。结果显示 ,各温度处理中含水量显著(P <0 0 5 )影响孢子贮存期间的活孢率。在 4℃下 ,含水量为 1 12 %～ 9 84 %处理的活孢率在头 16个月均稳定在91%以上 ,且相互间差异不显著 ;次高含水量处理的活孢率在第 18个月才显著低于其它较低含水量处理 ;高含水量处理的活孢率则从第 6个月起显著低于其余较低含水量处理 ,第 12个月时降至 2 4 2 %。而在 2 5℃下 ,第 3和第 6个月的活孢率在不同含水量处理间均呈极显著差异 (P <0 0 1) ,即随含水量升高而显著下降 ,次高含水量处理在第6个月的活孢率仅剩 17 6 %。贮存期间活孢率对贮存时间和孢子粉含水量的依赖关系很符合改进的存活衰变模型(r2 >0 85 )。根据拟合的模型预测 ,在 4℃下贮存 ,若保证活孢率 90 % ,12 %含水量的孢子粉可贮存 7 3个月 ,10 %为 11 2个月 ,9%为 14 9个月 ,8%为 2 1 0个月 ,7%为 33 0个月 ,6 %达 6 5 5个月 ,故孢子粉冷贮的含水量应控制在8%以下。若在 2 5℃下贮存并保证活孢率 80 % ,含水量 10 %的孢子粉仅可贮存 1 7个月 ,8%为 2 3个月 ,6 %为 3 0个     

家蚕抗真菌因子BmSPI39对球孢白僵菌入侵的表达响应

[目的]制备家蚕Bombyx mori抗真菌因子BmSPI39的多克隆抗体,分析BmSPI39对球孢白僵菌Beauveria bassiana入侵的表达响应.[方法]利用原核表达和固定化镍离子亲和层析技术获得高纯度的BmSPI39重组蛋白,利用胶内活性染色检测重组蛋白BmSPI39对枯草杆菌Bacillus subti...     

三种森林生态系统昆虫病原真菌优势种生态位比较

研究了天然阔叶林、天然阔叶次生林和马尾松人工纯林3种不同森林生态系统中昆虫病原真菌优势种的数量组成及生态位宽度和生态位重叠值.结果表明:球孢白僵菌在这3种森林生态系统中分别为第三、第一和第二优势种.该菌在3种森林生态系统中的营养生态位宽度和时间生态位宽度均最大,远大干环链棒束孢、粉棒束孢和细脚棒束孢等优势种;该菌与其他优势种的时间生态位重叠值较大,而营养生态位重叠值较小.球孢白僵菌在3种森林生态系统中都是发生时间最长、寄主昆虫最丰富、适应环境能力最强的昆虫病原真菌.     

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)培养特征多样性与寄主及地理来源的相关性分析

球孢白僵菌不同菌株微观萌发特征及宏观培养特性表现出高度的多样性,2个性状集团经主成分分析后,得到微观萌发特征的主因子为单芽管萌发孢子比例、芽管总平均长度及芽管整齐度;宏观培养性状的主因子分别为察氏培养基上的菌落颜色、菌落基质颜色、菌落生长速率及液体培养液的pH值。由主因子指标进行典型相关分析,两性状集团总体相关不显著(p=0.1378),但菌落生长速率与单芽管萌发孢子比例及芽管总平均长度表现出显著的相关性。由主因子指标进行的聚类及Shannon-Wiener多样性指数统计表明,相同地理来源菌株间的相似性程度高于相同分离寄主间的菌株相似性。     

球孢白僵菌凝乳弹性蛋白酶(BbPr1)的纯化与特性*

以几丁质为底物,加入基本盐培养基中,诱导球孢白僵菌（Beauveriabassiana）产生分解昆虫表皮的蛋白酶。诱导物中,蝉蜕诱导的蛋白酶总活性、比活较高,经超滤、离子交换层析、亲和层析、制备性IEF电洗脱纯化了一种有凝乳弹性蛋白酶（Pr1）活性的蛋白酶BbPr1。经SDS－PAGE电泳银染后是单带,HPLC凝胶过滤显示单峰。BbPr1为单体酶,分子量为33.6kD左右,pI为7.4。底物专一性测定显示,BbPr1能水解Phe或Leu形成的酸胺键和肽键。BbPrl可被PMSF抑制,表明其活性中心有Ser残基;BbPr1还可被胰凝乳蛋白酶抑制剂TPCK和凝乳弹性蛋白酶抑制剂TEI等所抑制;胰蛋白酶抑制剂beupeptin和Epianstatin,及胃蛋白酶抑制剂Pepstain对BbPr1活性无影响。还研究了BbPr1的最适作用pH和pH稳定性。     

分光光度法测定白僵菌孢子粉的含孢量

研究了用分光光度计法测定白僵菌孢悬液的含孢量。首先用筛选出的适宜稀释液SF1将孢子粉作不同浓度的稀释,使用分光光度计在470nm波长下测出孢悬液的吸光度值（x）,再用血球计数板测出对应合孢量（y）,得到回归方程y＝10^{0.8895x＋6.5869}（r＝0．9678）。经检验,方程回归显著,并且不存在菌株间的差异。孢悬液的适宜稀释浓度范围为1500—2000倍。     

不同温湿度下球孢白僵菌对小猿叶甲的致病力

本文在室内研究了分离自小猿叶甲的一株球孢白僵菌(SCAU-BB01D)在不同温度和湿度条件下对小猿叶甲成虫和2龄幼虫的致病力。结果显示温度和相对湿度对白僵菌的致病力有显著影响。在17℃和29℃,小猿叶甲成虫和2龄幼虫的死亡率显著低于其他温度; 在23℃下,成虫接菌后第14天的累计死亡率达到最高为95.60%; 在23℃和26℃下,2龄幼虫接菌后第10天达到最高累计死亡率96%。随着相对湿度的提高,球孢白僵菌对小猿叶甲的致病力显著增加,当相对湿度从50%增加至100%时, 成虫第14天的累计死亡率从55.70%增加到88.80%,2龄幼虫第10天的累计死亡率从62.00%增加到96.00%。机率值分析结果表明,在17、20、23、26和29℃温度下,白僵菌对小猿叶甲成虫和2龄幼虫的LT₅₀分别为 13.63、10.27、8.05、8.87、12.41天和 6.06、5.72、4.90、4.86、6.73天。随着相对湿度的升高,球孢白僵菌对小猿叶甲的致死中时(LT₅₀)呈缩短的趋势,当相对湿度为50%、60%、70%、80%、90%、100％时,成虫和2龄幼虫的LT₅₀分别为12.97、10.97、10.13、9.79、9.14、8.29天和7.68、6.92、5.76、5.57、5.48、4.82天。由实验结果可以得知,23～26℃是球孢白僵菌感染小猿叶甲最适宜的温度范围,环境湿度越高越有利于病原菌侵染,当相对湿度大于90%时,最有利于球孢白僵菌对小猿叶甲的感染。