颅内原发性胚胎性癌的临床特征及预后影响因素分析

目的:探讨颅内原发性胚胎性癌的临床特征及预后影响因素,为该病的临床诊治提供参考依据。方法:回顾性分析我院经病理证实的6例颅内原发性胚胎性癌患者的临床资料,随访并比较患者的预后情况。结果:本组病例5例男性和1例女性,平均年龄9.8岁;5例病变位于松果体区,1例位于鞍区;5例头痛起病,1例表现为多尿;术前血液学检查提示:4例患者甲胎蛋白明显升高,1例患者β亚单位绒毛膜促性腺激素明显升高;3例患者手术全切,平均生存期32.0月,3例患者手术次全切,平均生存期21.0月;4例患者术后接受规范放化疗,平均生存期32.0月,1例仅行化疗,生存期22.0月,1例术后未行放化疗,生存期9.0月。结论:颅内原发性胚胎性癌是一种罕见的颅内肿瘤,多见于年轻男性,病变多位于松果体区;术前血液学检查有助于诊断;患者预后差,手术切除程度是一重要预后影响因素,术后放化疗或可延长患者的生存期。     

抑制糖酵解活性限制雄性原始生殖细胞的增殖

目的:雄性原始生殖细胞在植入生殖嵴后,会从有丝分裂退出进入静息状态,在这一过程中伴随着细胞内代谢状态的改变,本研究旨在体解析原始生殖细胞增殖的改变与细胞代谢之间的因果关系。方法:通过体内Brdu掺入实验明确不同时间点雄性生殖细胞的增殖状态;分析比较增殖状态和静息状态原始生殖细胞糖酵解相关基因的表达;利用腹腔注射HK2特异性抑制剂2-Deoxy-D-glucose (2-DG),构建糖酵解抑制小鼠模型;通过免疫荧光与qPCR分析抑制糖酵解后原始生殖细胞的表型。结果:免疫荧光结果显示雄性生殖细胞增殖停滞从E13.5开始,至E15.5完全停滞;qPCR和Western Blot显示在此过程中HK2的表达是逐渐降低的;在E11.5抑制小鼠胚胎中的糖酵解过程,可以在E13.5检测到雄性PGCs增殖下降,并且可以抑制多能性基因如Sox2、Oct4的表达。结论:研究发现,E11.5-E13.5雄性原始生殖细胞内增殖与多能性的维持需要糖酵解。改变胚胎糖酵解水平可以影响原始生殖细胞增殖分化进程。     

阳春砂花粉的结构和生殖细胞的分离

阳春砂为自交植物,但花的雌蕊高于雄蕊,是研究单子叶植物纲生殖细胞分子生物学的典型材料。为了解决授粉难的问题,该研究采用植物组织化学方法,对阳春砂花粉的发育过程进行观察,以明确其花粉的结构特征;选择渗透压冲击法分离生殖细胞,以探讨阳春砂的授粉技术方法。结果表明:(1)阳春砂花粉发育的特殊性从四分体时期开始,在四分体时期缺少典型的胼胝质壁,而4个小孢子是由多糖性质的细胞壁分隔、包裹着;成熟的阳春砂花粉粒是二胞型花粉,且花粉细胞质中含有丰富的多糖淀粉和脂滴物质;成熟花粉外壁是由多糖物质构成,而非胡萝卜素和类胡萝卜素酯的孢粉素物质构成。(2)阳春砂花粉在2%甘露醇+5%丙酮的爆破液中,爆破率可达10.67%,并释放出花粉内含物,其中包含生殖细胞;在释放出的花粉细胞质中,生殖细胞可完整保留约30min;用显微操作仪将游离的生殖细胞收集成一定数量的群体,置离心管后即可保存在液氮罐中,每天可收集上百个阳春砂生殖细胞。     

不同培养条件对鸡胚胎生殖细胞Oct4启动子DNA甲基化的影响

旨在在体外通过胚胎生殖细胞(EGC)和细胞外基质共同构建一个EGC的小生境(niche)模型,通过比较Oct4DNA甲基化的变化,研究niche中特有的表观遗传效应对胚胎生殖细胞自我更新的影响.构建EGC细胞标准培养方案(对照组)和改良培养方案(试验组),采用甲基化特异性PCR( MS-PCR)技术、RT-PCR技术,对比分析两种培养方案中Oct4启动子的甲基化状态,判断基因表达与其CpG岛甲基化的关系,分析DNA甲基化模式与EGC细胞自我更新的关系.结果显示,试验组可扩增出Oct4的非甲基化扩增产物,而对照组为其甲基化扩增产物,试验组Oct4表达水平明显高于对照组.试验组EGC生长状态明显好于对照组.试验表明,在改良培养条件下,Oct4基因启动子DNA甲基化程度较低,且与基因表达水平呈负相关,更有利于维持胚胎生殖细胞的自我更新状态.     

nanos同源基因在黑脊倒刺鲃生殖细胞中的表达研究

目的:研究黑脊倒刺鲃scnanos的核苷酸序列及其在配子发生中的空间表达特征,以期为鱼类生殖发育研究提供一个有效的分子标记。方法:RT-PCR法首次克隆出scnanos基因,并检测其在不同组织中的表达水平,进而原位杂交法检测其在性腺中的表达水平。结果:scnanos开放阅读框长456bp,编码152个氨基酸。其具有较高的保守性,与鲤鱼、斑马鱼、家蚕、大熊猫、紫色球海胆的相似性分别为81%、63%、52%、50%、44%;scnanos仅在性腺表达,精子发生中,scnanos仅在精原细胞和精母细胞中表达。卵子发生的各时期都发现有scnanos的表达,且杂交信号的强度都随着配子发生的进行逐渐减弱。结论:该研究得到的scnanos是斑马鱼nanos的同源基因,而且此基因适合作为黑脊倒刺鲃及其它鱼类生殖发育研究的有效分子标记基因。     

生殖细胞也喝“孟婆汤”吗?——介绍一些“外遗传学”

按照佛教的轮回说,生命是不灭的。这一世的结束不过是下一世的开始,但是下一世的人无法拥有上一世的记忆。在投胎转世之前,人人都必须走过"奈何桥"。在那里,喝了"孟婆汤"以后,这一世的记忆就全部消失了,这样下一世才得以从     

The role of MAPK and FAS death receptor pathways in testicular germ cell apoptosis induced by lead

The aim of the present study is to investigate gene expression involved in the signal pathway of MAPK and death signal receptor pathway of FAS in lead- induced apoptosis of testicular germ cells. First, cell viabilities were determined by MTT assay. Second, using single cell gel-electrophoresis test （comet assay） and TUNEL staining technique, apoptotic rate and cell apoptosis localization of testicular germ cells were measured in mice treated with 0.15%, 0.3%, and 0.6% lead, respectively. Third, the immunolocalization of K-ras, c-fos, Fas, and active caspase-3 proteins was determined by immunohistochemistry. Finally, changes in the translational levels of K-ras, c-fos, Fas, and active caspase-3 were further detected by western blot analysis. Our results showed that lead could significantly induce testicular germ cell apoptosis in a dose-dependent manner （P 〈 0.01）. The mechanisms were closely related to the increased expressions of K-ras, c-fos, Fas, and active caspase-3 in apoptotic germ cells. In conclusion, K-ras/c-fos and Fas/caspase-3 death signafing receptor pathways were involved in the lead-induced apoptosis of the testicular germ cells in mice.     

Tudor and its domains： germ cell formation from a Tudor perspective

In many metazoan species, germ cell formation requires the germ plasm, a specialized cytoplasm which often contains electron dense structures. Genes required for germ cell formation in Drosophila have been isolated predominantly in screens for maternal-effect mutations. One such gene is tudor (tud); without proper tud function germ cell formation does not occur. Unlike other genes involved in Drosophila germ cell specification tud is dispensable for other somatic functions such as abdominal patterning. It is not known how TUD contributes at a molecular level to germ cell formation but in tud mutants, polar granule formation is severely compromised, and mitochondrially encoded ribosomal RNAs do not localize to the polar granule. TUD is composed of 11 repeats of the protein motif called the Tudor domain. There are similar proteins to TUD in the germ line of other metazoan species including mice. Probable vertebrate orthologues of Drosophila genes involved in germ cell specification will be discussed.     

抗真菌药物影响生殖细胞发育机理的研究

目的：探讨抗真菌药物对促性腺激素诱导的卵母细胞成熟的机理。方法：用小鼠卵母细胞体外培养模型,将小鼠卵母细胞培养在含有次黄嘌呤（ＨＸ,卵母细胞成熟抑制物）的培养注中,观察促卵泡生成素（ＦＳＨ）、两性毒素Ｂ、酮康唑对卵母细胞减数分裂恢复的影响。结果：①ＦＳＨ（１０￣２００ＩＵ／Ｌ）显著刺激卵丘－卵母细胞复合体（ＣＥＯ）克服ＨＸ的抑制而恢复减数分裂,该作用具有剂量依赖性（Ｐ〈０．０５）;②两性霉素Ｂ（０