大肠杆菌亮氨酰－tRNA合成酶LeuRS67R的纯化及其动力学研究

本实验室已得到的亮氨酰－ｔＲＮＡ合成酶（ＬｅｕＲＳ）基因,与文献相比,６７位氨基酸残基由Ｈｉｓ变为Ａｒｇ,此酶被定名为ＬｅｕＲＳ６７Ｒ。我们从该基因与ｐＵＣ１９重组质粒的大肠杆菌ＴＧ１转化子ＴＧ１－９１中得到ＬｅｕＲＳ的高表达,粗抽液中ＬｅｕＲＳ的表达量在转化子中比在宿主菌ＴＧ１中高２０倍以上。用三步拉层析得到电泳一条带的酶,其比活为１７８９单位／毫克。测定其动力学常数,氨酰化活力对Ｌｅｕ、ＡＴＰ的Ｋｍ值分别为０．０２７ｍｍｏｌ／Ｌ、０．４７ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｋｃａｔ值分别为３．５～５．１ｓ－１。ＡＴＰ－ＰＰｉ交换活力对Ｌｅｕ、ＡＴＰ的Ｋｍ值分别为０．０３ｍｍｏｌ／Ｌ、１．０ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｌｃａｔ值分别为１４０～１５５ｓ－１。此结果与从野生型大肠杆菌Ｋ－１２中提纯的ＬｅｕＲＳ的动力学常数差别很小,６７位氨基酸残基在与活性中心无直接关系的域可能是大肠杆菌的种间差异。     

大肠杆菌精氨酰－tRNA合成酶的Lys306为酶活力所必需

将大肠杆菌精氨酰ｔＲＮＡ合成酶（ＡｒｇＲＳ）上Ｌｙｓ３０６用基因点突变的方法分别变为Ａｌａ和Ａｒｇ的密码子;得到变种基因ａｒｇｓ３０６ＫＡ和ａｒｇｓ３０６ＫＲ。变种基因重组在ｐＵＣ１８上,转化到大肠杆菌ＴＧ１中,转化子中ＡｒｇＲＳ及其变种ＡｒｇＲＳ３０６ＫＡ和ＡｒｇＲＳ３０６ＫＲ所表达的蛋白量至少为ＴＧ１表达ＡｒｇＲＳ蛋白量的１００倍。细胞粗抽提液中ＡｒｇＲＳ的比活ＴＧ１、转化子ｐＵＣ１８－ａｒｇｓ、ｐＵＣ１８－ａｒｇｓ３０６ＫＡ和ｐＵＣ１８－ａｒｇｓ３０６ＫＲ分别为１．６５、２１０、１．８和３８单位／毫克。结果表明ＡｒｓＲＳ的Ｌｙｓ３０６为Ａｌａ取代使活力完全丧失;若被Ａｒｇ取代,则活力丧失８０％以上。Ｌｙｓ３０６为ＡｒｇＲＳ活力所必需。     

固定化虫荧光素酶光纤传感器

固定化虫荧光素酶光纤传感器蔡谨,王顺光,杨歧生,吉鑫松（浙江大学化工系生化教研室,杭州３１００２７;中国科学院上海生物化学研究所,２０００３１）关键词虫荧光素酶,ＡＴＰ,固定化酶,光纤生物传感器ＡＴＰ是生物体内极为重要的能量物质。如何准确快速地定量Ａ...     

包囊游仆虫休眠包囊的超微结构研究

包囊游仆虫休眠包囊中,各类纤毛器的纤毛基体上方的大部分纤毛杆退化,或仅保留毛基体,有时部分额腹棘毛的毛基体也瓦解消失。残留纤毛的纤毛杆周围微管和中央微管仍具有“9 2”结构特征,也有少数纤毛杆出现2套“9 2”微管共处于一层纤毛膜内的现象。毛基体中周围三联体微管的中央形成微管形结构聚合体,基体附属结构仅存在基体间连接及纤毛器托架的残余物;非纤毛区皮层表膜下未见微管层。纤毛区皮层含纤毛器腔周围微管层(相当于表膜下微管层)、纤毛器深部及附近的微管束和分散的微管群。并且,纤毛区皮层囊泡内含有呈不同形态的纤毛杆结构;大核核孔明显变大,核孔数目减少,核孔内膜附着染色质。     

汉防己甲素及克矽平时矽肺大鼠I型和Ⅲ型胶原mRNA的影响

汉防己甲素（汉甲）及克矽平是目前较为有效的抑制矽肺纤维化的药物,本文研究了其对胶原ｍＲＮＡ水平的影响。斑点杂交实验表明大鼠接尘６０天和１２０天后α１（Ⅲ）ｍＲＮＡ水平明显上升。经汉甲或克矽平治疗１个月域３个月后,胶原ｍＲＮＡ水平明显下降,原位杂交结果表明胶原ｍＲ－ＮＡ银颗粒与细胞性结节和增厚的肺泡壁的成纤维细胞分重事,汉甲或克矽平治疗后银颗粒数下降。提示汉甲及克矽平对矽肺进程中的胶原基因表达增强有     

苏里南Edaphus属二新种：鞘翅目：隐翅虫科

苏里南Ｅｄａｐｈｕｓ属二新种（鞘翅目：隐翅虫科）ＤｅｗａｎａｎｄＭａｋｈａｎ荷兰,乌特勒克市,Ｇｉｅｓｓｅｎｐｌｅｉｎ８１号,３５２２ＫＧ关键词鞘翅目,隐翅虫科,Ｅｄａｐｈｕｓ属,新种,苏里南本文记述采自南美洲苏里南北部丛林落叶下的Ｅｄａ户ｂｕｓ属隐...     

中国北叩甲属一新记录种

本文记述北叩甲属Ｄｉａｃａｎｒｔｈｏｕｓ １中国新记录种：横纹北叩甲Ｄ．ｕｎｄｏｓｕｓ（Ｌｅｗｉｓ）。     

Short Communication—The detection of nuclear matrix in most primitive presentexisting eukaryote,Giardia lamblia

The nuclear matrix of diplomonad Giardia lamblia was detected for the first time with DGD embedmentsectioning-embedment free electron microscopy after a series of specific extractions.The result showed that archaezoa Giardia Lamblia already possessed nuclear matrix within its two nuclei.The finest fibrils of the nuclear matrix of Giardia lamblia were measured to be about 11 to 13 nm in thickness.However,the nuclear lamina and nucleolus have never been observed.These results seem to suggest that nuclear matrix is an indispensable intranuclear structural component even in the primitive nucleus.     

鼎湖山珠甲螨属1新种（蜱螨亚纲：甲螨亚目：珠甲螨科）

记述我国广东省鼎湖山珠甲螨属１新种,命名为叉珠甲螨,新种Ｄａｍａｅｕｓ（Ｔｅｃｔｏｄａｍａｅｕｓ）ｆｕｒｃａｔｕｓＷａｎｇｅｔＬｕ,ｓｐ．ｎｏｖ。