新城疫基因工程疫苗研究进展

新城疫基因工程疫苗研究进展霍龙飞,王莉林,卢景良（哈尔滨兽医研究所备医生物技术国家重点实验室,哈尔滨）鸡新城疫（ＮＤ）是由新城疫病毒（Ｎｅｗ－ｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ,ＮＤＶ）所致的一种死亡率很高急性败血性高度接触性禽类传染病,也是养禽业...     

奈瑟氏脑膜炎球菌铁调蛋白性质的研究

由于Ｂ群脑膜炎奈瑟氏球菌的荚膜多糖成份不能提供有效的免疫保护力,人们把希望寄托在脑膜炎球菌的蛋白成份上。目前人们对该菌在限铁环境中表达的一类新的蛋白成份—铁调蛋白研究较多。铁调蛋白已知有６类：ＦｅＲＰ－７０铁结合蛋白,转铁结合蛋白１（ＴＢＰ１）,转铁结合蛋白２（ＴＢＰ２）,乳铁结合蛋白及血红素结合蛋白。其中研究比较清楚的是ＦｅＲＰ－７０及ＴＢＰ１、ＴＢＰ２。ＴＢＰ１是跨膜蛋白,部分暴露于细胞表面。ＴＢＰ２是外膜蛋白,由Ｎ末端的类脂尾巴锚合在膜上。二者均为脑膜炎球菌铁吸收所必需。ＴＢＦ１及ＴＢＰ２在分离层析时往往以复合体的形式一同被纯化,该复合体能诱导保护性抗体的产生,并能提供一定的保护力。进一步的实验证实了ＴＢＰ２的免疫原性。ＦｅＲＰ－７０也为铁吸收所必需,并有菌株特异的抗原保护性。ＴＢＰ１、ＴＢＰ２、ＦｅＲｐ－７０及其它一些胞内蛋白有机组成了脑膜炎球菌的一条吸收铁的路径,而ＴＢＰ２则有希望成为脑膜炎球菌的新型菌苗抗原成份。     

生态蛇胆美容霜对治疗蠕形螨病及护肤美容的效果观察

本文报道了微生态制剂－生态蛇胆美容霜治疗蠕形螨病及其合并症的观察结果。用透明胶带定量计数法检查１１３１人,其中检出毛囊虫阳性者４０４例,定居率为３５．７％,检出毛囊出共４１８只。对４０４例毛囊虫阳性分两组,即实验组,和对照组进行对照。结果实验组２５１例中只有２例仍为阳性,其余转为阴性。     

用重组痘苗病毒表达pGHcDNA的研究

构建了含有ｐＧＨｃＤＮＡ的重组痘苗病毒,用ＥＬＩＳＡ证明该重组病毒在被感染的ｈ１４３细胞中,可表达出猪生长激素并将之分泌到培养基中,表达量约为１．０５μｇ／１０￣６细胞（２４ｈ）。用定位免疫化学法进一步证明该病毒可感染小鼠并在小鼠体内表达ｐＧＨｃＤＮＡ。同时还构建了含双拷贝ｐＧＨｃＤＮＡ的重组痘苗病毒,并证明其ｐＧＨ表达量比单拷贝重组病毒有明显提高,约为１．５０μｇ／１０￣６细胞（２４ｈ）。     

诺卡氏菌属GS-17耐热茁霉多糖酶的提纯和性质

诺卡氏菌属GS-17(Nocardia sp.GS-17)的耐热茁霉多糖酶(Pullulanase EC.3.2.1.41)的粗酶液经中空纤维柱超滤浓缩、羟基磷灰石柱层析和Pullulan-Sepharose 6B亲和层析,得到凝胶电泳均一的纯酶,比活提高264倍.酶作用最适温度为55℃,最适PH6.2,分子量140000,等电点pI为6.0.该酶水解茁霉多糖、支链淀粉和可溶性淀粉,但不水解糖原.酶在50℃作用于茁霉多糖的米氏常数K_m为0.90mg/ml,最大反应速度V_(max)为57μmol·min~(-1)·mg~(-1).Zn~(2 )、Fe~(3 )、Hg~(2 )、Cu~(2 )、Pb~(2 )和环状糊精对酶有抑制作用,Ca~(2 )对酶有激活作用.经蛋白质侧链化学修饰研究表明,色氨酸残基位于酶的活性位区.该酶是由1129个氨基酸残基组成的单肽链,酶的N末端序列经测定为:Ala-Gly-His-Gly-Pro-Asp-Val-Gln-Asp-Gly-     

应用亲和层析法提纯 鸡马立克氏病病毒pp38基因重组产物

利用鸡马立克氏病病毒(MDV)1型特异单克隆抗体H19致敏Sepharose 4B—cNBr,从感染重组病毒BP38Ⅱ的昆虫细胞中提纯鸡马立克氏病毒pp38基因重组产物,获得良好效果。提纯的蛋白质在SDS—PAGE中表现出一条分子量约为38kDa的蛋白质条带,在免疫印迹试验中该蛋白质条带也能被单克隆抗体H19识别。利用该提纯的重组pp38免疫小鼠,所制备的小鼠抗血清在免疫荧光染色试验中不仅能与感染重组病毒的昆虫细胞Sf9反应,也能和Ⅰ型MDV型感染的鸡胚成纤维细胞反应。     

卡拉胶固定粘质赛氏菌产碱性蛋白酶的研究

将粘质赛氏菌(Seratia marcescens)包埋于卡拉胶中,发现2．5％的卡拉胶适于固定该菌产碱性蛋白酶。固定化细胞在其较适宜产酶培养基中发酵,酶活力一般可达400u/ml,在卡拉胶中添加3％玉米粉和1%豆饼粉或2％砂子制备固定化细胞,其产酶能力分别提高了25%和23．9％;固定化细胞颗粒越小,其产酶能力越高。采用摇瓶半连续发酵。其产酶半衰期为14次(24小时为一个周期);而用环流器进行半连续发酵,其产酶半衰期为52次(12小时为一个周期),产酶效率分别比游离细胞摇瓶发酵的产酶效率高11．8％和45．07％,而环流器半连续发酵的产酶效率比摇瓶半连续发酵高29．7％。     

卡氏膜球藻鞭毛伸缩节律的研究

卡氏膜球藻（Ｈｙｍｅｎｏｍｏｎａｓｃａｒｔｅｒａｅ）是一种单细胞海藻,细胞圆球形,表面覆盖一层球形石（Ｃｏｃｃｏｌｉｔｈｓ）。两条鞭毛稍不等长,着生于细胞前端,鞭毛长约为细胞直径的１．５倍。在２５±℃,光照强度２０００ｌｘ,光暗时间比１４：１０小时条件下,用ＭＥＳⅢ培养基培养卡氏膜球藻,发现细胞在光照条件下伸出鞭毛,活跃游动;在黑暗条件下缩回鞭毛,沉于培养瓶底。进一步试验证明：１．光刺激细胞伸出鞭毛,黑暗刺激细胞缩回鞭毛。２．鞭毛的伸缩与培养中的光暗周期变化严格对应,即光周期开始后２０分钟,细胞开始伸出鞭毛;暗周期一开始,鞭毛就向细胞内收缩。３．在连续光照条件下,鞭毛的周期性伸缩现象消失。所以,卡氏膜球藻鞭毛周期性伸缩是一种受光暗周期调节的外源节律。这种鞭毛伸缩的节律现象在藻类是第一次报道。