Interferon-γ mRNA attenuates its own translation by activating PKR： A molecular basis for the therapeutic effect of interferon-β in multiple sclerosis

PKR, the interferon （IFN）-inducible protein kinase activated by double-stranded RNA, inhibits translation by phosphorylating the initiation factor eIF2α chain. Uniquely, human IFN-γ mRNA uses local activation of PKR in the cell to control its own translation yield. IFN-γ mRNA activates PKR through a structure in its 5＇- region harboring a pseudoknot which is critical for PKR activation. Mutations that impair pseudoknot stability reduce the ability of IFN-γ mRNA to activate PKR and strongly increase its translation efficiency. The cis-acting RNA element in IFN-γ mRNA functions as a biological sensor of intracellular PKR levels. During an immune response, as IFN-γ and other inflammatory cytokines build up in the cell＇s microenvironment, they act to induce higher levels of PKR in the cell, resulting in a more extensive activation of PKR by IFN-γ mRNA. With the resulting phosphorylation of eIF2α, a negative feedback loop is created and the production of IFN-γ is progressively attenuated. We propose that the therapeutic effect of IFN-β in multiple sclerosis may rest, at least in part, on its exquisite ability to induce high levels of PKR in the cell and thereby to limit IFN-γ mRNA translation through this negative feedback loop, blocking the excessive IFN-γ gene expression that precedes clinical attacks.     

日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化

介绍了分别以日本结缕草根部、叶部、匍匐茎等为材料的总RNA提取的改良步骤,质量和浓度检测及其注意事项,并采用Promega公司的Poly ATract Systems Ⅲ(Z5300)试剂盒进行mRNA分离,尽管这一方法成熟可行,但仍存在洗脱体积较大,常需先沉淀浓缩后才能进行后续试验(如cDNA合成),在制备少量mRNA时回收率较低等问题。据此,对mRNA分离方法作了改良,介绍了mRNA分离的优化步骤,通过增加体系形成了一种更适合于日本结缕草mRNA分离的方法,从而为日本结缕草的分子生物学研究提供基础资料。结果证明所提取的总RNA和mRNA完整,质量较高,并应用到日本结缕草cD-NA文库的构建。     

《分子与细胞生物学》：揭示miRNA致mRNA降解关键核酸酶

1月11日,美国《分子与细胞生物学》（Molecular and Cellular Biology）杂志在线发表了miRNA导致mRNA降解机制的最新研究成果。该研究工作由上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所吴立刚课题组和美国纽约大学Joel Belasco实验室共同合作完成,生化与细胞所研究生朴香花等研究人员承担了主要研究工作。     

生长抑素联合抑肽酶治疗急性重症胰腺炎临床疗效观察

目的:观察生长抑素联合抑肽酶治疗急性重症胰腺炎的临床疗效.方法:将急性重症胰腺炎患者48例随机分为两组:A组和B组,A组患者在常规治疗基础上加用生长抑素联合抑肤酶治疗,B组患者在常规治疗基础上加用生长抑素.比较两组患者的腹痛、腹胀缓解时间、血淀粉酶恢复正常时间、WBC恢复正常时间以及感染率、痛死率、并发症发生率、住院时间和住院费用.结果:A组患者腹痛、腹胀缓解时间、血淀粉酶恢复正常时间、WBC恢复正常时间较B组明显缩短,感染率、病死率、并发症发生率、住院时间及住院费用较B组明显降低.结论:生长抑素联合抑肽酶治疗急性重症胰腺炎效果明显,可较早缓解症状并缩短病程、降低感染率、病死率、并发症发生率从而缩短住院时间,降低住院费用.     

超大型烟草突变株的生理生化特征和分子生物学鉴定

超大型烟草突变株再生植株高度是野生型的2．2倍,叶片数是野生型的3．3倍,呈现晚花发育特征;叶片气孔保卫细胞中叶绿体数是野生型的1．3倍,叶绿素a、b和叶绿素总量均高于野生型,可溶性蛋白质含量是野生型的1．18倍,过氧化物酶、细胞色素氧化酶同工酶电泳图谱上有一定差异;可溶性蛋白SDS-PAGE电泳图谱上比野生型少4条谱带;RAPD结果表明突变体在DNA水平上确实发生了变化,DDRT-PCR结果显示出两者在基因表达上有差异。突变株再生植株可以开花结实,植株高大、叶数多,晚花的特征可以稳定遗传。     

异二聚体介导的mRNA核输出机制

真核生物mRNA在细胞核内被转录,而到达细胞质内翻译成为蛋白质,因此跨越核孔的核输出过程是必须的。现在已确定异二聚体TAP/NXT(在酵母中为Mex67p/Mtr2p)在此过程中是最基本的元件,此外其他相关因子如Aly、UAP56等也参与了这个复杂的过程,包括结合、输出、解离和载体输入。本文简要介绍了mRNA输出的基本机制。     

ZAP融合蛋白抑制HIV病毒模型的构建及功能分析

ZAP是一种抗病毒因子,能够特异性结合病毒RNA并招募细胞中的RNA酶降解所结合的靶RNA,从而抑制某些病毒的复制,如鼠白血病病毒(MLV)、辛德比斯病毒(SIN).ZAP对HIV病毒抑制作用并不明显.Tat和Rev是HIV编码的两种可以特异性结合HIVRNA的蛋白质,将它们与ZAP构建成融合蛋白,使得融合蛋白通过Tat或Rev结合HIVRNA并通过ZAP降解HIVRNA,从而抑制HIV假病毒载体携带基因的表达.这一结果为抑制HIV病毒提供了一个新思路,也支持了ZAP招募mRNA降解机器降解靶RNA的模型.     

容量负荷性肥厚心肌中血管紧张素Ⅱ-1型受体mRNA表达的动态变化

本实验采用腹腔动－静脉瘘制造大鼠容易负荷增加所致心肌肥厚模型,应用反转录－聚梧酶链式反应及同位素掺入技术,检测手术后不同时间点左,右心室组织中ＡｎｇⅡ－１型受体的α亚型及ｂ亚型ｍＲＮＡ的表达。结果表明,术后早期虽反映心肌肥厚的心／体重比指标已有显著性升高、而ＬＶ和ＲＶ组织的ＡＴｌａ ｍＲＮＡ及ＡＴ１ｂ ｍＲＮＡ表达尚未见显著性改变。     

非编码的mRNA

非编码的mRNA是近年发现的一类不含典型ORF的mRNA.目前已发现或克隆的这类基因主要有：H19基因,XIST基因,XLSIRT基因,His-1基因,bic基因,rox1和rox2基因等.它们与胚胎发育,肿瘤发生及X染色体失活密切相关.     

老年大鼠单核／巨噬细胞分泌和表达肿瘤坏死因子增多

为研究老年时肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）分泌及表达的改变,在内毒素（ＬＰＳ）１．０μｇ／ｍｌ刺激大鼠单核／巨噬细胞后,用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）测定培养液中ＴＮＦ－α含量,用半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＫ）测定ＴＮＦ－αｍＲＮＡ。同时测定培养液中一氧化氮（ＮＯ）和前列腺素Ｉ２（ＰＧＩ２）的含量。结果显示：老年鼠ＴＮＦ－α分泌量及其ｍＲ－ＮＡ明显高于青年鼠。ＮＯ产量在老年鼠与青年鼠之间无明显差异。老年鼠ＰＧＩ２分泌明显低于青年鼠。由于ＰＧ能抑制ＴＮＦ－α释放,从而推测,ＰＧＩ２产生能力的降低可能是老年大鼠单核／巨噬细胞ＴＮＦ－α分泌量明显高于青年鼠的原因之一。