几种海产品中氨基酸及牛碘酸含量的比较

通过对几种海产品进行氨基酸分析,确证海产品中除了含有常见的１８种氨基酸外,还有含量较高的牛碘酸,对其进行了研究探讨。     

乳鼠脑组织中牛磺酸的快速检测

建立一种快速、准确的牛磺酸定量检测方法。采用Beckman公司6300黄金系统氨基酸分析仪,在锂柱130 min程序生理体液分析方法基础上,根据牛磺酸(TAU)的特性,建立了脑组织中TAU快速测定方法。用此方法完成TAU分析的时间为17 min,比原方法缩短了123 min。且有较好的重现性(日内RSD 0.42%,日间RSD 0.57%)、回收率高(98.39%)。本方法简便、快速、准确、可靠,适用于临床和科研工作。     

牛磺酸、羟脯氨酸、γ－氨基丁酸、鸟氨酸和色氨酸的测定

在日立８３５－５０型氨基酸分析仪上,用７２ｍｉｎ程序进行分析,通常一次只能分析１７种氨基酸。采用本文所述方法则一次能分析２２种氨基酸。在不延长分析时间,不增加成本的情况下,一次多分析了五种氨基酸,提高了仪器工作效率。经过精密度、准确度试验和样品分析证明：该方法测定的数据准确、可靠,是一个又快又省的好方法。     

牛磺酸对脑创伤大鼠脑超微结构及P2X7受体表达的影响

目的:探讨牛磺酸对脑创伤大鼠脑超微结构及P2X7受体蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分成4组(n=10):假手术组、脑创伤组、脑创伤+低剂量牛磺酸组和脑创伤+高剂量牛磺酸组。采用Marmarou’s方法建立脑创伤模型,免疫组织化学法观察顶叶皮层、海马P2X7受体蛋白表达,透射电镜观察顶叶皮层超微结构。结果:与假手术组相比,脑创伤组顶叶皮层、海马P2X7阳性表达细胞显著增多(P<0.01);与脑创伤组相比,脑创伤+低、高剂量牛磺酸组顶叶皮层、海马P2X7阳性表达细胞显著减少(P<0.01或P<0.05),与脑创伤+低剂量牛磺酸组相比,脑创伤+高剂量牛磺酸组顶叶皮层、海马P2X7阳性表达细胞显著减少(P<0.05或P<0.01)。脑创伤+高剂量牛磺酸组顶叶皮层病理改变明显减轻。结论:牛磺酸可对脑创伤大鼠发挥脑保护作用,其机制可能与下调P2X7受体蛋白表达有关。     

一个新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因的分析和突变

【目的】完成一个来源于碱性污染土壤宏基因组文库的新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因undec1A的鉴定,研究其酶学性质并利用非理性设计技术对其进行分子改造。【方法】以p ETBlue-2为表达载体构建包含undec1A基因的重组表达质粒,转化至宿主细胞E.coli Tuner(DE3)p Lac?中构建重组表达克隆,采用镍亲和层析完成了酶蛋白的分离纯化,完成其生化特征研究,利用连续易错PCR技术对Undec1A蛋白进行分子改造。【结果】生物信息学分析结果揭示Undec1A蛋白与已知的L-半胱亚磺酸脱羧酶存在类似的辅酶结合位点和底物识别催化基序等。分子对接结果显示氨基酸残基Val237、Asp239、Asp266、Ile267、Ala268和Lys298等决定了与底物分子L-半胱亚磺酸的识别和结合催化。以L-半胱亚磺酸作为底物,重组Undec1A蛋白的最适作用p H为7.0,最适作用温度为35°C;分子动力学常数K_m为(1.557±0.015)mmol/L,V_(max)为(49.07±3.19)μmol/(L·min),k_(cat)为(45.80±1.32)/min。利用连续易错PCR技术完成了亲本酶的分子改造,分离筛选到了一个酶活力更高的突变酶Undec1A-1180。在优化条件下,Undec1A-1180的比活力较亲本酶提高了约5.62倍。【结论】本研究为构建牛磺酸的生物合成工艺提供了理论参考,因而具有重要的实践意义。     

牛磺酸对虎纹蛙非特异性免疫及血清氧化还原状态的影响

为探讨牛磺酸在无尾两栖类免疫调节和抗氧化能力方面的功能和作用,通过灌胃方式研究了不同浓度牛磺酸对虎纹蛙(Hoplobatrachus rugulosus)脾巨噬细胞呼吸爆发、外周血吞噬活力、胃溶菌酶活力以及血清丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量的影响。结果表明:连续7 d的牛磺酸灌胃可显著提高脾巨噬细胞的呼吸爆发强度和外周血细胞的吞噬活力并呈现出明显的剂量效应。当灌胃浓度达到0.8 g/L时两者均达到峰值,但高于0.8 g/L时则表现出条件毒性。胃溶菌酶活力在各浓度下无明显变化。此外,血清MDA含量随牛磺酸浓度的升高而降低,GSH含量在一定的浓度范围内呈现出明显的剂量效应,在1 g/L时达到峰值。研究结果证明牛磺酸可以明显提高虎纹蛙的非特异性免疫功能和机体氧化防御能力,但摄入过量则表现出条件毒性。基于上述指标的评估,虎纹蛙对牛磺酸的适宜需求量按体重计算约为16~20 mg/kg。     

牛磺酸氯胺抗病原微生物和抗炎作用研究进展

牛磺酸氯胺(chloramine taurine, TauCl)是机体在炎症环境下产生的一种卤代产物,其主要由活化的中性粒细胞经髓过氧化物酶催化生成次氯酸,再进一步与胞内牛磺酸反应而合成。近年来大量研究集中在TauCl广谱的抗病原微生物作用和对急慢性炎症的抗炎作用。该文从TauCl的合成、杀伤病原微生物作用、抗氧化应激损伤作用和抗炎作用等方面对其进行综述,以期为将TauCl开发成兼具抗病原微生物和抗炎作用的生物活性物质或药物提供参考。     

牛磺酸对血管紧张素Ⅱ改变培养心肌细胞内游离Ca2+浓度作用的影响

目的和方法 :用Fura 2 /AM .荧光显示测定细胞内游离Ca2 浓度 ([Ca2 ]i)的方法 ,我们研究了牛磺酸 (Tau)对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )引起的培养心肌细胞 [Ca2 ]i变化的影响。结果 :在有Ca2 和无Ca2 的缓冲液中 ,AngⅡ (1 ,1 0 ,1 0 0 ,1 0 0 0nmol/L)能浓度依赖性地引起 [Ca2 ]i升高。在含Ca2 的缓冲液中 ,Tau(1 0 ,2 0mol/L)可依浓度地抑制AngⅡ (1 0 0nmol/L)引起的 [Ca2 ]i升高 ;但在无Ca2 的缓冲液中 ,牛磺酸无此作用。用ryanodine(Rya ,1 μmol/L)预先耗竭细胞内贮存的Ca2 后 ,AngⅡ (1 0 0nmol/L)仍能引起 [Ca2 ]i进一步升高 :AngⅡ的这一作用能被Tau(2 0mmol/L)显著抑制。结论 :在培养的乳鼠心肌细胞 ,Tau能够通过抑制AngⅡ引起的Ca2 内流而拮抗AngⅡ升高 [Ca2 ]i的作用。