大豆球蛋白研究以及在改良稻米营养品质中的应用

11S大豆球蛋白是大豆贮藏蛋白的重要成分,目前已发现6种有功能的大豆球蛋白,G1、G2、G3、G4、G5和G7,编码这些大豆球蛋白的基因家族分别是Gy1、Gy2、Gy3、Gy4、Gy5和Gy7。本文在简要介绍大豆球蛋白组分、结构及基因家族后,采用生物信息学方法分析比较了不同种类大豆球蛋白基因之间的序列同源性,并对不同大豆球蛋白基因的遗传距离作了分析;重点比较分析不同大豆球蛋白的氨基酸序列和组成,以及不同酸性肽和碱性肽中重要氨基酸的含量,提出了利用大豆球蛋白基因进行水稻营养品质改良研究的新思路和新策略。     

黑豆盐溶球蛋白的研究

对经凝胶过滤后的黑豆盐溶球蛋白进行Native-PAGE及双向SDS-PAGE电泳分析,结果表明黑豆7S球蛋白是由3个以非共价键相结合的亚基(MW:84．7kD,72．6kD和49．2 kD)连接而成;黑豆11S球蛋白中则含有以共价键相结合的亚基,同时也可能存在非共价键结合的亚基。其在还原条件下,可分解出5个肽链(MW：38．4kD,35．4kD,34．5kD,21kD和20．6kD),且在电泳图片上明显分为两个区域。     

羊BLG基因5′和3′调控区克隆及其调控GFP基因在乳腺细胞的表达

乳球蛋白 (ＢＬＧ)是反刍家畜的一种主要乳清蛋白质。将外源基因置于ＢＬＧ 5′调控区下游 ,能够控制外源基因在动物乳腺的组织特异性表达。现已清楚在ＢＬＧ 5′端有多个乳核因子 1(ＮＦ1)和转录因子Ｓｔａｔ5的识别位点 ,此外还存在多个激素作用位点[1 ] 。具有这些调控成分的ＢＬＧ 5′翼端 (5′ｆｌａｎｋｉｎｇ)能够控制外源基因在乳腺的表达 ,但受整合位点、外源基因结构以及转基因拷贝数及其排列方式的影响[2 ] 。研究结果表明 ,仅含有 5′调控区的乳腺表达构件 ,还不能使外源基因的表达达到内源性ＢＬＧ的表达水平 ,因为在 5′远端(…     

种子盐溶球蛋白的结构特征

种子球蛋白一直是人类食物的主要来源,随着对种子球蛋白药理作用认识的不断深入,近年来研究重点已从单纯的序列转向结构的研究,种子球蛋白二级结构（如α－螺旋和β－折叠）存在较大程度的相似性,具有较大的保守性且与蛋白质的特殊功能关系密切,而三级结构之间差异明显,属易变异区,主要与蛋白质的一般功能相关。     

百令片联合坎地沙坦对糖尿病肾病患者的临床效果分析

目的:分析百令片联合坎地沙坦对糖尿病肾病患者的临床治疗效果。方法:选择我院2015年6月~2016年6月收治的98例糖尿病肾病作为研究对象,参照抽签法随机分为对照组与观察组,每组各49例。对照组予以坎地沙坦治疗,观察组基于对照组使用百令片治疗,比较两组治疗前后血清胱抑素(Cys-C)、β2微球蛋白(β2-MG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血糖、血压水平和不良反应的发生情况。结果:治疗后,两组血清Cys-C、β2-MG、BUN、Cr、IL-6、CRP、TNF-α、血糖和血压水平均较治疗前显著降低,且观察组血清Cys-C、β2-MG、BUN、Cr、IL-6、CRP、TNF-α和血压水平显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:百令片联合坎地沙坦治疗可更有效改善糖尿病肾病患者的肾功能、血压和血糖水平,抑制其炎症反应,且安全性较好。     

甲状腺球蛋白免疫组织化学在甲状腺癌诊断中的应用

甲状腺球蛋白（thyroid globulin,Tg）是甲状腺滤泡上皮细胞合成的一种大分子糖蛋白。甲状腺滤泡上皮起源的甲状腺癌,约占甲状腺恶性肿瘤的80％,这些癌细胞可以不同程度的合成Tg,在癌细胞胞浆中可见Tg分布状况。本文利用制备的抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体建立甲状腺球蛋白免疫组织化学方法,对判断甲状腺滤泡细胞源性癌有特异诊断意义。     

牛β-乳球蛋白基因调控序列指导组织型纤溶酶原激活剂在小鼠乳腺中的表达

用全长8.4kb的牛β-乳球蛋白基因(BLG)作为调控序列,用1.6kb的鸡溶菌酶MAR序列作为对抗转基因中位点效应的工具,构建了组织型纤溶酶原激活剂(tPA)乳腺表达载体。对2300枚卵进行显微注射,经PCR和Southern\|Blot检测,在170只出生小鼠中获得9只整合有牛BLG-tPA融合基因的转基因小鼠,并在转基因小鼠乳汁中检测到tPA的活性,tPA的表达水平最高达到12μg/mL。整合在小鼠基因组中的牛BLGtPA融合基因能稳定地遗传给子代。     

人血小板生成素基因乳腺特异表达载体的构建和表达

目的为了获得能在转基因动物乳汁中高效表达人血小板生成素（TPO）的特异表达载体。方法将山羊β-乳球蛋白基因5’端上游-3.9kb和-1.9kb调控序列及β-酪蛋白启动子分别与人TPO基因连接,构建了pB3.9T、pB1.9T和pPT3个乳腺特异表达载体。将上述载体分别进行瞬间转染和稳定整合筛选实验,从mRNA及蛋白水平检测TPO基因的表达。结果BLG3.9、BLG1.9和PlA3 3种调控元件都可以启动人TPO在乳腺细胞中特异表达。瞬时转染时3种载体表达水平依次为pPT〉pB3．9T〉pB1.9T。但当外源基因稳定整合入细胞基因组后,TPO表达量持续升高,且pB3.9T表达量明显超过另外两种载体。结论证实了BLG转录子去阻遏和激活转变调节的存在,可能在其5’端-3.9kb与-1.9kb之间存在这一调节区域。并且与BLG1.9相比,BLG3.9能更有效地启动人TPO基因在乳腺细胞中的表达,也说明在-3.9至-1.9kb之间可能存在特殊的增强序列。     

不需要放射性同位素的糖基化DNA探针

在为获得安全、快速、非放射性的DNA标记方法的探索中,我们已研制出用于产生和检测糖基化DNA的程序。此项工作始于葡糖基化DNA(来自T4噬菌体)可被伴刀豆球蛋白(ConA).沉淀这一观察。一种葡萄糖取代的三磷酸胸苷类似物(2′-脱氧尿苷-5-烯丙基胺-麦芽三糖一5′-三磷酸盐)已被合成,并在缺口翻译反应中用于标记DNA。掺入的速度和程度均类似于被代替的三磷酸胸苷。