A Novel ABA Insensitive Mutant of Lotus japonicus with a Wilty Phenotype Displays Unaltered Nodulation Regulation

An ABA insensitive mutant, Beyma, was isolated in Lotus japonicus MG-20 from an EMS mutagenesis population using root growth inhibition to applied ABA as the screening criterion. （The name ＂Beyma＂ was taken from the Australian Aboriginal language, Wagiman, beyma, meaning ‘drying up＇.） The stable mutant that segregates as a dominant Mendelian mutation is insensitive to ABA induced inhibition of germination, vegetative growth, stomatal opening, as well as nodulation. Tissue ABA levels were normal, suggesting a sensitivity rather than biosynthesis mutation. It is slow-growing （50-70% of wild-type MG-20） and has a near-constitutive wilty phenotype associated with its inability to regulate stomatal opening. Whilst showing a wide range of ABA insensitive phenotypes, Beyma did not show alteration of nodule number control, as, in the absence of added ABA, the number and patterning （but not size） of nodules formed in the mutant were similar to that of MG-20. Split root experiments on MG-20 showed that application of ABA on one side of the root inhibited nodulation locally but not systemically. We propose that ABA is not involved directly in systemic autoregulation of nodulation （AON）.     

皮质醇结合球蛋白的生理功能及其编码基因突变

皮质醇结合球蛋白（CBG）对皮质醇具有高亲和力,在调节血液中的皮质醇水平,转运孕酮,参与炎症反应等过程发挥作用。目前已发现的影响CBG的基因突变或单核苷酸多态性有9种,往往影响CBG水平或是CBG与皮质醇的结合能力,CBG缺陷先证者多表现为慢性疲乏,往往伴随着低血压、高血压或者是肥胖,但并不是所有CBG缺陷患者均有上述症状,由于病例报道数量较少,突变与症状的相关性很难确定,仍需更多针对CBG的遗传学研究。     

VCAM-1、VEGF及茁2-MG在过敏性紫癜中含量 及其相关性*

目的：探讨紫癜性肾炎（APN）、过敏性紫癜（AP）和正常对照组血中血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）、血管内皮生长因子（VEGF）和β2-微球蛋白（β2-MG）的含量变化,以及AP中VCAM-1、VEGF和β2-MG之间的相关性,以证实VCAM-1和VEGF参与了AP的部分发病机制。方法：采用ELISA法,检测APN组22例,AP组28例及健康儿童30名为正常对照组的血浆中VCAM-1和VEGF的含量。生化分析仪检测5-组儿童的血132-MG。比较APN组、AP组和正常对照组之间VCAM-1、VEGF和β2-MG的差异,及三者间的相关性分析。结果：血浆VCAM-l含量、VEGF含量和血中β2-MG含量均APN组〉AP组〉正常对照组,差异均有统计学意义（P〈0．01）;在APN和AP组中,血浆VCAM-1、VEGF和血β2-MG散点图呈线性趋势,均呈正相关。三者间相关性分析均r〉0（P〈0．01）。结论：儿童AP血浆VCAM-1、VEGF和血β2-MG含量升高,APN均比AP更高,且三者间均呈正相关。示三者均参与了AP的部分发病机制。     

大肠杆菌表达的重组猪β2微球蛋白二级结构的圆二色谱分析

摘要：【目的】研究巴马小型猪β2微球蛋白（β2m）的结构和功能。【方法】亚克隆巴马小型猪β2m的成熟肽部分,并构建与pMAL-p2X的重组质粒,转化大肠杆菌TB1并诱导后,融合表达蛋白分别经过 Western-blot、纯化及Factor Xa切割,分离纯化单体蛋白。圆二色谱(circular dichroism spectrum, CD)测定蛋白的二级结构。【结果】重组表达的融合蛋白MBP-β2m大小为52.1 kDa。切割后去除MBP的单体蛋白大小为10.6 kDa。圆二色谱分析单体蛋白β2m二级结构     

牛奶过敏原β-乳球蛋白的重组制备及磁微粒化学发光检测法的建立

运用原核系统表达牛奶β-乳球蛋白(Bos d5)蛋白,建立一种纳米磁微粒化学发光方法用于检测牛奶组分过敏原β-乳球蛋白特异性Ig E抗体的含量。通过优化合成牛奶β-乳球蛋白基因,与质粒重组导入Rosetta原核表达菌株中表达目标蛋白,纯化的重组蛋白采用生物素标记后,在化学发光平台上进行过敏原项目检测。获得纯度﹥85%的22.5 kD重组牛β-乳球蛋白,将生物素化的重组蛋白用于牛奶β-乳球蛋白纳米磁微粒检测试剂盒,检测临床110例血清样本,和Phadia进行方法学比对阳性符合率为88.9%,阴性符合率97.3%,总符合率94.5%,P<0.001,χ^2=84.238,Kappa=0.874,其与Phadia参照试剂盒同样具有良好的检测能力。原核表达系统中获得的重组牛奶过敏组分β-乳球蛋白具有较好的免疫活性,开发的免疫诊断试剂盒具备良好的性能,可用于临床辅助诊断。     

肝病患者血清甲状腺相关物质的检测与意义

目的探讨不同程度肝病患者血清甲状腺激素水平的变化及其意义。方法应用放射免疫法分别检测114例慢性肝炎、130例肝硬化、96例重型肝炎、120例健康体检者的血清甲状腺激素水平(T3、T4、FT3、FT4、rT3、TSH),抗甲状腺过氧化物酶抗体(抗TPO)、抗甲状腺球蛋白抗体(抗TG)的含量变化。结果肝病患者较正常人血清甲状腺素水平(T3、T4、FT3、FT4)显著降低,而抗TPO、抗TG、rT3含量显著升高,差异有统计学意义;随着肝功能受损程度的加重,血清甲状腺素水平(T3、T4、FT3、FT4)降低程度差异有统计学意义。结论肝病患者血清甲状腺激素水平的检测对评估肝功能、判断病程及预测预后有一定的临床意义。     

甲亢患者β2-微球蛋白与血脂水平相关性研究

目的：探讨甲亢患者β2-微球蛋白含量与血脂水平的相关性。方法：以甲状腺功能亢进症患者40例作为观察组,另选择同期在我院进行体检的健康人群40例为对照组,分别于治疗前和治疗后检测患者血清和尿β2-微球蛋白、血外周血载脂蛋白、血脂,并进行血清和尿β2-微球蛋白与血脂的相关性分析。结果：治疗前甲亢组血清和尿β2-微球蛋白均高于对照组（P〈0．01）;TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB均低于对照组（P〈0．01）;治疗后,血清和尿β2-微球蛋白与治疗前相比均有所下降（P〈0．01）,TC、TG、HDL—C、LDL-C和APOB与脂类前相比均有所升高（P〈0．01）;血清和尿β2-微球蛋白与TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB均呈负相关。结论：甲亢患者血清和尿β2-微球蛋白与血脂关系密切,可作为评价患者脂质代谢状态和病情变化的重要指标。     

甲亢患者β2-微球蛋白与血脂水平相关性研究

目的:探讨甲亢患者β2-微球蛋白含量与血脂水平的相关性。方法:以甲状腺功能亢进症患者40例作为观察组,另选择同期在我院进行体检的健康人群40例为对照组,分别于治疗前和治疗后检测患者血清和尿β2-微球蛋白、血外周血载脂蛋白、血脂,并进行血清和尿β2-微球蛋白与血脂的相关性分析。结果:治疗前甲亢组血清和尿β2-微球蛋白均高于对照组(P<0.01);TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB均低于对照组(P<0.01);治疗后,血清和尿β2-微球蛋白与治疗前相比均有所下降(P<0.01),TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB与脂类前相比均有所升高(P<0.01);血清和尿β2-微球蛋白与TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB均呈负相关。结论:甲亢患者血清和尿β2-微球蛋白与血脂关系密切,可作为评价患者脂质代谢状态和病情变化的重要指标。     

AFP、AFU、β2-MG、CA199联合检测对原发性肝癌的早期诊断价值

目的:探讨原发性肝癌患者血清甲胎蛋白(AFP)、а-L岩藻糖苷酶(AFU)、β2-微球蛋白(β2-MG)、糖类抗原-199(CA199)的含量及其联合检测对原发性肝癌的早期诊断价值。方法:选择56例原发性肝癌患者、60名肝炎肝硬化患者和60名健康对照作为研究对象,分别应用比值法和化学发光法、生化法检测其血清AFP、AFU、β2-MG、CA199的含量。结果:原发性肝癌患者血清AFP、AFU、β2-MG、CA199含量均显着高于肝炎肝硬化组及健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);联合检测AFP、AFU、β2-MG、CA199四种肿瘤标志物,其阳性率达(85.7%)明显高于AFP(53.6%)、AFU(55.4%)、β2-MG(48.2%)和CA199(42.9%)单项检测组(P均<0.05);且AFP、AFU、β2-MG、CA199四种肿瘤标志物联合检测的敏感性均高于单一检测指标,差异有统计学意义(P<0.05),但其特异性显著低于AFU、β2-MG单项检测(P<0.05)。结论:联合检测血清AFP、AFU、β2-MG、CA199含量可以提高对原发性肝癌的阳性诊断率,对诊断及鉴别诊断原发性肝癌具有重要意义。     

三河牛β-乳球蛋白基因型及其启动子序列特点

[目的]分析三河牛β-乳球蛋白(β-Lg)的基因型,并探索其启动子序列与乳中含量的关系。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测乳中β-Lg遗传变异体及其相对表达量,并通过PCR扩增,比对不同遗传变异体启动子的序列差异。[结果]三河牛(n=62)乳清中β-Lg有AA、AB和BB共3种基因型,频率依次为0.290、0.403和0.307,A和B两种等位基因频率接近;对37个纯合型β-Lg启动子的部分序列进行PCR扩增(636 bp)和测序,并与普通牛β-Lg基因序列(GenBank登录号：U31361.1)比对,共检测到6个突变位点,其中-430、-362、-216和-204位点基本上是等位基因特异的,且有3个突变点在3种转录因子结合基序中;建立了三河牛乳中β-Lg含量的高效液相色谱测定方法,发现β-Lg含量在AA型中极显著高于AB型(P<0.01),但AA、AB型与BB型之间均无显著差异。[结论]三河牛β-Lg A和B两种等位基因频率接近,其启动子-430、-362、-216和-204位点具有等位基因特异性,并可能影响等位基因表达。