叶绿体色素的提取和分离实验的拓展

叶绿体色素的提取和分离实验的拓展张淑兰（山东省潍坊教育学院生物系,２６２５００）高中课本中叶绿体色素的提取和分离是用层析法验证叶绿体色素的种类和各种色素的颜色。叶绿体含有四种主要光合色素：叶绿素ａ、叶绿素ｂ、叶黄素和胡萝卜素。这些色素不溶于水,但溶于...     

利用RFLP标记分析一对水稻籼粳交双单倍体的基因型

对一对籼(Oryza sativa ssp.indica)粳(O.sativa ssp.japonica)(“圭630”/“02428”)杂种进行花药培养获得81个双单倍体(DH),构建了有233个RFLP标记的水稻遗传连锁图谱。对各DH系的“圭630”等位基因组频率及图示基因型进行了分析。结果表明,该DH群体的平均基因组频率为49％,各DH系分布在29.3％～78.6％之间,集中分布在44％～49％之间;有130个RFLP标记出现显著的偏分离,偏父本与偏母本分离的标记数基本相等;同向偏分离的标记常集中在一些染色体或染色体的某些区段;各染色体的平均基因组频率分布在29％～65％之间,出现明显的偏父或偏母分离;一些DH中出现其特征完全来于某一亲本的染色体,可能与这些染色体在减数分裂期的同源配对和交换有关。     

人甲状旁腺激素的基因克隆及在大肠杆菌中的表达

人甲状旁腺激素(Hon,an parathyroid hormone hPTH)是84个氨基酸组成的多肽激素。从人甲状旁腺肿瘤组织分离纯化总RNA．其mRNA逆转录得cDNA,以cDNA为模板,PCR扩增得hPTH基因。将该基因克隆到表达载体pBV220上,转化大肠杆菌DH5n细胞,获得了表达。细胞抽提液1000倍稀释后hPTH的放免活性265,77ng／dl,为对照的480倍。表达产物粗分离后经Resource-s阳离子柱进行了分离．对活性峰进行了MALDI质谱分析及HPLCC18反相柱分析。     

048禽流感:H5N1耐药病毒株的分离

H5N1型禽流感病毒在许多亚洲国家的持久肆虐及其对人的致死性感染，已引起人们对新一轮全球流感大流行可能性的严重关注。本文报告，研究人员从一名14岁越南女孩的病例标本中成功分离到对奥斯他韦（Osehamivir，商品名“达菲”，为病毒神经氨酸酶抑制剂）有耐药性的H5N1型禽流感病毒株“A／Hanoi／30408／2005”。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究——Ⅱ.病原菌的鉴定

对从狐狸流产胎儿和阴道分泌物中分离得到的16株菌进行了细胞形态、细胞壁显微结构的观察和生化、对人血红细胞具溶血性、DNA的G+C含量等测定。根据它们细胞呈革兰氏阳性到可变,形态从球杆到杆状的多形态性,接触酶和氧化酶均阴性,葡萄糖的O/F测定为发酵产酸,主要产物有乙酸和乳酸等主要产物,归为阴道加德纳氏菌,但由于它们对营养要求不苛求,生长速度快和对氧要求低等,又不同于人体来源的加德纳氏菌。因此,将这群菌另定为一个亚种——阴道加德纳氏菌狐狸亚种(Gardnerella vaginalis subsp.fox)。模式株为U80。     

微流控芯片细胞捕获分离方法概述

细胞捕获分离是免疫学、诊断检测、病理研究等学科经常用到的生物学实验方法.近年来,微流控芯片平台的细胞捕获分离方式花样繁多,层出不穷,它具有可快速检测、所需样本量少、节约试剂、成本低廉等优势.本文主要对近年来多种微流控细胞捕获分离的方法,以免疫捕获分离和无标签细胞分离两类对其进行介绍.免疫捕获分离是较为传统的细胞捕获分离方式,它的特异性好、捕获分离后的细胞纯度较高.无标签细胞分离是近几年热门发展的技术手段,它采用物理学与生物学相结合的方式,能较好地保持细胞的完整性和生物活性.细胞捕获分离在微流控平台的应用虽然发展迅速,但其在工业化生产和微型化整合等方面还存在一些问题,只有解决生产问题,细胞捕获分离在微流控平台的应用才真正具有实际价值,可以真正作为一种技术手段用于日常的实验操作和医学检测中.就目前而言,细胞捕获分离在微流控芯片中仍具有很大的发展前景.     

入侵植物猫爪藤体外细胞毒活性成分的筛选分离

为了筛选分离入侵植物猫爪藤的细胞毒活性成分,采用MTT法以75%乙醇提取物的不同组分分别处理人肝癌细胞SMMC7721、Bel7402和正常肝细胞Chang Liver,对他们的体外增殖抑制率进行了研究。结果表明,总醇提物的氯仿组分对肝癌细胞表现出明显的体外增殖抑制作用,其次是石油醚组分。从氯仿萃取组分中分离出具有更强细胞毒活性的成分熊果酸。因此,入侵植物猫爪藤具有体外细胞毒活性,熊果酸是其体外细胞毒活性的主要成分之一。     

泌尿系感染3062株分离菌的分布及耐药性

目的分析泌尿系感染分离菌的分布及耐药特征,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对2012年至2014年3 062株泌尿系感染患者尿培养标本中分离出的菌株,采用西门子公司的WalkAway96全自动微生物分析仪及配套试剂进行菌种鉴定和药敏试验,并对部分肠杆菌科菌株进行产ESBLs酶和产KPC型碳青霉烯酶检测,对葡萄球菌进行耐甲氧西林检测,应用WHONET 5.6软件进行数据统计分析。结果 3 062株分离菌中,革兰阴性菌1 701株(55.6%),革兰阳性菌740株(24.2%),真菌621株(20.3%),检出率最高的前3位分离菌依次为大肠埃希菌、粪肠球菌和白假丝酵母,分别占36.8%、9.0%和8.0%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌产ESBLs酶检出率分别为54.0%、44.3%和21.1%,金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的耐甲氧西林菌株检出率分别为32.4%和83.1%。革兰阴性菌对多数抗菌药物均有不同程度的耐药性,肠杆菌科细菌对头孢菌素类与β-内酰胺酶抑制剂复合物相对较低,对碳青霉烯类耐药率最低。革兰阳性球菌对利奈唑胺和万古霉素的耐药性较低。结论泌尿系感染分离菌分布广泛,大部分菌株具有多药耐药性,临床上应根据药敏结果合理用药。     

新疆哈萨克族2型糖尿病患者粪便中韦荣球菌的分离鉴定

目的从新疆哈萨克族2型糖尿病患者粪便中分离培养并鉴定韦荣球菌。方法收集新鲜哈萨克族2型糖尿病患者的粪便样本,用韦荣球菌专属培养基进行分离培养,微量生化反应管进行初步鉴定;提取所得菌株的DNA,使用韦荣球菌属引物对此DNA进行特异性扩增,结合全自动细菌鉴定仪对菌株进行鉴定。结果 (1)所得到的菌株经微量生化反应管初步鉴定为韦荣球菌;(2)使用韦荣球菌属引物对此菌株DNA进行特异性扩增获得预期产物;(3)经全自动细菌鉴定仪最终确定所得菌株为韦荣球菌。结论从新疆哈萨克族2型糖尿病患者粪便中分离培养得到韦荣球菌。     

2014年泌尿道感染病原菌分布及药敏性分析

摘要：目的 分析并了解泌尿道感染病原菌的分布及药敏性,为临床合理有效的抗菌治疗提供参考依据。方法 收集宁波市医疗中心李惠利医院2014年住院及门诊部送检的中段尿标本分离的1 187株病原菌,对其菌群分布和药敏结果进行回顾性分析。结果 1 187株尿培养病原菌中,细菌占82.8%（983/1 187）,真菌占17.2%（204/1 187）。检出率前四位的细菌分别是大肠埃希菌（31.2%）、屎肠球菌（10.5%）、肺炎克雷伯菌（9.6%）和粪肠球菌（9.2%）,其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的阳性率分别是61.2%和26.9%,对头孢菌素类、青霉素类和单环酰胺类抗生素的敏感率普遍较低,对碳青霉烯类药物的敏感率>85%。屎肠球菌和粪肠球菌对抗菌药物的敏感性存在较大差异,且表现出较高的多药耐药性,屎肠球菌对万古霉素和利奈唑胺的敏感率分别为100.0%和95.1%,粪肠球菌对青霉素G和氨苄西林完全敏感。检出率前两位的真菌分别是白色假丝酵母菌（9.0%）和光滑假丝酵母菌（6.2%）,两者对5-氟胞嘧啶和两性霉素B近乎100.0%敏感。结论 本院引起泌尿道感染的病原菌种类繁多,对不同抗菌药物的敏感性差异较大,临床应根据药敏试验结果权衡利弊后合理使用抗菌药物,预防和控制耐药菌株的形成。