番木瓜中6个BG生物合成相关基因荧光定量分析

异硫氰酸苄酯(benzyl isothiocyanate,BITC)是医学界公认的具有防癌抗癌活性的成分,对多种癌症具有很好的作用.BG是BITC的前体物质,可以在芥子酶的作用下水解生成BITC.研究表明,BG在热带水果番木瓜中含量丰富.本研究在克隆了番木瓜中6个相关基因和测定了BG在番木瓜不同组织中含量的基础上,采用实时荧光定量PCR技术,对6个基因在番木瓜不同组织中的表达量进行测定,并与BG的含量进行比较,考察其相关性.结果表明各基因的表达量相对较高时BG的含量也较高,即6个基因在番木瓜中的表达量与BG的含量存在相关性.我们推测,这6个基因可能是番木瓜中BG生物合成相关基因.本文结果为进一步研究基因的功能提供了理论依据.     

中国热带地区的半知菌Ⅰ.云南尾孢菌属及其近似属的种(英文)

本文报道云南热带地区尾孢菌属及其近似属真菌４５种,其中有一个新种：番木瓜短胖孢（ＣｅｒｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｐａｐａｙａｅＹ．Ｌ．Ｇｕｏ,ｓｐ．ｎｏｖ．）,寄生在番木瓜科（Ｃａｒｉｃａｃｅａｅ）番木瓜（ＣａｒｉｃａｐａｐａｙａＬ．）叶上。短胖孢属真菌在番木瓜科植物上是首次报道。文中为新种提供了拉丁文简介、描述并附图。模式标本保藏在中国科学院微生物研究所真菌标本室（ＨＭＡＳ）。寄生在番木瓜（ＣａｒｉｃａｐａｐａｙａＬ．）上的ＣｅｒｃｏｓｐｏｒａｍａｍａｏｎｉｓＶｉｅｇａｓ＆Ｃｈｕｐｐ与本种近似,二者都具有子座,分生孢子梗紧密簇生,但前者分生孢子梗（５～２５×２～３μｍ）和分生孢子（１０～４５×２～３μｍ）均短而窄。番木瓜尾孢（ＣｅｒｃｏｓｐｏｒａｐａｐａｙａｅＨａｎｓｆ．）与本种的区别在于无子座,分生孢子梗色泽深（中度褐色）,分生孢子梗长（５０～２００×３．５～６μｍ）,分生孢子无色,针形,窄（２０～７５×３～５μｍ）。     

番木瓜环斑病毒华南强株系cDNA文库的构建及其基因组3''''端区域结构的研究

以λ-ZAPⅡ噬菌体为载体,构建了番木瓜环斑病毒华南强株系(PRV-SM)基因组cDNA文库。以PCR扩增的外壳蛋白(CP)基因为探针筛选出阳性克隆。酶谱和序列分析确定,其中两个阳性克隆除重叠部分外为长达2676个核苷酸的基因组3′端区域。其中包括棱内含体蛋白b(NIb)基因的1607个棱苷酸,CP基因的858个核苷酸和基因组3′端非编码区的211个核苷酸(不包括polyA尾巴)。PRV-SM的NIb含有依赖于RNA的RNA聚合酶的8个特征性保守序列,可能是参与基因组RNA复制的核心亚基。与其他株系比较,NIb的氨基酸变化主要集中在其C端和N端。PRV-SM 3′端非编码区有一段28个核苷酸的正向重复序列,能在其内形成茎环二级结构,并且在各株系间具有高度保守性。NIb,CP和3′端非编码区的总的序列比较表明,SM株系与国外报道的其他株系亲缘关系相对较远。     

中国链格孢属的分类研究 Ⅳ.生于夹竹桃科和番木瓜科植物上的新种和新变种(英文)

报道生于夹竹桃科（Ａｐｏｃｙｎａｃｅａｅ）植物上的链格孢新种２个、新变种２个,即络石链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ　ｔｒａｃｈｅｌｏｓｐｅｒｍｉ　Ｔ．Ｙ　Ｚｈａｎｇ,Ｘ,Ｆ,Ｌｉｎ　ｅｔ　Ｗ．Ｑ．Ｃｈｅｎ）、细极链格孢络石生变种［Ａ．ｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ（Ｎｅｅｓｅｘ　Ｆｒ．）Ｗｉｌｔｓｈｉｒｅｖａｒ．ｔｒａｃｈｅｌｏｓｐｅｒｍｉｃｏｌａ　Ｔ．Ｙ．Ｚｈａｎｇ,Ｘ．Ｆ．ＬｉｎｅｔＷ．Ｑ．Ｃｈｅｎ］、细极链格孢长春花变种［Ａ．ｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ（ＮｅｅｓｅｘＦｒ．）Ｗｉｌｔｓｈｉｒｅｖａｒ．ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉＴ,Ｙ．ＺｈａｎｇｅｔＸ．Ｆ．Ｌｉｎ］和长春花生链格孢（Ａ.ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉｃｏｌａＴ．Ｙ．Ｚｈａｎｇ）,及生于番木瓜科（Ｃａｒｉｃａｃｅａｅ）植物上的番木瓜链格孢（Ａ．ｃａｒｉｃａｅ　Ｔ．Ｙ．Ｚｈａｎｇ,Ｗ．Ｑ．Ｃｈｅｎ　ｅｔ　Ｘ．Ｆ．Ｌｉｎ）．新种和新变种均有拉丁文特征描述,并附绘图．新分类单位的模式标本分别存放在西北农业大学真菌标本室（ＨＭＵＡＢＯ）和山东农业大学植物病理标本室（ＨＳＡＵＰ）．     

几种化学制剂对番木瓜抗环斑病毒和防御酶活性的影响

研究几种化学制剂对番木瓜抗环斑病毒和叶片中防御酶活性影响的结果表明,接种番木瓜环斑病毒后,植株叶中多酚氧化酶（PPO）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）的活性均明显升高,其中PPO和POD总体的升高幅度大,SOD的总体升幅较小;病毒必克的升幅较大,83增抗剂和水杨酸的升幅较小。83增抗剂、水杨酸和病毒必克均能使番木瓜叶中PPO、SOD和POD活性持续升高,有效减轻了环斑病的病情,防治效果依次为83增抗剂〉水杨酸〉病毒必克。     

番木瓜的离体繁殖

建立番木瓜离体繁殖体系.用0.1%HgCl2溶液对番木瓜的新生嫩茎进行消毒,适宜的消毒时间为12min,1mm茎尖的成苗率达到87.6%.随蔗糖浓度的提高,番木瓜试管苗的株高显著降低,增殖系数显著增加.在附加IBA0.3mg/L的1/2MS培养基上新梢的生根率达到89.3%,试管苗大规模移栽的成活率达90%以上.基因型显著地影响番木瓜离体增殖的效率.     

番木瓜SCoT反应体系建立及引物筛选

采用单因素试验方法对番木瓜(Carica papaya L.) SCoT-PCR反应体系进行了优化,并对引物进行了筛选。结果表明,在20 μL番木瓜SCoT-PCR反应体系中,包含2.0 mmol/L Mg2+,0.3 mmol/L dNTPs,0.8 μmol/L引物,30 mg L-1模板DNA和1.0 U Taq聚合酶。运用该体系对不同引物和22个番木瓜品种进行验证,扩增的稳定性、可靠性良好,且分辨率较高,同时筛选出多态性丰富的5条引物和5对引物组合。因此,优化的番木瓜SCoT-PCR反应体系可用于种质鉴定和遗传多样性分析。     

SRAP结合SCoT标记分析番木瓜种质的遗传多样性

利用SRAP和SCoT两种分子标记相结合对中国22个番木瓜主要栽培品种(系)进行遗传多样性研究。SCoT标记检测获得的遗传多样性参数值和遗传相似系数范围均高于SRAP标记检测的结果,表明SCoT标记检测多态性的能力高于SRAP标记。基于两种标记数据合并后的UPGMA聚类结果显示,番木瓜种质间的遗传相似系数为0.65~0.90,种质间遗传多样性水平较低;在遗传相似系数为0.82时,将所有参试材料划分为3个类群。应用Mantel检测对SRAP和SCoT及两种标记合并进行相关性分析,表明三者之间具有显著的相关性,且相关性很高。聚类结果从分子水平反映出中国番木瓜主要栽培品种(系)的遗传基础狭窄。     

番木瓜基因型遗传关系的SRAP分析

利用SRAP标记对中国22个番木瓜主要栽培品种（系）进行亲缘关系和遗传多样性研究。结果表明:（1）筛选出的20对SRAP引物共扩增249条谱带,其中多态性条带110条,多态性比率为43.20%,平均每对引物扩增的条带数和多态性条带数分别为12.45条和5.50条。（2）引物多态性信息含量（PIC）值变化范围为0.15～0.79,平均值为0.49。（3）聚类分析和主坐标分析显示,供试材料间的遗传相似系数为0.72～0.96,遗传多样性水平较低,在相似性系数为0.87时,可将所有试材分为3个类群。该研究结果有效地揭示了中国番木瓜主要栽培品种（系）资源的遗传背景和亲缘关系,可为番木瓜种质资源的分类、保护和有效利用以及新品种选育提供理论依据。     

O2、ACC和CO2对番木瓜ACC氧化酶活性的影响

研究了番木瓜果皮1－氨基环丙烷－1－羧酸（ACC）氧化酶的部分纯化，底物（O2和ACC）浓度，辅助因子（CO2和Fe^2 )和抑制剂（Co^2 和α－氨基异丁酸）对体外乙烯产生速率的影响，通过DEAE－Sepharose和Phenyl-Sepharose柱层析后，番木瓜果皮ACC氧化酶被纯化了19．5倍，在乙烯产生中，ACC氧化酶对O2的Km值主要取决于ACC的浓度，随着ACC水平的增加而下降，当O2的浓度增加时，酶对ACC的Km值降低。CO2显著地增加酶的活性以及对O2的ACC的Km值，Fe^2 提高酶的活性，Co^2 抑制酶的活性，Fe^2 能够拮抗Co^2 ，对酶活性的抑制作用，这些动力学资料表明ACC氧化酶遵循一种顺序结构机制，首先与O2结合，然后与ACC结合。