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121.
从魔芋根际分离的固氮类芽孢杆菌Paenibacillus azotofixans YUPP-5对多种β-1,4糖苷键连接的多糖具有水解作用。通过构建该菌的fosmid文库,克隆到2 157 bp的基因片段,编码环糊精糖基转移酶。大肠杆菌中表达此酶,能降解葡甘聚糖、羧甲基纤维素钠盐、几丁质、木聚糖等多种β-1,4糖苷键连接的多糖,同时该酶还能以葡甘聚糖为底物生成β-1,4糖苷键连接的环糊精,而文献报道这种酶仅能利用α-1,4糖苷键连接的淀粉为底物生成环糊精;并展示了环糊精糖基转移酶的一些新功能。 相似文献
122.
以魔芋葡甘聚糖凝胶为载体亲和层析分离纯化猪血SOD 总被引:4,自引:0,他引:4
以魔芋葡甘聚糖(KGM)凝胶作为铜金属螯合亲和层析的载体一步亲和纯化猪血SOD,得到电泳均一,比活为8622U/mg,纯化倍数为77.8倍的SOD,其回收率为85.4%。探讨了魔芋葡甘聚糖凝胶作为亲和载体的可能性及前景。 相似文献
123.
诺卡氏菌形放线菌β-甘露聚糖酶的纯化和性质 总被引:11,自引:0,他引:11
产β-1,4-D甘露聚糖酶的诺卡氏菌形放线菌(Nocardioform actinomycetes)菌株NA3-540,发酵培养72h,发酵液离心去菌体,上清经硫酸铵沉淀,95%乙醇沉淀,CM-Sephadex A50柱层析、羟基磷灰石柱层析、DEAE-纤维素离子交换及Sephadex G-100分子凝胶过滤柱等步骤,β-甘露聚糖酶的比活提高了137倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDS-PAG 相似文献
124.
125.
126.
127.
β-甘露聚糖酶分子生物学研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
本文概述了β-甘露聚糖酶的来源,以及近年来对微生物、植物、动物来源的β-甘露聚糖酶的分子生物学研究进展,包括基因结构分析、氨基酸序列分析、基因克隆、基因的异源表达及其应用领域等,以期为β-甘露聚糖酶的研究提供进一步的参考。 相似文献
128.
[目的] 分析鉴定高效木质纤维素降解菌群EMSD5来源的新型甘露聚糖酶-乙酰酯酶双功能酶44884,解析催化域间的协同关系,以及碳水化合物结合模块(CBM)对催化域特性的影响,拓展对该类双功能酶的认识,为甘露聚糖酶的升级改造和应用提供依据。[方法] 通过大肠杆菌异源表达甘露聚糖酶-乙酰酯酶双功能酶44884,并构建截短和定点突变的突变体,利用TLC和DNS法比较野生型和突变体的酶学性质。[结果] 成功对44884全长和突变蛋白进行克隆表达,并发现44884中2个催化域能够彼此促进各自产物的释放,而且以双功能酶形式存在时,这种促进效果更为明显。44884中的2个CBM65均有甘露聚糖和结晶纤维素结合活性,且CBM65的存在并不改变甘露聚糖酶和乙酰酯酶的最适反应条件和水解模式。虽然CBM65显著降低了2个催化域的热稳定性,但水解天然底物时,2个CBM65对各自临近催化域的水解具有明显的促进效果。[结论] 本研究首次发现并探究了新型甘露聚糖酶和乙酰酯酶形成的双功能酶44884的功能,解析了催化域之间高效的协同效应,以及新型甘露聚糖结合模块CBM65对双功能酶水解的促进作用。 相似文献
129.
130.
地衣芽孢杆菌β—甘露聚糖酶的纯化及酶学性质 总被引:9,自引:1,他引:9
地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)NK-27菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)经硫酸铵盐析沉淀,两次DEAE纤维素和Sephadex G-100离子交换柱层析以及制备PAGE等步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用SDS-凝胶电泳测得纯化后的β-甘露聚糖酶分子量为26kD,用凝胶聚焦电泳测得等电点P1为5.0。酶反应的最适pH为9.0,最适温度为60℃,稳 相似文献