单孔腹腔镜直肠癌根治术的临床疗效及对患者血清HO-1、CEA、YKL-40和sIL-2R的影响

目的:探讨单孔腹腔镜直肠癌根治术的临床疗效及对患者血清血红素氧化酶(HO)-1、癌胚抗原(CEA)、人类软骨糖蛋白39(YKL-40)、可溶性白介素-2受体(s IL-2R)的影响。方法:选择2013年1月至2015年1月我院接诊的92例直肠癌患者,通过随机数表法分为观察组(n=46)和对照组(n=46),对照组使用传统多孔腹腔镜直肠癌根治术,观察组使用单孔腹腔镜直肠癌根治术。比较两组围术期情况及术后并发症的发生情况,手术前24 h、手术后24 h血清HO-1、CEA、YKL-40、s IL-2R水平的变化,并随访2年,比较两组的生存率。结果:两组手术时间、淋巴结切除个数比较差异无统计学意义(P0.05),观察组术中出血量显著少于对照组,术后排气时间、住院时间明显短于对照组(P0.05)。手术后24 h,两组血清HO-1、YKL-40、s IL-2R水平均较手术前显著升高(P0.05),血清CEA水平较手术前明显降低(P0.05),且观察组血清HO-1、YKL-40、s IL-2R水平均明显低于对照组(P0.05),两组手术后血清CEA水平比较差异无统计学意义(P0.05);观察组吻合口瘘、尿潴留、切口感染、肺部感染总发生率明显低于对照组(P0.05),两组术后2年生存率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:采用单孔腹腔镜直肠癌根治术治疗直肠癌患者的临床效果明显优于传统多孔腹腔镜直肠癌根治术,且安全性更高,患者术后恢复更快,可能与其有效降低患者血清HO-1、YKL-40、s IL-2R、CEA水平有关。     

血清AGR、CEA、CA199及MIC-1表达在老年结直肠癌诊断及预后评估中的应用价值

摘要 目的：研究血清白蛋白/球蛋白比值（AGR）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原（CA）199及巨噬细胞抑制细胞因子-1（MIC-1）表达在老年结直肠癌诊断及预后评估中的应用价值。方法：选取2020年3月-2022年12月我院收治的老年结直肠癌患者60例作为观察组,根据患者预后情况分为预后良好组（36例）和预后不良组（24例）,选取同期来我院体检的健康者58例作为对照组。比较观察组、对照组患者AGR、CEA、CA199、MIC-1表达水平,比较预后良好组和预后不良组AGR、CEA、CA199、MIC-1表达水平、一般临床资料,采用Logistic回归模型分析AGR、CEA、CA199及MIC-1表达与老年结直肠癌患者预后结局的关系。结果：预后良好组和预后不良患者既往靶向治疗、性别、年龄、肿瘤家族史、肿瘤位置、肿瘤距肛缘距离比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,预后良好组患者高分化、TNM分期ⅠⅡ期、淋巴结转移比例低于预后不良组,差异有统计学意义（P<0.05）,预后良好组AGR高于预后不良组,差异有统计学意义（P<0.05）,预后良好组CA199、CEA水平、MIC-1表达阳性较预后不良组更低,差异有统计学意义（P<0.05）观察组患者AGR低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,观察组CA199、CEA水平、MIC-1表达阳性比例高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,Logistic回归分析结果为TNM分期、AGR、CEA、CA199是老年结直肠癌患者预后的影响因素（P＜0.05）。Logistic回归模型联合预测老年结直肠癌患者预后不良的ROC曲线下面积为0.954,显著高于各指标单独预测ROC曲线下面积0.683、0.866、0.918、0.909（P＜0.05）。结论：血清AGR降低,CEA、CA199水平升高与老年结直肠癌预后不良有关,各指标联合预测老年结直肠癌患者预后不良有较好的应用价值。     

超声造影定量参数联合癌胚抗原、中性粒细胞/淋巴细胞比值对乳腺癌改良根治术后复发转移的预测价值

摘要 目的：探讨超声造影定量参数联合癌胚抗原（CEA）、中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）对乳腺癌改良根治术后复发转移的预测价值。方法：选择2020年12月至2022年1月我院收治的120例行改良根治术治疗的乳腺癌患者,所有患者均行乳腺超声造影检查获得超声造影特征图像及超声造影定量参数,检测血清CEA水平和NLR,统计术后复发转移的发生情况。受试者工作特征（ROC）曲线分析超声造影定量参数联合CEA、NLR预测乳腺癌改良根治术后复发转移的价值。结果：两组术前超声造影特征比较,复发转移组增强强度略高,大部分为高增强或整体增强,造影剂分布尚均匀。18例术后发生复发转移（复发转移组）,复发转移组峰值强度（PI）大于未复发转移组,血清CEA水平和NLR高于未复发转移组,达峰时间（TTP）小于未复发转移组（P＜0.05）。PI、TTP、CEA、NLR预测乳腺癌改良根治术后复发转移的曲线下面积（AUC）为0.693、0.764、0.763、0.781,联合PI、TTP、CEA和NLR预测乳腺癌改良根治术后复发转移的AUC为0.909,大于各指标单独预测。结论：乳腺癌改良根治术后复发转移患者超声造影参数PI增大、TTP降低,血清CEA和NLR增高,联合检测TTP、PI、CEA和NLR在乳腺癌改良根治术后复发转移中具有较高的预测价值。     

乳腺癌AgNOR计数与癌胚抗原的免疫组化研究

应用核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）技术及癌胚抗原（ＣＥＡ）免疫组化染色对９８例乳腺良、恶性病变进行对比研究。结果表明：ＡｇＮＯＲ计数与肿瘤增殖活跃程度及生物学行为是一致的。乳腺癌中ＡｇＮＯＲ计数显著高于良性病变（Ｐ＜０．０１）。浸润癌ＡｇＮＯＲ计数比其他类型乳腺癌高。ＣＥＡ染色在乳腺良性病变中基本阴性,恶性病变中阳性率８０．８％。乳腺癌中ＡｇＮＯＲ计数与ＣＥＡ分布之间呈线性相关（ｒ＝０．８２,Ｐ＜０．０５）。ＣＥＡ阳性乳腺癌组与ＣＥＡ阴性组ＡｇＮＯＲ计数差异显著（Ｐ＜０．０５）。提示：ＡｇＮＯＲ定量研究和ＣＥＡ分布在乳腺良、恶性病变的鉴别及肿瘤恶性程度的研究中具有相似的参考价值。     

胃癌及癌旁组织癌胚抗原分布的免疫电镜观察

应用免疫电镜技术对１４例胃癌手术切除标本进行胃癌及癌旁组织中癌胚抗原（ＣＥＡ）超微结构水平分布的定位观察。结果表明,癌旁正常胃粘膜上皮细胞ＣＥＡ含量很少,仅在表面微绒毛见到微弱的ＣＥＡ分布;肠化上皮细胞ＣＥＡ主要分布在吸收细胞的微绒毛及杯状细胞粘液颗粒之间;而胃癌细胞ＣＥＡ除分布腔面微绒毛外,尚分布细胞侧面,基底面或整个胞膜,还见于胞浆内膜结构中。ＣＥＡ在胃癌细胞与正常胃粘膜上皮及肠化上皮分布上的差异说明表面膜成份极性的丧失是上皮性肿瘤细胞的特征之一。ＣＥＡ在胃癌细胞的分布异常可能导致恶性细胞某些生物学行为的变化。     

癌胚抗原单链抗体在细菌表面的展示及其应用

癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)作为肿瘤标志物,在临床肿瘤诊断及肿瘤靶向治疗等方面具有重要应用价值。癌胚抗原单链抗体（CEA-specific single chain antibody fragments , CEA-scFv）能够特异性结合癌胚抗原。本研究将癌胚抗原单链抗体展示于大肠杆菌细胞表面,分析其作为癌胚抗原检测平台和细菌靶向载体的可行性。首先将CEA-scFv基因克隆到表面展示载体pBAD-OmpA-mCherry 中,经酶切和测序证实,成功构建了重组质粒pBAD-OmpA-mCherry-CEA。重组菌经阿拉伯糖诱导后可检测到红色荧光,荧光强度在胰酶的作用下降低,全菌ELISA检测呈阳性反应,提示融合蛋白和目的蛋白质在重组菌表面展示成功。由Western印迹分析可知,融合蛋白的相对分子质量约为85 kD,符合预期设计。进一步的研究提示,重组菌在大肠杆菌表面展示的癌胚抗原单链抗体具有生物活性,能够有效结合A549细胞裂解液的癌胚抗原。在细菌侵染细胞实验中,与对照组相比,重组菌孵育A549细胞后细胞内可明显观察到点状红色荧光,证明重组菌能够靶向侵入癌胚抗原阳性肿瘤细胞。本研究为癌胚抗原相关的快速诊断和基于细菌载体的肿瘤靶向治疗奠定了实验基础。     

GDP与ICE 方案对淋巴瘤患者血清LDH、TK1、CEA 及CA199水平的影响

目的:观察和比较GDP与ICE方案对淋巴瘤患者血清乳酸脱氢酶(LDH)、胸苷激酶1(TK1)、癌胚抗原(CEA)及糖类抗原199(CA199)水平的影响。方法:选取我院收治的淋巴瘤患者76例,随机分为GDP组(39例)与ICE组(37例),分别采用吉西他滨联合顺铂及地塞米松方案和异环磷酰胺联合顺铂及美司那静滴方案治疗。观察并比较两组患者治疗前后血清LDH、TK1、CEA及CA199水平的变化情况。结果:治疗后,GDP组与ICE组的总有效率分别为65.4%和58.7%,GDP组有效率高于ICE组,但差异无统计学意义(P0.05);两组患者血清LDH、TK1、CEA及CA199水平均较治疗前降低,差异具有统计学意义(P0.05),且GDP组患者的血清LDH、TK1、CEA及CA199水平均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:GDP方案治疗淋巴瘤的疗效与ICE方案相当,但其能够明显降低患者血清LDH、TK1、CEA及CA199水平。     

Mn-SOD与抗癌胚抗原单链抗体基因的融合及高效表达

将Mn-SOD与抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因(ScFv gene)融合,重组到含T7启动子的表达载体pET-22b(+)中,构建表达质粒pETMnSOD-ScFv,并转化大肠杆菌BL21(DE3),进行高效表达,表达物占菌体可溶性总蛋白的24%。SDSPAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物分子量为45kD与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为分泌型表达有利于纯化。RIA测定表明表达产物能特异性的与抗原CEA结合,同时邻苯三酚法测定也表明表达产物具有SOD酶的活性,该融合蛋白为分泌CEA肿瘤的靶向性治疗提供新的途径。     

肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1和NSE的检测及临床意义

目的探讨外周血癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的检测对肺癌的诊断、病理分型和疗效判断的临床用价值。方法采用化学发光法检测了62例肺癌患者、54例良性肺部疾病患者、36例健康人、40例肺癌患者手术前后血清CEA、CYFRA21-1和NSE的水平。结果肺癌患者手术前血清CEA、CYFRA21-1和NSE的含量明显高于良性肺部疾病组及正常对照组(P0.01)。鳞癌组、腺癌组和小细胞癌组之间肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1和NSE水平差异有统计学意义。CEA阳性率以腺癌组最高(84%),CYFRA21-1阳性率以鳞癌组最高(85.2%),NSE阳性率以小细胞癌组最高(80.0%)。手术治疗后未复发转移组CEA、CYFRA21-1和NSE水平低于术前,而复发转移组与术前比变化不显著(P0.05)。结论血清CEA、CYFRA21-1和NSE的检测对不同病理类型肺癌患者的诊断、病情检测及疗效判断有较好的临床参考价值。     

人癌胚抗原单链抗体基因的构建和筛选

从分泌抗癌胚抗原(carcinoembryoni antigen, CEA)单抗的杂交瘤细胞株C50中提取总RNA, 逆转录成cDNA, PCR扩增分别得到抗体轻、重链可变区基因, 再利用两对PCR引物合成和扩增得到全单链抗体基因. 将含轻、重链可变区序列的DNA片段克隆于含噬菌体基因Ⅲ的噬菌粒pCANTAB5. 重组克隆在噬菌体表面表达基因Ⅲ与单链抗体的融合蛋白. 表达具抗原结合活性的单链抗体的重组噬菌体可以通过亲和筛选的方法筛选得到并富集. 利用该方法我们可以从许多分泌不同抗体的杂交瘤细胞RNA中快速克隆和筛选功能性抗体可变区基因.