转基因鸡的研究策略

转基因研究工作开展十几年来,成就斐然。转基因鸡的研究策略论述了生产转基因鸡的几种方法和鸡的基因组操作研究进展,并详细地阐述了转基因鸡胚胎的体外培养技术。指出：转基因鸡投入生产以前必须查明其表型改变对生态平衡的影响。     

β-半乳糖苷酶基因在正常人及白血病人骨髓细胞的表达

为探索组织化学方法检测标志基因在正常骨髓细胞及白血病细胞的表达,本研究利用脂质体介导将ＮｅｏＲ基因和ＬａｃＺ基因共转移正常人及白血病人骨髓细胞。然后,采用Ｘ－ｇａｌ染色的方法,我们观察了ＬａｃＺ基因在转导细胞的表达。结果显示：ＬａｃＺ基因在正常人及白血病人骨髓细胞表达的阳性率分别为１３．３３％±２．６８％和１５．３９±３．６９％。经Ｇ４１８筛选后,转导阳性细胞率达到４６．０６％±３．４７％和４８．２２％±４．４７％。提示：经脂质体介导ＬａｃＺ基因在正常骨髓细胞及白血病细胞可获得高效的转移率。同时表明,利用组织化学方法可有效地检测标志基因的表达。     

Ti质粒介导的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶cDNA转化烟草植株

将玉米Ｃ４－磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（ＰＥＰ羧化酶）ｃＤＮＡ亚克隆至穿梭质粒ｐＢｉｎ１９,通过在杆菌Ｔｉ质粒（ＬＢＡ４４０４）介导的时圆片共培养法将其转入Ｃ３植物烟草中。在获得的抗性转化植株中,８０％具有较强的ＮＰＴⅡ报道基因表达。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明Ｃ４－ＰＥＰ羧化酶ｃＤＮＡ已被整合到了烟草核基因组中。     

癌症疫苗

１９９３年是ＷｉｌｌｉａｍＣｏｌｅｙ首次报道“细菌毒素激活的免疫系统诱导肿瘤消退”的１００周年。而当许多相继而来的癌症疫苗试验已经得到撩拨人心的结果时,主动的免疫治疗仍没有成为确定的癌症疗法。新的分子疫苗方法基于合理的免疫学原理之上,增进了动物模型中的系统抗肿瘤效应,最终,肿瘤特异性抗原的遗传确定将使用于癌症治疗的靶抗原特异性疫苗得到发展。     

将知识转变为行动

最近，有两则关于癌症的新闻很耐人寻味。一是，世界上第一种癌症疫苗在美国获准上市。这种针对宫颈癌的疫苗据说在临床试验阶段有效率高达100％，有望在人类历史上首次根除一种癌症。另一则是，美国癌症研究协会在例行发布的年度报告中说，同50年前相比，今天癌症的死亡率几乎没有任何变化。这两条消息似乎又一次印证了癌症研究给人们的印象：永远感觉有希望，可又永远看不到光亮。     

FOXG1在结直肠癌侵袭及转移中的作用及机制

构建叉头框G1(Forkhead box G1,FOXG1)的慢病毒干扰(shRNA)质粒及表达质粒,通过敲低和过表达FOXG1探讨其对结直肠癌细胞上皮-间质转化EMT的作用及其机制。应用Western blotting检测FOXG1在RKO、SW480、SW620、LOVO、DLD-1五种结直肠癌细胞中蛋白的表达水平,设计并合成FOXG1的shRNA片段(shFOXG1),运用DNA重组技术获得重组质粒,经双酶切技术及测序方法鉴定后进行慢病毒的包装、纯化及稳定转染,经筛选后获得稳定的结直肠癌细胞株,通过Western blotting和qRT-PCR技术检测FOXG1敲低和过表达效率及EMT关键因子E-cadherin、Vimentin、Fibronectin、Snail、Twist mRNA和蛋白的变化,光学显微镜观察敲低后细胞形态学变化,通过划痕实验检测迁移能力变化,Transwell检测侵袭迁移能力的变化。5种结直肠癌细胞中,FOXG1在RKO细胞中蛋白表达量最高,而在DLD-1细胞中表达量最低,与对照组相比较,在RKO细胞中敲低FOXG1,细胞形态由长梭型变成了类圆形或者多边形,细胞极性和紧密连接增加,细胞迁移距离明显降低,侵袭转移穿过小室的细胞数也明显减少,EMT关键因子E-cadherin表达增高,Vimentin、Fibronectin、Snail、Twist表达降低,过表达FOXG1组则相反。FOXG1在结直肠癌中高表达,这种基因的高表达能够促进结直肠癌细胞的侵袭和转移,对结直肠癌细胞的EMT起着重要的调控作用。     

重组DNA技术在昆虫学中的应用

重组DNA技术即基因工程,亦为人们称做基因克隆或基因操作。重组DNA技术已被应用于昆虫学的基础研究和应用研究中。本文首先对重组DNA技术及基因转移技术(在昆虫学研究中与重组DNA技术配合应用的重要手段)作一简述,然后着重介绍这些技术在昆虫学研究中的应用概况。 重组DNA技术 重组DNA技术就是将DNA从细胞中分离出来,切割成片段,与载体DNA连接,形成重组DNA分子,然后导入宿主细胞,进行复制。     

辅酶模型化合物与过硫化物间单电子转移反应机制的新证据

本文以紫外—可见光谱和自旋捕获—ESR联用技术研究了辅酶NADH模型化合物N-苄基-1.4-二氢菸酰胺与过硫化物的氧化-还原反应,获得反应体系中自由基中间体存在的信息,为有关生物体输酶氧化-还原反应的两步单电子转移自由基机制提供了进一步的依据.